水牛α-清蛋白基因3’端调控区的PCR克隆及序列分析

对水牛α-乳清蛋白基因的3’端调控区进行了PCR扩增及重组质粒的酶切鉴定,比较了水牛和牦牛该基因的核苷酸序列同源性。序列分析结果表明：水牛α-乳清蛋白基因3’端序列与牦牛该基因在641bp的序列中存在34bp的差异,同源性为94．69％。     

家兔日粮粗纤维的营养功能与调控

目前,我国兔肉年产量已达到54万吨,约占世界总产量的45％,兔毛年产量600多万吨,可以说我国是个名副其实的养兔大国。在这种情况下,部分养殖户在饲养中常像饲喂鸡、猪一样,以高能量、高蛋白日粮为主,以求提高日增重和兔毛产量,从而忽略了粗纤维的重要性,导致兔群发病率升高,如肠道功能紊乱、肠炎、腹泻、异食癖等。     

牛分枝杆菌外膜蛋白基因ompA的原核表达及免疫活性分析

为验证牛分枝杆菌外膜蛋白A是否具有免疫活性,以牛分枝杆菌Vallee Ⅲ株基因组DNA为模板扩增牛分枝杆菌外膜蛋白基因ompA,采用DNA重组技术将此基因片段连于表达载体pGEX6p-1,构建重组质粒pGEX6p-1-ompA,并将其转化到大肠杆菌中BL21(DE3)中,IPTG诱导(终浓度为0.1mmol/L),表达产物进行SDS-PAGE分析.用glutathione sepharose 4B纯化蛋白和Western blot分析该蛋白的免疫学活性.结果表明:pGEX6p-1-ompA以可溶形式表达,蛋白分子量大小为60 kDa,与预计大小相符,纯化的蛋白具有良好的免疫学活性.     

三种药剂对马铃薯发芽出苗的影响

为解决马铃薯种植过程中常用赤霉素催芽浓度争议较大易造成植株徒长、种薯腐烂等问题,以克新23为材料开展盆栽药效试验,评价硼酸钠、碧护、超敏蛋白对马铃薯发芽至苗期的影响,探索替代赤霉素的可行性。结果表明,硼酸钠会抑制马铃薯出苗及苗期生长,但会增加主茎数及鲜重,适宜浓度为0.7 mg·L^-1;超敏蛋白对马铃薯出苗及生长等方面的促进作用相对较小,能够增加植株鲜重,并对萌发期至苗期病害具有一定防治潜力,适宜浓度为670 mg·L^-1;碧护具有相对较好的促进地上部生长、增加主茎数量及壮株效果,适宜浓度为145 mg·L^-1。实际生产中可使用145 mg·L^-1碧护制剂喷淋薯块至表面湿润后晾干播种,这种改良的催芽方法可提高马铃薯主茎数量,并增加苗期茎粗、植株生长速度、地上部鲜重和地下部鲜重,具有替代赤霉素的潜在价值。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP3/GP5/M真核表达载体的构建及其体液免疫应答

本试验旨在构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3、GP5和M蛋白的真核重组质粒。以PRRSV LN株为模板,采用PCR方法扩增出GP3、GP5、M基因片段,将扩增的GP5、M通过Linker序列串联成GP5-M,然后将GP3与GP5-M双酶切后插入pcDNA3.1(+)构建重组质粒pcDNA3.1-GP3-GP5-M,将其转染COS7细胞。PCR鉴定表明重组质粒pcDNA3.1-GP3-GP5-M含有PRRSV GP3、GP5-M基因,间接免疫荧光检测表明GP3、GP5-M蛋白在COS7细胞内获得表达。Western blotting检测证实GP3、GP5、M蛋白获得正确表达,并且所表达的GP3、GP5、M蛋白是融合蛋白。将pcDNA3.1-GP3-GP5-M免疫BALB/c小鼠,首免后2周可检测到特异性PRRSV中和抗体,首免后8周中和抗体效价最高可达1∶32。进一步将pcDNA3.1-GP3-GP5-M免疫断奶仔猪,首免后4周即可产生1∶4～1∶8的中和抗体。本试验成功构建了表达PRRSV GP3、GP5和M融合蛋白的真核重组质粒pcDNA3.1-GP3-GP5-M,中和抗体检测表明pcDNA3.1-GP3-GP5-M具有良好的免疫原性,从而为PRRSV基因工程疫苗的研制奠定基础。     

