微生态制剂对产蛋后期蛋鸡生产性能及饲料营养物质消化率的影响

本试验选用864只健康海兰褐蛋鸡,随机分为4个处理,在基础日粮中分别添加0.01%、0.02%芽孢杆菌微生态制剂以及0.02%合生素类复合微生态制剂,研究其对蛋鸡生产性能和饲料营养物质消化率的影响。结果表明:0.01%芽孢杆菌组和0.02%复合组极显著提高蛋鸡的产蛋率、产蛋量和采食量(P<0.01),显著提高日粮表观代谢能、干物质及相关氨基酸(除天冬氨酸和酪氨酸外)的表观消化率(P<0.05);0.02%复合组还显著提高蛋鸡平均蛋重(P<0.05),降低料蛋比(P<0.05),提高日粮蛋白质、钙、磷的表观消化率(P<0.05)。添加适量的芽孢杆菌及合生素类复合微生态制剂可以提高产蛋后期蛋鸡生产性能和饲料营养物质表观消化率,但过量使用可能会产生不利影响。     

饲用纳豆菌生物学功能的研究进展

饲用纳豆菌及其发酵产物具有多种生理功能,如抗菌、调节肠道微生态、促进物质代谢与提高生产性能等。目前,纳豆菌作为微生态制剂在动物养殖中已得到广泛应用,对我国绿色畜牧事业也作出了重大贡献。本文主要就饲用纳豆菌的生物学功能进行阐述,为其更好地服务于动物养殖业提供参考。     

不同菌制剂对育成期梅花鹿采食量及营养物质消化率的影响

为了确定不同菌制剂对育成期梅花鹿采食量及营养物质消化率的影响,选择健康、年龄一致、体重相近雌性育成期梅花鹿36头,随机分成4组,每组9头,精饲料饲喂量相同,分别在秸秆饲料中添加白腐菌、枯草芽孢杆菌、乳酸菌和复合菌(白腐菌、枯草芽孢杆菌、乳酸菌按1∶1∶1复合)各0.25 g/kg秸秆.结果表明:在梅花鹿饲料中添加白腐菌...     

枯草芽孢杆菌CS16诱导香蕉抗病性相关防御酶系的研究

以多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、β-1,3-葡聚糖酶等5种防御酶作为植物抗病性反应指标,研究枯草芽孢杆菌CS16发酵液及其上清液对香蕉体内防御酶活性的影响,探讨其诱导香蕉抗病性机理。结果表明:CS16发酵液和上清液处理香蕉苗后,均能诱导香蕉叶片中PPO、POD、SOD、PAL、β-1,3-葡聚糖酶等5种防御酶活性变化。CS16发酵液处理可诱导香蕉植株防御酶出峰数目多、持续时间长。说明CS16菌株及其胞外代谢物在一定程度上能够诱导香蕉抗病性,推测CS16菌株诱导香蕉抗病性是其生防机制之一。     

农杆菌介导的优良玉米自交系遗传转化体系的建立

以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系340,4112为材料，用带有质粒pGBIL04(actin.Bt.35S.bar)的根癌农杆菌LBA4404转化其幼胚及其初始愈伤组织，经PPT抗性筛选后分化再生植株，PCR分子检测初步证明Bt基因已整合到再生植株基因组中，转化率为1.68%-4.44%。本实验利用转化受体的抗性筛选频率对转化体系进行了优化，结果表明：比较适宜的感染液浓度为OD600=0.5；预培养有利于幼胚转化，预培养时间以刚刚诱导出新鲜稳定的初始愈伤为宜。适当降低共培养温度到22℃可以提高农杆菌介导的玉米遗传转化的筛选频率和PCR阳性率。     

Screening of a high bioflocculant‐producing bacterial strain from an intensive fish pond and comparison of the bioflocculation effects with Rhodococcus erythropolis

A high bioflocculant‐producing bacterial strain BX‐13 isolated from an intensive fish pond by multiple subcultures and measured through primary screening and rescreening using kaolin. The strain BX‐13 was identified to belong to the same branch as Bacillus subtilis by morphological, physiological and biochemical, 16S rDNA gene sequencing, Blast homology search and multiple sequence alignments. The bioflocculation potential of BX‐13 and Rhodococcus erythropolis was compared, using water from the intensive pond where BX‐13 was isolated. The results showed the number of colonies in the BX‐13 treatment was higher than that of the R. erythropolis treatment from day 10 to the end of the experiment (p < 0.05). The numbers of both BX‐13 and R. erythropolis in the water body peaked on day 15, with 2.23 × 10⁷ cfu/L and 9.90 × 10⁶ cfu/L respectively. The bioflocculation volume (BFV) in water increased and then stabilized in both BX‐13 and R. erythropolis treatments. The BFV in BX‐13 peaked on day 25 (52.13 ml/L) and R. erythropolis peaked on day 30 (22.63 ml/L). At the end of the experiment, the BFV of the BX‐13 treatment was higher than the R. erythropolis treatment (p < 0.05). In conclusion, B. subtilis BX‐13 has a very strong flocculation effect, and merits further research into its application for water quality regulation in aquaculture systems.     

