平贝母新：炮制品开发研究报告I—总生物碱提取工艺的优化及新炮制品分析

目的优化平贝母总生物碱提取工艺,分析不同新炮制品的总生物碱变化情况,为其开发利用提供理论依据。方法参考前人的研究成果。采用正交实验法优化平贝母总生物碱提取工艺：采用传统中药的炮制方法（醋炙、酒炙、姜炙、蜜炙）加工平贝母新产品。结果75％乙醇提取2次。每次提取时间2h,总生物碱得率最高;与传统加工品中的总生物碱含量（0．191％）相比,醋炙、酒炙分别为0．242％、0．204％：姜炙、蜜炙分别为0．186％、0．167％。结论平贝母中总生物碱的最佳提取工艺为：75％乙醇提取2次,每次提取时间2h。醋炙、酒炙能有效地提高平贝母的有效成分含量;姜炙、蜜炙则相反。     

蒙古扁桃的组织培养与快速繁殖技术研究

[目的]对蒙古扁桃（Prunus mongolica Maxim.）的组织培养与快速繁殖技术进行研究。[方法]以蒙古扁桃幼嫩茎段为外植体进行组织培养试验。[结果]筛选出适合蒙古扁桃外植体的诱导培养基为MS＋6-BA0.80mg/L＋IAA1.20mg/L＋30g/L蔗糖＋5g/L琼脂粉,pH值为6.0～6.2;愈伤组织诱导培养基为MS＋6-BA1.00mg/L＋NAA0.10mg/L＋30g/L蔗糖＋5g/L琼脂粉,pH值为6.0～6.2;继代芽分化培养基为MS＋6-BA0.80mg/L＋IAA1.50mg/L＋NAA0.05mg/L＋30g/L蔗糖＋5g/L琼脂粉,pH值为6.0～6.2;生根培养基为1/2MS＋IBA0.50mg/L＋根皮苷5.00mg/L＋15g/L蔗糖＋5g/L琼脂粉,pH值为6.0～6.2;以草炭：蛭石：珍珠岩=2：1：1为移栽基质效果最好。[结论]为蒙古扁桃品种改良及工厂化繁育提供参考。     

毛脉山莴苣再生体系建立的研究

以生长非常旺盛的毛脉山莴苣生长点为外植体,以附加不同浓度的6-BA、IAA、IBA、NAA、2,4-D的1/2MS为基本培养基,进行了毛脉山莴苣芽生长、不定芽分化、试管苗生根、试管苗移栽与扦插和试管苗移植的研究。结果表明:芽生长的理想培养基为1/2MS+6-BA0.1mg/L+IAA0.2mg/L;不定芽分化培养的理想培养基MS+BA0.4mg/L+NAA0.1mg/L;试管苗生根培养和生根继代培养的理想培养基是1/2MS+NAA0.1mg/L+IAA0.4mg/L;河沙与炉灰渣是试管苗移栽和扦插的理想基质,移栽和扦插后25d的平均成活率分别为95%和91%;移植于山坡上的试管苗生长非常旺盛,根系发达,增加1倍左右;鲜茎叶收获量增加24%。     

HPLC色谱法测定贵州黔北凹叶厚朴中厚朴酚的含量

[目的]建立用高效液相色谱法测定贵州黔北凹叶厚朴中厚朴酚的含量。[方法]色谱柱为Diamonsil C18,以甲醇-水（78∶22）为流动相;流速为1.0ml/min;柱温25℃;检测波长为294nm。[结果]厚朴酚线性范围为0.6272～1.1648ug,r=0.9994;平均回收率为98.56%,RSD=0.33%。[结论]该法简便、灵敏、准确。     

高效液相色谱法测定厚朴中7种代谢产物含量

[目的]采用高效液相色谱（HPLC）法同时测定厚朴（Magnolia officinalis Rend.et Wils.）中7种代谢产物含量。[方法]色谱条件：Shim-pack CLC-ODS色谱柱（150mm×6mm,5μm）;检测波长：320和294nm;流动相：A相为乙腈,B相为0.1%甲酸,采用梯度洗脱。[结果]峰面积（y）对绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素、厚朴酚和和厚朴酚对照品溶液浓度（x）的回归方程分别为：y=1E＋05x-306360（r=0.9998）、y=5E＋04x-79920（r=0.9994）、y=5E＋04x-55280（r=0.9999）、y=5E＋04x-60530（r=0.9999）、y=2.5E＋04x-57010（r=0.9998）、y=2E＋04x＋7102（r=0.9999）和y=2E＋04x＋11028（r=0.9999）,各对照品溶液在3.125～100.00μg/ml内与峰面积有良好的线性关系。绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素、厚朴酚和和厚朴酚对照品的加样回收率分别为103.98%、101.65%、99.17%、103.59%、103.59%、102.44%、104.62%,RSD分别为3.37%、2.86%、3.02%、2.89%、2.86%、1.18%、3.67%。厚朴中各部位7种化合物含量存在一定的差异,在叶中,7种代谢产物均有积累,其中和厚朴酚、厚朴酚和槲皮苷的含量较高,金丝桃苷和槲皮素的含量较低。[结论]该研究建立的HPLC法简捷、方便,稳定性和重复性好,可为进一步开发利用厚朴提供依据,并为同时测定黄酮类化合物及酚类化合物提供新的方法。     

