落叶松自然条件下感染松材线虫初报

对2018年辽宁抚顺市出现枯死现象的长白落叶松Larix olgensis、日本落叶松L.kaempferi和华北落叶松L.principis-rupprechtii取样调查,通过显微镜形态学鉴定和实时荧光定量PCR方法确定3种落叶松体内均含松材线虫Bursaphelenchus xylophilus。由此确定松材线虫在我国自然条件下侵染落叶松。这是我国关于落叶松自然感染松材线虫的首次报道。     

西日本松材线虫病生态地理分布图式的研究

本文对西日本98个地域,21个生态因子,采用灰色聚类和模糊聚类的分析方法,研究了松材线虫病(Bursaphelenchus xylophilus)在西日本的生态地理分布图式。其结果将西日本识别为最适宜、适宜、比较适宜、一般适宜、不适宜、最不适宜6类分布环境类型,并给出了分布图。     

松材线虫病被害木伐桩灭虫试验研究

通过林间调查、根桩解剖、线虫分离等试验,结果表明,在伐桩、木质部内存在数量较少的松褐天牛越冬幼虫;该幼虫次年羽化成成虫,具有传播松材线虫病能力。通过对不同高度伐桩中天牛活体数量调查和农药处理伐桩试验,认为在伐桩高度低于５ｃｍ时,用２０％倍硫磷油剂＋０号柴油２０倍稀释液浇淋伐桩,具有既简单又彻底的杀灭伐桩内天牛和控制松材线虫病的良好效果。     

松材线虫RAPD规范化反应体系的构建

 针对随机扩增DNA多态性(RAPD)低重复性的特点,在研究松材线虫遗传多样性的过程中,对可能影响RAPD扩增结果的PCR仪型号,模板DNA,Mg²⁺,TaqDNA聚合酶引物及dNTP浓度等因素进行了实验探索,以获得最佳反应条件,构建稳定的松材线虫RAPD扩增反应体系,结果发现上述影响因子在相当大的范围内对RAPD扩增结果的影响有限,进而对在不同实验室间的RAPD结果缺乏重复性和可比性的原因进行了讨论,认为模板DNA的污染是造成这一现象的重要原因,并在此基础上提出了相应的规范化操作建议.     

Antinematodal activity of some Malaysian plant extracts against the pine wood nematode,Bursaphelenchus xylophilus

Methanolic extracts of 79 Malaysian plants representing 42 families were assessed for antinematodal activity against Bursaphelenchus xylophilus using a fungal-feeding assay. Extracts of 27 plants from 19 families showed antinematodal activity, while 52 species were inactive. Five extracts (Sauropus androgynus, Eugenia polyantha, Areca catechu, Piper betle and Piper nigrum) exhibited very strong activity against Bursaphelenchus xylophilus at a minimum effective dose (MED) of 0·625 mg per ball. Strong antinematodal activity (MED: 1·25–2·5 mg per ball) was shown by the extracts of Spondias cyntherea, Codiageum variegatum, Euodia glabra and Cicca acida. Eleven extracts (Carica papaya, Ipomoea aquatica, Ocimum basilicum, Leea gigantea, Pithecellobium jiringa, Crypteronia paniculata, Myristica fragrans, Murraya koenigii, Leucaena leucocephala, Melastoma malabathricum and Morinda citrifolia) demonstrated moderate activity between MED of 5 and 10 mg per ball, and weak activity was observed in seven extracts (Ipomoea batatas, Cymbopogon citratus, Garcinia atroviridis, Psophocarpus tetragonolobus, Tamarindus indica, Allium odorum and Stenochalaena palustris). © 1997 SCI     

松材线虫Bx-Daf-22基因鉴定及表达

[目的]为探究松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)抗逆态幼虫DL3(Dauer larvae3)形成的分子机理,对其鸟苷酸环化酶路径(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)中的抗逆态基因daf-22进行了鉴定和表达研究。[方法]根据松材线虫基因组数据设计引物克隆松材线虫Bx-Daf-22基因。进一步对Bx-Daf-22基因编码的蛋白进行系统发育分析、保守结构域分析等生物信息学分析。应用BLAST比对技术在松材线虫基因组数据中鉴定得到固醇载体蛋白SCP2同源基因,命名为Bx-Daf-22。应用PCR技术扩增Bx-Daf-22完整蛋白编码区,分析同源序列系统进化和三维结构。[结果]结果表明,Daf-22作为路径的起点是cGMP路径中一个受体蛋白,可将起始信号传递到cGMP路径的膜结合受体上,再通过胰岛素相似信号途径(insulin like signaling,Insulin/IGF)中的β-胰岛素(β-insulin,Daf-28)以及转化生长因子β路径(transforming growth factor β,TGFβ-like)中的热激蛋白90(HSP90/Daf-21)连接从而调控线虫进入抗逆态。[结论]通过结构比对及基因表达量分析表明Bx-Daf-22与秀丽线虫Daf-22具有相近的功能。Bx-Daf-22编码的蛋白质具有固醇载体蛋白SCP2构域。因此松材线虫的cGMP路径与DL3形成具有直接相关。     

