冬凤兰非共生萌发和低温离体保存（英文）

[Objective] The aim of the research was to establish asymbiotic germination and low-temperature in vitro conservation technique system of Cymbidium dayanum by using plant tissue culture technique to realize its rapid propagation and long-term conservation in vitro.[Method] With mature seeds of C.dayanum as explants,different media were selected to establish asymbiotic germination technique system.With protocorms as materials,conservation,resumptive proliferation and plant regeneration conditions were selected to establish low-temperature in vitro conservation technique system preliminarily.[Result] Mature seeds of C.dayanum could germinate after cultured 90 days on MS media as well as "Hyponex 1" media.The germination rate reached more than 98%.Protocorms inoculated in "Hyponex 1" media could be conserved continuously at 5 ℃ in dark for more than 18 months and the survival rate could reach 90%.Conserved protocorms could realize resumptive proliferation culture both on 1/2 MS and "Hyponex 1" media.The seedling-strengthening and rooting media were 1/2 MS media.[Conclusion] This research provided practical basis for in vitro conservation and rapid propagation of C.dayanum germplasm resource.     

‘小黄’菊遗传转化再生体系的建立

以‘小黄’菊茎段、叶盘为外植体 ,选用MS培养基为基本培养基 ,附加激素 6 BA和NAA ,通过研究不同激素浓度组合对外植体愈伤诱导及不定芽分化的影响 ,建立了较好的遗传转化再生体系 .试验结果表明‘小黄’菊茎段、叶盘最适分化培养基分别为MS +6 BA 2mg L +NAA 1mg L和MS +6 BA 1mg L +NAA 0 1mg L ;小苗的最佳生根培养基为 1 2MS +NAA 0 1mg L ,生根率可达 10 0 % ;4 0mg L卡那霉素可以抑制茎段的分化 ,10mg L卡那霉素可以抑制叶片的分化 ,2 0mg L卡那霉素可以抑制分化小苗的生根 .     

农杆菌介导的大花蕙兰转ICE1基因

大花蕙兰属热带植物,在北方组培成本很高,从拟南芥的RNA中克隆到耐寒基因(COR)的转录激活因子ICE1,连上CaMV35S启动子构建成植物表达载体pCAM BIA1300-35S.ICEl-poly,通过农杆菌介导的方法转化大花蕙兰.经过抗性筛选、诱导生芽、诱导生苗、诱导生根等过程.获得了70多棵潮霉素抗性植株,PCR鉴定12.9%为阳性.且部分PCR阳性植株通过了Southern检测,确定为转基因植株.     

独占春种子非共生萌发和低温离体保存

独占春(Cymbidium eburneum Lindley)成熟种子无菌播种诱导原球茎,并以原球茎进行低温离体保存。结果表明:在培养基花宝1号3g/L LH(水解乳蛋白)1g/L BA(细胞分裂素)0.5 mg/L NAA(生长素)0.1 mg/L CM (椰子汁)100 ml/L AC 2 g/L 蔗糖25 g/L中种子萌发出原球茎;原球茎在培养基1/2 MS LH 0.5 g/L BA 0.5 mg/L NAA 0.1mg/L AC 2g/L 蔗糖20g/L中于6℃黑暗条件下连续保存了20个月,成活率达85%,并能在恢复培养基MS BA 3～5 mg/L NAA 0.2 mg/L AC 1g/L CM 100 ml/L 蔗糖25 g/L中进行恢复增殖培养。     

大花蕙兰再生体系建立的研究

[目的]研究并建立大花蕙兰再生体系。[方法]用75%酒精和0.1%升汞进行表面灭菌,以MS为基本培养基,采用L9(33)正交试验设计进行类原球茎增殖的优选,以继代培养40 d后的增殖系数及幼苗分化率为考察指标。[结果]在大花蕙兰离体再生过程中,侧芽是最容易启动的外植体;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+AC 0.1 g/L是类原球茎诱导的最佳培养基;1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L是类原球茎增殖和幼苗分化的最适宜培养基;芽分化后,待长至2~3 cm时,小心切下接入1/2 MS+NAA 1.0 mg/L+GA31.0 mg/L+香蕉泥150 g/L培养基中生根壮苗效果最好。[结论]为规模化生产提供依据。     

