牛病毒性腹泻病毒新疆分离株E2基因的克隆及序列分析

应用RT-PCR方法从牛病毒性腹泻病毒（BVDV）新疆石河子分离株、玛纳斯不同年份两个分离株扩增获得的3株BVDV的E2基因序列,分别命名Shihezi148、Manasi和MNS2（GenBank登录号：EU159699、EU159703和EU169937）。序列分析结果表明3株E2基因长度分别为1121bp、1122bp和1122bp,分别编码373、374和374个氨基酸残基。核酸序列同源性和系统发生分析表明,3株病毒均属于BVDV基因1型（BVDV-1）,Shihezi 148株与澳大利亚Bega株亲缘关系最近,同处于BVDV-1c基因亚型群,其E2氨基酸同源性为90.11%。Manasi株和MNS2株E2基因核酸序列仅有4个碱基的差别,它们与Changchun 184和匈牙利VEDEVAC株亲缘关系最近,位于BVDV-1b基因亚型群。Manasi和MNS2株与Changchun 184株E2氨基酸同源性分别高达98.66%和98.93%。     

H9亚型禽流感的流行特点及其疫苗市场分析

在禽类的一些重要传染病中,如新城疫、禽流感、传染性支气管炎、传染性法氏囊等,禽流感仍是危害养禽业发展的头号传染病。禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽类感染和／或疾病综合征。自1878年在意大利的鸡群首次发现该病毒以来,世界各地均有禽流感的暴发和流行,造成了巨大的经济损失。     

西藏林芝地区H9亚型禽流感病毒的分离与初步鉴定

禽流感(Avian influenza,AI),又名真性鸡瘟或欧洲鸡瘟,是由A型流感病毒引起的一种禽类急性高度致死性传染病,以急性败血性死亡到无症状带毒等多种病征为特点,鸡、火鸡、鸭、鹅和鹌鹑等家禽及野鸟、水禽、海鸟等均可感染[1]。1878年Porroncito首先在意大利报道该病,1955年Schafer[2]首次证明禽流感病原是A型流感病毒,我国自1994年陈伯伦报道从鸡中分离到H9亚型禽流感病毒(AIV)后,以H9亚型为主的中低致病力禽流感广泛流行,但是有关H9亚型禽流感在西藏地区流行情况的报道较少     

禽流感的新认识与防控

禽流感又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟,是由A型流感病毒引起的禽类的一种从呼吸道到严重性败血症等多种症状的综合征。本病不但引起鸡呼吸道症状,并可使鸡群产蛋量急剧下降,高致病性毒株还可以导致禽类急性大规模死亡,对养鸡业和公共卫生具有很大危害性。1病原1.1病毒属正黏病毒科,分A、B、C型流感病毒。A型发生于禽、猪、马、人等。AIV粒子表面的血凝素(HA)有16种,神经氨酸酶(NA)有9种,目前的研究证实,H9亚型禽流感病毒主要引起产     

禽流感病毒H7亚型血凝素基因的原核表达及鉴定

参考已发表的禽流感病毒(AIV)H7亚型血凝素(HA)基因序列设计引物，经RT-PCR扩增了AIV-H7亚型的HA1基因片段，再将该片段定向插入到原核表达载体pGEX-4T-2中，转化大肠埃希氏菌。重组表达栽体经酶切和测序鉴定后，用IPTG诱导表达。用Western-blotting和ELISA试验鉴定表达产物的抗原性。结果表明，融合表达蛋白能与AIV H7N1、H7N2、H7N7和H1N1亚型标准抗血清反应，而与H5N1、H9N2等其他13个亚型的抗血清无交叉反应。     

重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(Re-4+Re-6)试验报告

高致病性禽流感是人畜共患病,在特定环境下,可感染人,当人感染高致病性禽流感后,死亡率较高,并且严重危害公共安全卫生。由于禽流感毒株的不断变异,为了有效地防控禽流感疫情的发生,2012年农业部推出重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(Re-4+Re-6),为了保证新疫苗的安全使用,昌平区动物疫病预防控制中心在新疫苗大批使用前先做小范围试验。     