Antimutagenic and anticarcinogenic effect of methanol extracts of Petasites japonicus Maxim leaves

The methanol extract from the leaves of Petasites japonicus Maxim (PJ) was studied for its (anti-)mutagenic effect with the SOS chromotest and reverse mutation assay. The (anti-)carcinogenic effects were evaluated by the cytotoxicity on human cancer line cells and by the function and the expression of gap junctions in rat liver epithelial cell. PJ extracts significantly decreased spontaneous β-galactosidase activity and β-galactosidase activity induced by a mutagen, ICR, in Salmonella (S.) typhimurium TA 1535/pSK 1002. All doses of the extract (0.08-100 mg/plate) decreased the reversion frequency induced by benzo (α)pyrene (BaP) in S. typhimurium TA 98. It decreased not only the spontaneous reversion frequency but also that induced by BaP in S. typhimurium TA 100. PJ extract showed greater cytotoxic effects on human stomach, colon and uterus cancer cells than on other cancer cell types and normal rat liver epithelial cells. Dye transfers though gap junctions were significantly increased by PJ extracts at concentrations greater than 200 µg/mL and the inhibition of dye transfer by 12-O-tetradecanoylphorobol-13-acetate (TPA) was obstructed in all concentrations of PJ. PJ significantly increased the numbers of gap junction protein connexin 43, and increased the protein expression decreased by TPA in a dose-dependent manner. Based on these findings, PJ is suggested to contain antimutagenic and anticarcionogenic compounds.     

农杆菌介导的芦笋遗传转化体系的建立

以芦笋"井岗701"胚状体为试验材料,在构建p CAMBIA3300-35S-hevein-NOS植物表达载体基础上,采用农杆菌介导的转基因方法,探究菌液浓度、AS浓度、侵染时间和共培养时间等4个因素对芦笋转基因效率的影响,以期建立高效的芦笋转基因体系。结果表明:用菌液浓度OD_(600)=0.6,AS终浓度为200μmol/L的农杆菌菌液进行侵染,侵染10 min后,暗培养4 d的转基因效率最佳,经PCR检测,阳性转化率达21%,获得了转基因幼苗。本实验构建了完整的农杆菌介导的芦笋遗传转化体系。     

正交试验对密蒙花总黄酮分离纯化工艺的优化

优选密蒙花(Buddleja officinalis Maxim)总黄酮的分离纯化工艺条件。以总黄酮含量为指标,通过静态和动态试验确定较佳树脂,并通过单因素试验和正交试验优化密蒙花中总黄酮的分离纯化工艺。结果表明,采用AB-8型吸附树脂纯化效果较佳,其优化的密蒙花总黄酮分离纯化工艺为上样浓度2.24mg/m L,用3 BV 50%乙醇洗脱,洗脱流速为1.5 m L/min;处理后所得干膏中总黄酮的纯度为71.31%。其优选的工艺条件简单可行,可为工业化纯化密蒙花总黄酮提供参考。     

基于辊压浸注法的杉松冷杉的防变色性能

对杉松冷杉试材进行2种药剂(质量分数为0.5%和1.0%)、2种压缩率(5%和10%)、2种压缩方向(径向和弦向)、2种压缩次数(1和4次)的防腐剂辊压浸注和常温常压浸泡处理,测试和研究不同浸注方法对试材载药量、防治效力和真菌感染形态的影响。结果表明:辊压浸注法的载药量高于浸泡法,提高了133.33%~224.24%;前者防治效力比后者提高了25%以上,当辊压浸注工艺为压缩率10%、药剂质量分数1.0%、弦向压缩、压缩4次时,试材的防治效力达到最大值81.97%;可可球二孢真菌在空白样、浸泡法和辊压浸注法试材中的发展顺序呈现由旺盛到纤弱、由充满细胞腔到局部存在的态势,与试材表面和内部的宏观特征表现一致。     

不同氮磷钾施肥水平对厚朴生长的影响

[目的]研究不同氮、磷、钾配比施肥对厚朴植物生长的影响。[方法]以优质厚朴植物为试材,通过田间试验和室内分析,采用氮、磷、钾不同配比施肥试验,对厚朴树高、胸径、氮磷钾含量等指标进行测定,分析施肥与厚朴植物的产量和品质的关系。[结果]氮磷钾肥不同施肥水平能增加树高11.3%~56.5%、增大胸径10.2%~48.4%,提高厚朴氮含量2.6%~22.2%、磷含量1.5%~10.4%、钾含量12.2%~40.0%。且各指标与氮磷钾间存在显著相关性。[结论]适宜的氮磷钾配比有利于厚朴植物的生长,对生长影响较大的N∶P∶K的施入量的比例为1.00∶0.44∶2.67。