基因探针和PCR对鲤吉陶单极虫的检测

采用液氮冷冻研磨法破碎吉陶单极虫（Ｔｈｅｌｏｈａｎｅｌｕｓｋｉｔａｕｅｉ）孢子，按常规法提取其基因组ＤＮＡ。取ＤＮＡＥｃｏＲＩ消化产物，采用低熔点琼脂糖回收法制备大（３．０～１５．０ｋｂ）、小（０．５～３．０ｋｂ）片段，将其克隆于ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔｋｓＥｃｏＲＩ位点，经α－互补现象、酶切鉴定和虫体ＤＮＡ生物素标记探针筛选，构建了含２３个克隆的基因文库，克隆片段介于０．９～６．８ｋｂ之间；经阳性克隆标记筛选及特性分析，制备了长度为０．９ｋｂ（１９号质粒克隆片段）的探针，该探针具有较强的敏感性和特异性。对该探针两端ＤＮＡ序列进行分析，设计出１对引物。上游引物序列为：５′ＴＴＴＣＧＡＡＣＣＣＧＣＡＣＡＡＣＡＡＧ３′，下游引物序列为：５′ＴＧＡＧＴＧＧＡＴＡＧ－ＴＡＴＣＧＣＴＧＣ３′。应用该对引物对虫体进行了检测     

牛病毒性腹泻-黏膜病病毒噬菌体单链抗体库的构建和筛选

为筛选牛病毒性腹泻-黏膜病病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）gP48蛋白的单链抗体,本研究利用噬菌体展示技术构建了gP48蛋白单链抗体克隆文库,通过微孔筛选法对抗体库进行3轮富集淘筛,利用ELISA技术测定单链抗体的亲和力,对亲和力较高的克隆进行基因测序分析和结合活性测定,旨在获得gP48蛋白的单链抗体。结果表明：1）成功构建了库容量为4.3×107的噬菌体单链抗体库,其重组率为83.3%,经三轮筛选对噬菌体抗体库进行富集,富集倍数为1.43×104;2）优化了间接ELISA方法,筛选到3株与BVDV gP48蛋白具有高亲和力的单链抗体以及其基因序列,通过IgBLAST分析显示,3株单链抗体均为鼠源IgG。综上,从gP48蛋白的单链抗体库中筛选获得3个具有高亲和力的单链抗体,可用于后续BVDV检测方法的建立。     

猪外周血单个核细胞cDNA酵母表达文库的构建及与猪瘟病毒E2蛋白相互作用细胞蛋白的筛选

为研究猪瘟病-毒(CSFV)蛋白与宿主细胞蛋白之间的相互作用,本研究通过SMART技术合成猪外周血单个核细胞(PBMC)双链cDNA,以携带与载体pGADT7-Rec重组位点同源序列的特异引物经long-distance PCR扩增双链cDNA.纯化双链cDNA并与载体pGADT7-Rec共转化酵母菌株Y187,经同源重组构建PBMC cDNA酵母表达文库.以CSFV E2蛋白为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到阳性克隆根据序列比对分析结果,进一步进行共转化验证.结果显示筛选到17个与CSFV E2蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,基因注释(GO)分析表明这些蛋白分别参与免疫、代谢、细胞生长与增殖、生物调节等过程,为研究它们与CSFV E2的相互作用奠定了基础.     

注重党校图书馆的信息资源建设

党校图书馆是党校的信息中心,担负着为教学、科研服务的重任.新时期信息资源的多元化、爆炸式增长决定了党校图书馆必须加强信息资源建设.本文论述了加强党校图书馆信息资源建设的必要性、内容.提出了加强信息资源建设的措施.     

浅谈数字图书馆的几个问题

本文围绕着数字图书馆与传统图书馆的关系问题、数字图书馆与知识产权的保护问题以及数字图书馆的信息资源建设问题,展开了深入的探讨和分析,并提出了自己的看法.     

浅谈高校图书馆在社会主义新农村建设中的作用

建设社会主义新农村是我国现代化进程中的重要历史任务,高校图书馆应积极参与.文章论述了高校图书馆为社会主义新农村建设服务的必要性,进一步探索其为农村和农业服务的新路子、新举措.     

强化馆员的职业素养增强图书馆的软实力

剖析了当前高校图书馆员职业素养中存在的问题,探讨了提高图书馆员素养的方法和途径.     

新农村建设中乡镇图书馆的发展方向

乡镇图书馆发展明显滞后,严重制约了我国图书馆事业的和谐、有序发展;在新农村建设中各级政府、各个职能部门高度重视并给予必要的支持,乡镇图书馆将为新农村建设、发展、和进步提供足够的原动力.     

知识共享(CC)与数字图书馆的合作

版权问题一直制约着数字图书馆的发展,知识共享许可协议的使用可以帮助数字图书馆平衡版权保护和知识传播之间的关系.本文就知识共享(CC)与数字图书馆的合作进行了探讨.     

网络技术下虚拟图书馆的建设

通过对虚拟图书馆的内涵解读,阐述了虚拟图书馆的属性特征,提出了虚拟图书馆建设的内容和对策,目的是为了促进虚拟图书馆向着又好又快的方向发展.