Dot-ELISA检测H9亚型禽流感病毒的研究

本研究采用兔抗H9亚型禽流感病毒（AIV）IgG包被于硝酸纤维素膜,酶标羊抗兔IgG作二抗,建立检测H9亚型AIV的Dot-ELISA法。经方阵试验确定兔抗AIV IgG工作浓度为1∶400,酶标羊抗兔IgG的工作浓度为1∶400。作者建立的Dot-ELISA对AIV的最小检测量为3.35×10-9g。Dot-ELISA与HA和HI、AGP及病毒分离法相比,检测63份临床疑似H9亚型AIV病料,Dot-ELISA检出32份(57.14%),HA和HI检出15份(23.81%),AGP检出11份(17.46%),病毒分离检出38份(60.30%)。用抗H9亚型AIV阳性血清可以阻断Dot-ELISA阳性反应,诊断膜片与鸡新城疫病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡传染性支气管炎病毒、产蛋下降综合征病毒不出现阳性反应,证明Dot-ELISA特异性好。分别置室温(25 ℃左右)、4 ℃和-20 ℃下保存1个月后,膜片诊断效果不变,对照反应均成立,该方法重复性好（重复符合率为93.9%）,操作简便（3 h内可完成）,不需要特殊检测仪器,结果客观,肉眼易于判断,是微生物和传染病及寄生虫病诊断标准化的新技术之一。     

从病毒-宿主生态学角度探讨高致病性禽流感防控新策略

1现实的困境和原因自2003年H5N1亚型高致病性禽流感在东亚和东南亚大面积暴发以来,疫情持续蔓延不断,造成无数只家禽感染发病,各受害国共扑杀了数亿只家禽。有些国家(包括我国)还投入巨额资金,进行大规模疫苗接     

1株H5N1亚型高致病力禽流感病毒人工感染鸭的抗原定位观察

通过对鸭静脉接种或眼-鼻-口腔-泄殖腔接种禽流感病毒A/duck/Guangdong/220/2004(H5N1)后,采用免疫组织化学方法检查病毒核蛋白抗原,探讨了该病毒在组织器官中的定位与分布.结果表明,病毒核蛋白抗原主要存在于鸭的心肌细胞、肝细胞、枯否氏细胞、胰腺泡上皮细胞、肾小管上皮细胞、血管内皮细胞和血液吞噬性自细胞;在气管和支气管黏膜上皮,脑组织,肠黏膜上皮,胸腺、法氏囊、脾脏和肺脏的巨噬细胞或组织细胞以及坏死的细胞碎片中也可检查到少量病毒核蛋白抗原;而在食管、胃、睾丸、卵巢、甲状腺、肾上腺、哈德氏腺、骨骼肌等未检查到该抗原.     

禽流感病毒H9N2亚型三重PCR检测方法的建立

为建立简便快速检测禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)并同时区分出H9、N2亚型的方法,本试验根据基因库中H9亚型AIV的HA基因、N2亚型AIV的NA基因及AIV的M基因序列,分别设计了3对针对这3种基因保守序列的引物,建立了AIV H9N2亚型的三重PCR检测方法。应用该方法对H9N2亚型AIV模板进行PCR扩增,可得到3条与试验设计相符的目的条带,分别为313 bp (HA基因)、451 bp (NA基因)和667 bp(M基因);对非H9亚型的N2亚型AIV模板进行扩增,出现2条特异性扩增条带,即451 bp (NA基因)和667 bp(M基因);对非H9、N2亚型AIV模板进行扩增则只出现一条目的条带,即667 bp(M基因);对其他禽呼吸道病原体进行PCR扩增,结果均为阴性。敏感性试验结果显示此三重PCR方法最低检出限为10^-2 ng/μL。应用所建立的三重PCR方法对120份临床病料进行检测的结果与病毒分离鉴定结果一致。各项试验结果均表明,该方法对于禽流感病毒尤其是H9、N2亚型禽流感病毒的检测具有快捷、特异、灵敏的特点。