三河马血液遗传标记的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对25匹三河马血清中白蛋白（ALB）、酯酶（Es)、α1-B糖蛋白（A1B）和维生素D结合蛋白（GC）进行了检测，结果发现：在4个位点中，白蛋白（ALB）和酯酶（Es)位点呈现多态性，其中在白蛋白（ALB）位点发现3个基因型，即AA、AB和BB，由等位基因ALB^A和ALB^B控制，其基因频率分别为0．40和0．60；在酯酶（Es)位点发现4个基因型，即FF、II、FI和IS，由等位基因Es^f,Es^I和Es^S控制，其基因频率分别为0．40，0．56和0．04，而α1-B糖蛋白（A1B）、维生素D结合蛋白（GC）2个位点均呈现单态性。     

几种复合蛋白源对黄鳝生长、肌肉氨基酸组成及血清部分生化指标的影响

以初始体重(19.70±0.18)g的黄鳝(Monopterusalbus)为研究对象,基础饲料为对照组(含55%鱼粉),以复合蛋白Ⅰ、复合蛋白Ⅱ和复合蛋白Ⅲ替代基础饲料中48%的鱼粉(CPⅠ_(48)、CPⅡ_(48)和CPⅢ_(48)),并与膨化豆粕替代基础饲料中24%、48%的鱼粉(SM24和SM_(48))的替代组做对比,配制6组等氮、等脂的试验饲料,比较三种复合蛋白源及膨化豆粕对黄鳝生长、肌肉氨基酸组成及血清部分生化指标的影响。每组设3个重复,每个网箱放养黄鳝100尾,养殖试验持续70 d。试验结果表明:复合蛋白组CPⅠ_(48)、CPⅡ_(48)和CPⅢ_(48)的黄鳝增重率显著高于膨化豆粕替代组SM_(48)(P0.05),与膨化豆粕替代组SM24差异不显著(P0.05),但均显著低于对照组(P0.05);复合蛋白源增重成本均低于膨化豆粕替代组SM_(48)和SM_(24),CPⅡ_(48)组增重成本最低。CPⅠ_(48)组和CPⅡ_(48)组饲料系数显著低于SM_(48)组,但显著高于对照组(P0.05),与SM_(24)组无显著性差异(P0.05)。CPⅠ_(48)组与CPⅡ_(48)组肌肉总氨基酸和总必需氨基酸含量均显著高于SM_(48)组(P0.05),与SM_(24)组和对照组无显著性差异(P0.05)。复合蛋白组和SM_(48)组血清甘油三酯含量显著低于对照组(P0.05),复合蛋白组血清T-AOC显著高于SM_(48)组(P0.05)。综上所述:本试验中的复合蛋白源具有比单一的蛋白源膨化豆粕可更好地鱼粉替代效果,且复合蛋白CPⅠ_(48)、CPⅡ_(48)组与膨化豆粕替代组SM24的鱼粉替代效果相当,CPⅡ_(48)组增重成本最低。     

植物吸收和转运磷素的分子机理研究进展

磷素是植物必需的大量营养元素,植物对磷素的吸收和植物体内磷素的再度转运是位于细胞原生质膜上的磷转运蛋白介导的需能主动运输过程。概述了植物吸收和转运磷素的生理特征,植物磷转运蛋白(PT)的结构、功能和PT及磷调节子Pho基因的表达调控机制,以及突变体技术在植物磷吸收、转运中的研究进展和应用前景。旨在为今后在分子水平上进一步揭示植物对磷素吸收和转运的生物学机制提供理论依据。     

离子束介导大豆DNA的小麦变异株系蛋白水解酶谱分析

为研究离子束介导大豆DNA的小麦变异株系在返青期、起身期和拔节期的蛋白水解酶变化．采用复性电泳对新乡9号和筛选出的高蛋白变异株系05—10-1和低蛋白变异株系05—6-1,做不同酸碱条件下的蛋白水解酶分析。结果显示．与对照相比。变异株系05-6—1在返青期酸性条件下少检测到一条29kD酶带;在起身期中性和碱性条件下少检测到一条49kD酶带：在拔节期碱性条件下多检测到一条154kD新酶带．而少检测到158kD的酶带：而变异株系05～10—1在这3个生理时期和对照的蛋白水解酶酶谱带型基本一致．主要在某些酶带的酶活上存在差异。     

农杆菌介导法将Bt基因转入大豆的研究

以6个品种大豆体细胞胚为受体,以Bt基因为目的基因,应用根癌农杆茵介导法对大豆进行了遗传转化,经体细胞胚萌发、生根及壮苗培养和卡那霉素选择培养,获得了完整的抗性再生苗,经PCR、PCR-Southern和点杂交分析鉴定,初步证明外源基因Bt已整合到大豆的基因组中。