氟苯尼考联合铜环境胁迫对土壤固氮菌成膜能力及相关基因表达的研究

【目的】研究氟苯尼考和铜(Cu)残留对土壤固氮菌的生态毒性效应，为评价兽药的环境风险提供依据。【方法】对从花生根际土壤中分离出的一株优势固氮菌RpEC2071进行氟苯尼考和铜胁迫处理，试验设置空白组(0μg/mL)、氟苯尼考添加组(40μg/mL)、Cu添加组(200μg/mL)和混合组(氟苯尼考40μg/mL+Cu 200μg/mL)，并于给药后采样。采用苯酚硫酸法和96孔法研究氟苯尼考和Cu单独或联合处理对固氮菌胞外多糖产生及生物膜形成能力的影响。采用RT-qPCR测定分析固氮菌生物膜及固氮相关基因的mRNA表达水平。【结果】氟苯尼考和Cu单独胁迫会促进生物膜的形成，二者生物膜形成能力约为空白组的2倍；混合胁迫会抑制生物膜的形成，空白组生物膜形成能力是其3.1倍。胞外多糖分泌结果与生物膜形成能力测定结果基本一致。生物膜相关基因与氮代谢调控基因呈显著正相关，氟苯尼考和Cu的添加改变了fli Q、nif H和nnr R等基因的表达水平，且二者联合处理后会对其表达分别产生协同或拮抗作用。【结论】氟苯尼考与Cu的单独或联合胁迫影响固氮菌RpEC2071中生物膜相关基因表达，进而对其生物膜形...