Culture of mantle epithelial cells expressing shell matrix proteins from scallop Patinopecten yessoensis

ABSTRACT:   In molluscs, mantle epithelial cells secrete organic matrix proteins to form shells. In this study, we established a culture of mantle epithelial cells by using the mantle pallial layer of scallops. We aimed to identify the mantle epithelial cells expressing scallop shell matrix proteins and establish a culture system of epithelial cells. After the mantle pallial layer was carefully isolated from the mantle tissue, explant culture was performed at 4°C. Most cells that migrated from the explant tissue were round cells. Most of the adhered cells retained round morphology, while some of the cells adhered to the dish and showed morphology similar to that of epithelial-like and fibroblast-like cells. When the cultured cells were immunostained with a polyclonal antibody against the shell matrix protein, the antibody recognized many of the adhered cells. An estimation of the number of epithelial cells revealed that approximately 70% of the adhered cells were epithelial cells. This is the first report to describe epithelial cells in cultured mantle cells, which express shell matrix proteins. This culture system may be a useful method for characterization of the mantle epithelial cells.     

三角帆蚌新发现的贝壳基质蛋白基因hic9的分离、鉴定及其在珍珠早期形成过程中的作用

为进一步研究珍珠质形成的分子机理,使用RACE-PCR技术从三角帆蚌外套膜中克隆到一个新的贝壳基质蛋白基因hic9。RT-PCR和原位杂交技术结果显示,hic9主要在闭壳肌和外套膜中表达,且在外套膜外褶的外表皮各部分都有信号,在壳皮沟中同样有信号,这些结果表明,hic9是一个同时参与了贝壳角质层、棱柱层和珍珠层形成的多功能基质蛋白基因。hic9富含甘氨酸(14.81%)、脯氨酸(13.58%)和丙氨酸(12.35%),在序列中部形成"Gly-X-X"的结构(X为任意氨基酸),与近C末端连续重复丙氨酸结构(polyA)一起使hic9具有类似蛛丝蛋白的结构特征。hic9 C末端由一段疏水性序列"LAWMLFV"组成,推测这段序列形成β折叠结构,紧邻该序列89～91位是"Asp-Leu-Asp"序列,这是一个典型的Ca2+结合位点。此外,通过实时定量PCR检测了珍珠形成早期阶段hic9在初生珍珠囊中的表达情况,插片后3～15 d hic9在珍珠囊中的表达水平维持在大致相同的表达水平,在碳酸钙沉积物从无序向有序转变时期(18～25 d),表达水平较第15天有显著的升高,这表明hic9参与了这一过程,在珍珠层的形成过程中发挥了关键作用。     

复合酸化剂对断奶仔猪生产性能的影响

为研究复合酸化剂对断奶仔猪生产性能的影响,此次试验选取了40头28±2日龄杜×长×大三元杂交断奶仔猪,并将它们随机分成4个处理组。这4个处理组均饲喂基础日粮,其中,试验1、2、3组分别添加0.1%复合酸化剂、0.2%复合酸化剂、0.3%复合酸化剂,对照组不做任何处理。试验结果表明,在30d试验期内,试验组仔猪比对照组仔猪平均日增重分别提高了5.9%、13%、10.24%,其中基础日粮中添加0.2%复合添加剂的试验组与对照组日增重差异显著(P<0.05);料肉比分别下降了7%、10.21%、8.13%;并且试验组的仔猪腹泻率较之对照组有明显的下降。试验发现,日粮中添加复合酸化剂能显著改善断奶仔猪生产性能,复合酸化剂添加量为0.2%时,仔猪的生产性能最佳。     

虎掌菌酶解提取物抑菌试验研究

采用木瓜蛋白酶、纤维素酶对虎掌菌进行酶解提取,并检测提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌、青霉菌和黑曲霉的抑菌效果。结果表明,不同提取方法所得粗提物都有不同程度的抑菌效果,提取液对黑曲霉和青霉菌的抑菌效果最明显,对酵母菌抑菌效果最不明显。     

基于图像旋转投影的导航路径检测算

提出一种农业车辆视觉导航路径识别算法--旋转投影算法.该算法通过角度枚举对图像ROI实施旋转变换,由旋转后图像的列均值与枚举角度构成旋转投影矩阵R,对其行向量实施差分运算得到差分旋转投影矩阵Rd,由Rd的极值可确定图像导航路径,即航向偏差θ与航位偏差d,进而可以求得世界坐标系下的导航路径参数.同理可以对田头线进行检测.为了提高算法的实时性,提出设定合理的ROI、实施线性压缩、旋转角度先粗分再细分的二步法以及充分利用前帧信息4种处理方法,使处理一帧用时6.2ms左右.通过对不同条件下成熟小麦图像测试表明,该算法识别导航路径准确率达到95%.     

基于粗糙集的属性约简算法在农业机械中的应用

传统的利用区分矩阵进行属性约简算法,其时间复杂度和空间复杂度很大.近年来提出了各种启发式算法,其时间复杂度由原来指数级递增降到了平方级递增,但此算法并不能保证找到最优解.为此,提出了属性约简的改进算法,其在时间复杂度和空间复杂度上都降低很多,易于求出最优解.把此算法用于对一款农业机械的评估判断和规则提取,用VC++和SQL Server 2000进行实现,并通过专家数据验证其正确性.     

