内生真菌球毛壳ND35对五种植物生长的影响

球毛壳（Chaetomium globosum）ND35是一株优势内生真菌,对多种作物有促生作用。本试验主要研究了球毛壳ND35不同菌剂和接种次数对杨树扦插苗、菜豆、黄瓜、烟草、生姜生长的影响。结果表明,两次接种对杨树苗高生长影响更明显,但对胸径和地径影响不大;菌剂3应用于菜豆、黄瓜时效果较好;育苗时接种对烟草叶片数影响较大,移栽时接种主要影响株高生长;能够增加生姜的产量。     

螺旋毛壳ND35抗生素的产生及其在病害生物防治中的作用

内生菌螺旋毛壳Chaetomium spirale ND35是一株广谱拮抗性生防因子。为了阐明菌株ND35抗生素在植物病害生物防治中的作用机制,系统研究了抗生素的产生、提取纯化及其在离体和温室条件下的抑菌防病作用。菌株ND35的发酵液经乙酸乙酯萃取,浓缩得黄褐色抗生素粗提液。平皿抑菌试验表明,抗生素粗提液对20余种植物病原真菌有抑制作用,浓度为400μg/mL时对病菌菌丝生长的抑制率范围从14．4%到72．6%。浓度为500μg/mL和1000μg/mL的抗生素粗提液对新月弯孢分生孢子萌发的抑制率分别是54．2%和75．9%。发酵时间也影响抗生素的产量,马铃著葡萄糖液体培养基中发酵15天时,抗生素产量最高。经薄层层析和高效液相色谱检测,证明有两个活性组分。温室试验表明,该抗生素粗提液稀释50倍液对玉米弯孢叶斑病的防治效果可达85．5%,稀释250倍液防治效果达63。3%。试验结果表明,抗生素是菌株ND35重要的生防决定因子之一,抗生素粗提液也展示了对玉米弯孢叶斑病具有较好的生防潜能。     

三种拮抗菌对苗木立枯病病原菌的影响

采用PDA综合培养基对3种拮抗菌和2种苗木立枯病病原菌进行对峙培养,研究3种拮抗菌对苗木立枯病病原菌的抑制效果.结果表明:绿色木霉(Trichoderma viride)、桔绿木霉(Trichoderm citrinoviridevs)、球毛壳(Chaetomium globosum)3种拮抗菌对2种苗木立枯病病原菌尖镰孢菌(Fusarium oxysporum)、腐皮镰刀菌(Fusarium solani)均有抑制作用,对Fusarium oxysporum的抑制效果最好的为Trichoderma citrinoviridevs,对Fusarium solani抑制效果最好的为Trichoderma viride.     

球毛壳菌几丁质酶3基因的序列分析

根据EST分析的结果，从cDNA文库中挑取几丁质酶3基因的克隆进行了测宁并序列分析。结果表明：cDNA文库中几丁质酶3基因的克隆插入片断大小为1268bp；用Phrap软件拼接出来的几丁质酶3的表达序列标签拼接序列与实际平列不完全吻合：因此，在EST分析中不用Phrap软件为好。     

以潮霉素抗性为选择标记的毛壳霉原生质体转化

利用PEG方法，将含有潮霉素抗性标记的质粒pCB1003转化毛壳霉原生质体,并在高于毛壳霉敏感的潮霉素浓度下筛选转化子。转化率达1～2个转化子/μg质粒DNA。以潮霉素抗性的毛壳霉转化子的基因组DNA为模板进行PCR扩增及其产物的Southern杂交。结果表明，潮霉素抗性基因已整合入毛壳霉染色体。稳定性试验表明，所获得的转化子可通过有丝分裂稳定传代。     