大花蕙兰(Cymbidium hybridium)离体快速繁殖技术

以大花蕙兰茎尖和茎节段作外植体进行了离体快速繁殖技术研究。结果显示:茎尖诱导芽的效果优于茎节段;适宜诱导培养基为MS BA4.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC0.6g·L-1,茎尖在该培养基上芽的诱导率为71.4%;丛芽增殖适宜培养基为MS BA2.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC03.g·L-1,增殖率为3.79;原球茎增殖、分化的适宜培养基为MS BA1.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC0.3g·L-1,增殖率为6.1,分化率为71.1%;生根和壮苗的适宜培养基为MS NAA0.5mg·L-1 AC0.3g·L-1,试管苗生根率达100%。     

不同氮磷钾配比对大花蕙兰营养生长的影响

该文阐述了氮、磷、钾三要素的不同浓度配比对大花蕙兰营养生长的影响.试验结果表明:N肥对大花蕙兰叶面积增量、假鳞茎的直径、叶片长度的影响达到极显著差异,对假鳞茎增量也达到显著差异;同时K肥对叶面积增量、叶片长度的影响达到极显著差异;但P肥对所有生长指标均未达到显著差异.最佳的N、P、K组合是N 3P1K3,即 N:P2O5:K2O=4.36:1:4.92.     

桔梗等3种中药材有机氯农药残留研究

采用丙酮水提取体系、二氯甲烷液液分配、浓硫酸磺化净化技术、气相色谱OV－1701毛细管柱内标法对桔梗、牛蒡子和两头尖中有机氯农药残留进行了研究，结果表明：这3种中药材中均有不同程度的有机氯农药残留，但基本上未超过国家标准中人参有机氯农药最大允许残留限量。     

大花蕙兰试管苗玻璃化发生原因及防止技术研究

试验结果表明,大花蕙兰试管苗玻璃化的原因主要有3个:一是培养温度的突然升高,造成高温伤害的后遗症,引发玻璃化;二是经过多次继代培养,原球茎过多吸收细胞分裂素6-BA,使体内激素比例严重失调,导致玻璃化;三是长期使用氨、锰、铁、锌等含量较低的培养基,引起玻璃化苗的产生。采取相应的技术措施,可以完全控制玻璃化苗的发生。     

大花蕙兰原球茎增殖、分化与离体保存的研究

以大花蕙兰原球茎为材料,从培养时间、基本培养基、糖浓度、培养方式及切割方式5个方面探讨了原球茎增殖、分化及离体保存的问题。结果表明,2个月内随着培养时间的延长,原球茎增殖与分化越显著,但培养2个月后,原球茎增殖不明显,分化却持续增加;1/2MS基本培养基利于原球茎增殖与分化,而3MS基本培养基利于原球茎保存;糖浓度的高低对原球茎增殖与分化影响显著,20 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎保存,50 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎增殖,而原球茎分化成苗应选用30 g·L~(-1)白糖;在3种培养方式中,固体培养利于原球茎分化,液体振荡培养利于原球茎增殖,液体静置培养利于原球茎离体保存;片状切割法利于原球茎增殖与分化,整体剥离接种法利于原球茎保存。即以2.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA为激素组合时,以片状切割法接种原球茎于1/2MS+50 g·L~(-1)蔗糖的培养基中并以液体振荡方式培养时利于原球茎增殖;以片状切割法接种原球茎于1/2MS+30 g·L~(-1)白糖的培养基添中并以固体方式培养时利于原球茎分化成试管苗;以整体剥离法接种原球茎于3MS+20 g·L~(-1)蔗糖培养基中并以液体静置方式培养时利于原球茎保存。上述结论为大花蕙兰试管苗快速繁殖与离体保存提供了有效的技术支持。