育珠对合浦珠母贝N19和Prismalin-14基因表达水平的影响

为探讨育珠对壳基质蛋白基因表达的影响,开展了合浦珠母贝（Pinctada fucata）N19和Prismalin-14基因在育珠贝和非育珠贝中的荧光定量表达研究。结果显示,N19和Prismalin-14在育珠贝与非育珠贝的闭壳肌、肝胰脏、性腺、肠、鳃等组织中均无表达,在外套膜均有表达;N19在珍珠囊表达,而Prismalin-14则不表达。N19勺Prismalin．14在育珠贝外套膜的表达量均大于非育珠贝,表明育珠可能对某些壳基质蛋白的表达具有一定的促进作用。其中Prismalin-14在育珠贝外套膜的表达量最高（P〈0．01）,是非育珠贝外套膜Prismalin-14的1．23倍,是育珠贝外套膜N19的25．04倍,是非育珠贝外套膜N19的41．04倍,推测在珍珠贝生长过程中,对Prismalil7-14的需求量可能比N19大。N19在育珠贝珍珠囊中表达量最高（P〈0．01）,是育珠贝N19外套膜的11．58倍,是非育珠贝外套膜的18．97倍,推测在珍珠形成的过程中,对N19的需求量可能比贝壳自身生长对N19的需求量大。     

基于矩阵变换的车载玉米叶绿素含量快速预测系统偏差分析

为了对车载玉米叶绿素含量快速预测系统偏差进行分析,优化车载系统测量结果,该文提出一种空间插值和多维矩阵分析相结合的思想,阐述了基于矩阵变换和GIS空间分析手段的预测偏差分析策略,提高了车载系统快速预测空间分布的预测效果。研究结果表明：使用BP神经网络模型和RBF神经网络模型对车载系统动态预测单点位置叶绿素含量具有一定预测效果,平均决定系数R2约为0.8,2类模型的预测效果相近。RBF神经网络预测结果矩阵经反距离加权法插值后,其空间分布预测偏差度小于10%的数据量占总数据量的85%。表明该方法具有较好的空间预测效果,可以为车载系统动态测量平台预测玉米冠层叶片叶绿素含量的提供决策支持。     

不同剂量VB6、COB对苹果幼树生物学性状和理化性质的影响

以富士/平邑甜茶(M.hupehensis)二年生幼树为试材,研究盆栽条件下土壤中施加不同剂量的维生素B_6(VB_6)和复合维生素B(C_OB)对苹果幼树生物学性状和理化性质的影响。于2016年在山东农业大学园艺科学与工程学院果树根系实验室进行富士苹果盆栽试验。5月26对富士苹果土施VB_6、C_OB,剂量分别为0,0.02,0.03,0.04g/株。6—10月测定外源维生素条件下苹果幼树株高、茎粗,叶面积,叶片抗氧化酶活性,叶绿素相对含量,光合荧光参数以及根系的生长分布状况。研究表明,不同剂量VB_6和C_OB对苹果幼树株高、茎粗,植株生物量,叶面积,叶片抗氧化酶活性,光合荧光参数和根系分布情况有不同程度的影响。盆施不同剂量VB_6、C_OB显著改善了植株生长势,叶面积以VB_6 0.03g增加最显著为22%,植株地上部分以C_OB 0.04g处理对植株株高、茎粗和新梢长度增加最显著,株高、茎粗和新梢长度在10月相比对照分别增加了24%,34%和45%,VB_6 0.03g与C_OB 0.04g两处理间无显著性差异;地下部分,VB_6 0.03g与C_O B 0.04g两处理对根系干鲜重、总长度、总体积和总表面积增加尤为显著,根尖数和根系分叉数也显著增加。VB_6 0.02g和C_OB 0.02g剂量下苹果幼树叶片抗氧化酶活性相比对照无显著性差异,VB_6 0.03g与C_OB 0.04g植株抗性得到显著性增强,抗氧化酶活性显著提高。此外,苹果幼树叶片叶绿素相对含量显著提高、光合荧光特性也得到显著性改善,且VB_6 0.03g与C_OB 0.04g两处理间无显著性差异。综合研究结果,VB_60.03g/株和C_OB 0.04g/株对苹果幼树的生物学性状和理化性质影响最显著,鉴于C_OB的有效施用剂量和市场价格均高于VB_6,推荐施用VB_6来改善土壤营养条件。     

木薯渣复合基质在辣椒穴盘育苗上的应用效果

为了综合利用木薯渣废弃资源,本研究以木薯渣作为基本原料,辅以不同比例的蔗渣、菌糠等,配制成9个配方的木薯渣复合基质,并进行理化性状分析和辣椒穴盘育苗试验。试验结果表明,绝大部分复合基质的容重、pH、C/N、电导率和大小孔隙比均在优良无土栽培基质要求的范围内;其中,复合基质配方2（67%木薯渣＋5%蔗渣）、配方7（62%木薯渣＋10%菌糠）和配方9（42%木薯渣＋30%菌糠）对辣椒穴盘育苗的效果最好,所对应的辣椒苗的株高、地上部鲜重和根鲜重均比其它基质配方高,辣椒苗根部结团效果亦较好。因此,利用木薯渣可以合成复合基质用于辣椒的无土栽培穴盘育苗,该研究结果将为木薯渣废弃资源的再利用提供了一条新的途径。