Construction and Identification of Plasmid pTA—TUB2

1　Introduction　　Benzamidazole fungicide plays an important role in plant disease control.However,as systemic fungi-cide,due to a long time application,it is facing a serious challenge from resistance problem.For instance,the resistance of Cercosporabeticola〔1〕　　　　 ,Penicillium digitatium Sacc.〔2〕Pyricularia oryzaecav〔3〕 to benzami-dazole fungicides was1 0 0 0 ︼g· m L-1.The resistance of wheat scab( Fusarium graminis)〔4〕,Botrytiscinerea〔5〕 and Sclerotinia sclerotiorum〔6…     

毛壳菌纤维素酶活及发酵产物蛋白质含量测定

[目的]为了明确毛壳菌中纤维素酶活力和蛋白质含量。[方法]从采自"三北"防护林永寿试验区富含有机质的18份凋落物土样和土壤根区土样中,分离出25株毛壳菌,测定其纤维素酶活力和蛋白质含量。[结果]25株毛壳菌纤维素酶活较低,羧甲基纤维素酶(CMCA)活力和滤纸酶活力(FPA)分别为2.17~32.1 IU/g和0.097~1.19 IU/g,平均酶活为15.78 IU/g和0.602 IU/g,且不同毛壳菌的纤维素酶活差异很大。毛壳菌在CMC-Na平板上菌丝不发达,仅有子囊结构,但是在小麦秸秆粉发酵培养基中一些菌种生长良好,菌丝发达,子囊结构很少或没有。在纤维素酶产酶培养基上接入将毛壳菌发酵,发酵产物纯蛋白绝对含量比原料提高1~32 g/kg,增幅为1.3%~41.0%。[结论]毛壳菌纤维素酶活力较低,不宜作为纤维素酶生产菌种,但可作为秸秆饲料发酵用菌。     

内生真菌球毛壳ND35对板栗苗生长发育的影响

将球毛壳ND35定殖于板栗实生苗植株内部,研究ND35对板栗苗苗高、根系及开花量等的影响。结果表明,ND35对板栗苗高生长的影响不显著,但对其侧根和毛细根的生长及开花时间具有显著影响;ND35在板栗苗植株组织内的定殖活性与温度有关。     

用螺旋毛壳(Chaetomium spirale) ND35菌防治果树腐烂病的试验研究

报道了在离体和田间条件下螺旋毛壳(C. spirale) ND35菌株对苹果树腐烂病的初步抑菌试验结果.PDA平板对峙培养的结果显示在毛壳ND35和苹果树腐烂病菌的两菌落间出现明显的抑菌带;毛壳ND35培养液粗提液比麦芽浸膏培养液的粗提液有更强的抑制病菌菌丝生长的作用.温室和田间生防试验表明用接种毛壳ND35的处理,其苹果树腐烂病发病率明显低于其它处理,包括直接种苹果树腐烂病菌和烫伤处理,及健康对照.再分离试验表明毛壳ND35可成功地在苹果树枝干部位定殖,而且固体麦麸菌剂的定殖率高于玉米粉液体菌剂的定殖率.但是玉米粉液体菌剂在田间的生防效率较好.     

球毛壳菌(Chaetomium globosum)小热休克蛋白HSP22.4基因克隆及表达

小热休克蛋白(sHsps_)是生物体中参与防御反应的内源细胞保护因子。为了研究球毛壳菌中(Chaetomiumglobosum)中的小热休克蛋白(AY491980)。对球毛壳菌的小热休克蛋白进行了克隆和在大肠杆菌中进行了表达。BlastX分析表明球色壳菌的小热休克蛋白与粗糙脉孢菌(Neurosporacrassa)小热休克蛋白在氨基酸上的序列同源性最高,为65%。将HSP22.4基因编码区插入原核表达载体pGEX-4T-2、构建成表达质粒pGEX-HSP。利用pGEX-HSP质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导后SDS-PAGE检测表达情况,结果发现在50kD处有一特异性融合蛋白带,与预期相符,说明HSP22.4基因已经在大肠杆菌中表达。本研究为进一步研究小热休克蛋白的功能奠定了基础。图6参15。