氧硫化碳及其混剂熏杀松材线虫效果研究

氧硫化碳(COS)作为一种潜在的溴甲烷替代熏蒸剂,日益引起广泛关注。本文以松材线虫为研究对象,首先探讨了氧硫化碳熏蒸松材线虫时,温度和时间因子对其杀灭效果的影响。其次,配制了氧硫化碳和硫酰氟(SO_2F_2)的混剂,分析了不同体积比的混剂对松材线虫的熏杀效果。结果表明,温度和时间是影响氧硫化碳熏杀松材线虫效果的关键因素,熏杀效果随温度和时间的增加而提高;在25℃的条件下,氧硫化碳投药剂量为156.33 g/m~3,熏蒸时间为48 h,确保熏蒸散气前的CT值为3773.79 g·h/m~3时,松材线虫全部死亡;添加10%、30%和50%体积比的硫酰氟对氧硫化碳的熏杀效果增效明显,其中添加50%体积比的硫酰氟后,只需加入89.67 g/m~3的氧硫化碳和70.45 g/m~3的硫酰氟的混剂,即可使松材线虫全部死亡。     

杀松材线虫海洋细菌HT-11的鉴定及培养条件研究

[目的]从海洋中分离并筛选具有杀松材线虫活性的细菌。[方法]采用稀释涂布平板法对采自青岛近海海域的样品进行细菌分离,采用浸渍法测定菌株的杀线虫活性,并对筛选菌株的形态学、生理生化特性和16S r DNA序列进行测定,通过单因素试验筛选产生杀线虫活性物质的最适培养条件。[结果]共分离到36株海洋细菌,根据杀线虫活性筛选出1株具有高杀线虫活性的细菌HT-11。该菌株分离自牡蛎,其培养滤液处理松材线虫24 h的校正死亡率高达92.41%。根据形态学、生理生化特性和16S r DNA序列测定及其系统发育分析结果,将菌株HT-11鉴定为考克氏菌属(Kocuria)。单因素试验结果表明,该菌株在营养肉汤(NB)培养基中产生杀线虫活性物质的最适培养条件为:海水浓度100%,初始p H 7.0,培养温度25℃,培养时间3 d。[结论]该研究可为海洋微生物资源的开发及其杀松材线虫天然活性物质的利用提供理论依据。     

牡丹皮、黄连、大黄提取物对松材线虫生理代谢的影响

对3种中草药黄连、牡丹皮、大黄的乙醇提取物毒杀松材线虫作用机制进行了初步研究。测定了其对线虫体内总糖和蛋白含量的影响, 处理前后线虫体内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和乙酰胆碱酯酶（AChE）酶活性变化和丙二醛（MDA）含量变化, 处理前后SOD、CAT、GSH-Px和AChE表达量变化; 并用松枝水培试验测定3种提取物对松材线虫病害的防控效果。结果表明, 提取物处理后线虫体内总糖及蛋白含量显著下降, 线虫体内糖及蛋白质的代谢受到干扰; 线虫体内SOD、CAT、GSH-Px酶活性提高, POD活性显著下降, MDA含量升高, 表明线虫体内氧化与抗氧化作用失衡, 细胞功能受到极大影响; AChE活性被抑制, 表明线虫的神经系统受到破坏, SOD、CAT、GSH-Px和POD表达量与酶活性变化基本一致。松枝水培试验表明中药提取物能够有效控制松材线虫病害发生。综上, 3种提取物引起的松材线虫体内众多生理指标的改变是造成线虫死亡的主要原因。     

3个株系松材线虫电镜扫描比较研究

松材线虫病是一种毁灭性的森林病害,不同地区的松材线虫在形态特征方面有一定的差异.采用扫描电子显微镜对来自湖南、广东两地3个株系松材线虫进行了形态观察比较.结果表明:这3个株系的松材线虫成虫的头部、尾部形态特征无明显差异,幼虫和成虫的唇区与体部都出现缢缩;松材线虫口针的开口端呈一斜面;雄性成虫尾部交合伞呈“M”型.这些特征都是在过去的研究中没有描述过的,可为松材线虫的形态研究提供参考依据.