枯草芽孢杆菌J530菌株的分离鉴定及其对鸡粪的氨减排作用

筛选出具有产脲酶抑制剂功能的芽孢杆菌菌株并验证其对鸡粪便氨减排的效果。采用以硫酸铵为唯一氮源的培养基,从鸡粪便中富集、分离高效利用氨氮的芽孢杆菌。利用尿素酚红培养基平板与尿素培养基摇瓶培养相结合,筛选不能利用尿素生长的菌株。通过比较各菌株发酵液对大豆脲酶的抑制率,获得对大豆脲酶抑制活性最高的菌株。分析该菌株的16SrRNA基因序列,观察其菌落菌体形态,测定其生理生化特征,以鉴定其种属。将该菌株以1.0×10⁷ CFU/g的接种量接入新鲜鸡粪,30℃静置5 d,评价对鸡粪中芽孢杆菌含量、脲酶活性、氨氮、尿素、尿酸含量、pH、氨气释放量的影响。结果表明,筛选到氨氮利用芽孢杆菌菌株共562个,其中氨氮利用率85%以上的菌株218个;初筛得到不产脲酶菌株23个;复筛得到对大豆脲酶活性抑制较强的菌株(抑制率>50%)6个,其中J530菌株抑制率达99.3%。经鉴定菌株J530为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。该菌株5d内可使鸡粪便中芽孢含量增加50.83倍(P<0.01),使鸡粪中脲酶的活性和氨氮含量分别降低83.86%(P<0.01)和44.41%(P<0.01),尿素含量和尿酸含量分别提高28.80%(P<0.05)和1.51%(P>0.05),pH降低1.15(P<0.05),5 d氨气释放量减少67.88%(P<0.01)。筛选得到了产脲酶抑制剂的枯草芽孢杆菌J530菌株,该菌株可显著降低鸡粪便氨排放。     

橡胶初加工废水污染土壤的微生物固定化修复

橡胶初加工废水产生大量富含高有机质,并具有高粘度、酸性和高有机物等特点。因其处理成本较高且经常存在厌氧处理失效导致后端废水处理不达标、甚至有较多废水直接排出而污染了周边土壤,但目前对于橡胶初加工废水污染土壤的危害及修复关注度不够。前期从天然橡胶加工厂附近的受污染土壤中分离和驯化出了一种以芽孢杆菌为优势菌属的高效降解菌群命名为WR-2。WR-2在橡胶初加工废水降解方面表现出优异的性能,但在应用上WR-2需要一定的准备期及环境适应期。因此,本研究采用包埋法,以海藻酸钠–木薯渣生物质炭、甘蔗渣、椰糠3种载体材料及1.5%、2%两种材料浓度下进行固定化小球制备实验,同时进行橡胶初加工废水中典型的胶清废水污染土壤的固定化小球模拟修复实验,研究WR-2的包埋固定化基础性能及其生物修复能力。经过6组固定化微球在机械性能和对污染土壤的修复效果方面比较发现,2%椰糠改良固定化微球不仅具有较优良的机械性能,在模拟修复实验中对污染土壤的有机质（TOC）降解率高达（96.7%）,土壤二硫化四甲基秋兰姆（TMTD）在14 d全部降解,且使土壤pH从4.42调节至中性,土壤阴阳离子总数降低并具有良好的微生物活性。2%椰糠固定化小球极大地改善了土壤微观结构及土壤通气性和排水性。因此,海藻酸钠2%椰糠作为WR-2的固定化小球制备方式,对优化橡胶初加工废水污染土壤的生物修复能力具有效果优和即时应用的作用。     

一株巨大芽孢杆菌发酵培养基的优化及解磷效果研究

对巨大芽孢杆菌进行发酵培养基优化及解磷效果研究,旨在为巨大芽孢杆菌的深入研究和生产应用奠定理论基础。以巨大芽孢杆菌为试材,用正交实验优化其发酵培养基条件,用钼锑抗比色法测定其解磷效果。确定最佳培养基及条件为：麸皮1%,豆粕粉0.5%,氯化钠1%,MnSO4 0.05%,pH 7.0,温度30℃,接种量8%,转速200 r/min,发酵有效活菌数达到29×108 cfu/mL;50 L发酵罐26 h基本达到终点,有效活菌数达到48×108 cfu/mL,芽孢率≥95%;其分别在卵磷脂和磷酸钙液体培养基中培养5天后,上清液中有效磷含量为1.67 mg/L和83 mg/L,分别是对照组的26倍和17倍;田间试验处理2周后,土壤有效磷含量为165.3 mg/kg。通过本研究,其有效活菌数比原配方提高7倍,能够有效降解有机磷和无机磷,可以明显提高土壤有效磷含量。     

溶解性多糖单加氧酶CBP21的高效分泌表达及与几丁质酶的协同作用研究

为实现溶解性多糖单加氧酶CBP21在枯草芽孢杆菌中的高效分泌表达,并对其与几丁质酶的协同作用进行研究,以大肠-枯草芽孢杆菌穿梭质粒p WB980为基本骨架,溶解性多糖单加氧酶为目的蛋白,构建了信号肽筛选载体,依据信号肽结构特征(正电荷与疏水性的差异)对Sec途径的13个信号肽进行了筛选,结果显示信号肽Ylq B引导分泌溶解性多糖单加氧酶的效率最高,其发酵液上清对胶体几丁质结合活力最高,上清中结合蛋白占总蛋白浓度为32.39%。进一步分别对CBP21和来自糖苷水解酶18家族粘质沙雷菌几丁质酶及来自糖苷水解酶19家族的嗜水气单胞菌几丁质酶Chi92的协同作用进行分析,表明CBP21对几丁质酶和Chi92活力均有促进作用,其中使粘质沙雷菌几丁质酶活力提高1.85倍,使Chi92(嗜水气单胞菌)活力提高2.35倍。上述研究为该溶解性多糖单加氧酶的工业应用奠定了基础。