TILLING and Ecotilling the Plant Kingdom

The modem crop scientist has a large amount of available nucleotide sequence information to identify genes of potential agronomic importance. Using reverse genetic approaches, specific genes can be disrupted, and hypotheses regarding gene function directly tested in vivo. Although a number of reverse genetic methods have been introduced, many are limited in application because they are organism-specific, expensive, transgenic, or only transiently disrupt gene function. However, traditional mutagenesis using chemical mutagens has been widely used as a forward genetics strategy to create many new crop plant varieties at relatively low cost. Mutagens such as ethyl methanesulphonate （EMS） cause stable point mutations and thus produce an allelic series of truncation and missense changes that can provide a range of phenotypes （Greene et al., 2003）. TILLING （targeting induced local lesions IN genomes） is a high-throughput reverse genetic strategy that combines traditional mutagenesis and SNP discovery methods （Colbert et al., 2001; McCallum et al., 2000）. To identify mutations, target regions of-l.5 kb are amplified with fluorescently labeled gene specific primers. Heteroduplexes are then formed between wild-type and mutant strands, mismatches are cleaved by incubation with a single-strand specific nuclease,     

水稻幼苗对多浓度Fe2+胁迫的QTL联合检测

用珍汕97B/密阳46的RIL作图群体,以基本营养液培养为对照(CK),设2种Fe2 (160 mg/L和240 mg/L)作为胁迫处理,以处理20 d的幼苗相对苗高(%)(处理苗高/对照苗高×100%)作为幼苗耐Fe2 胁迫程度的评价指标,进行2个环境的QTL联合检测分析.结果表明,RIL群体株系间对Fe2 胁迫反应差异较大,明显出现超亲分离.共检测到4个耐Fe2 胁迫的主效QTL,即qTFS-1-1、qTFS-3、qTFS-6和qTFS-9,分别位于第1、3、6和9染色体上,可解释14.96%的表型变异,它们与Fe2 胁迫浓度并无显著的G×E互作,表明这4个耐性基因在不同浓度Fe2 胁迫处理下,均可稳定表达.试验还检测到3对耐Fe2 胁迫的加性×加性上位性互作,共可解释7.16%的表型变异,涉及第1、2、7、9、12等5条染色体,该3对上位性互作与Fe2 不同浓度胁迫处理也无显著G×E互作.     

OsI2基因的克隆及其植物表达载体的构建

在旱稻IRAT109干旱胁迫下cDNA芯片分析结果的基础上,通过RT-PCR,5'-RACE及3'-RACE方法,从IRAT109总RNA中扩增得到了干旱胁迫下芯片表达谱中上升表达强度第二的基因全长序列,命名为OsI2,全长有523 bp,并对基因序列结构进行了分析.该基因与全长cDNA文库中的CT836140.1有99%同源.OsI2基因编码产物对应1个包含57个氨基酸的开放阅读框(ORF),为一功能未知蛋白.其编码产物也可能对应两个中间相隔19 bp的较小ORFs(43个氨基酸和42个氨基酸),都是功能未知的蛋白.在pBI121载体的基础上,将OsI2基因与CaMV35S连接成功构建了pBl121-OsI2植物表达载体,为进一步研究其功能创造了条件.     

水稻长穗颈基因eui的研究与利用

eui基因作为"杂交稻种子生产的第四遗传要素",二十多年来,备受国内外遗传育种学者的关注.最近,关于水稻穗颈伸长基因EUI的定位与克隆、功能鉴定及eui基因在水稻育种中的应用取得了较大的进展.本文概述了长穗颈基因eui的发现、定位与克隆、作用机制及其在水稻育种中的应用.     

强化木地板耐磨性能及国产化耐磨纸的研究

对强化木地板的耐磨性能和国产化耐磨纸进行了研究,重点考察耐磨纸的生产方式和热压工艺过程对产品耐磨转数和磨耗量的影响。结果表明Al2O3添加量和添加方式对产品的耐磨性能有很大影响,新研制的B型耐磨纸和进口耐磨纸有相似的磨损曲线,其耐磨转数与Al2O3添加量之间呈线性正相关,耐磨转数的增加主要表现在延长第二磨损区域,即提高初始磨损的IP值。热压工艺过程与产品的耐磨性能之间无明确关系。     

CRISPR/Cas9系统敲除山羊TLR4基因载体构建及检测

TLR4是天然免疫系统中的一种重要模式识别受体,可选择性地识别病原微生物而启动天然免疫,在宿主天然免疫和获得性免疫中具有重要作用.山羊TLR4基因与多种疾病相关,然而,目前在山羊上关于TLR4基因敲除及相关功能的研究尚未见报道.采用CRISPR/cas9系统,首先设计TLR4基因的sgRNA片段,合成sgRNA核苷酸序...     

植物磷匮乏下的根系、代谢和分子响应研究进展

磷是植物正常生长发育所必需的大量元素之一.由于多数土壤条件下可获得的有效磷不足,因此土壤中的磷会影响作物产量潜力的表现.了解植物对低磷胁迫或磷匮乏的响应机制是至关重要的,相关研究已经取得一系列的进展.本文回顾了植物磷匮乏条件下根系统的响应,因为外部土壤中磷的供应状态会影响根构型,评述了植物激素和磷酸酶对磷匮乏的响应,并...     

干旱胁迫对转PtWOX11/12 a基因河北杨生长及生理特性的影响

以转PtWOX11/12a基因河北杨为材料,野生型河北杨为对照,通过测定不同干旱条件下转PtWOX11/12a基因河北杨生理指标,研究干旱胁迫下转PtWOX11/12a基因河北杨生长及生理特性.结果表明:随着干旱程度的加深,转基因植株株高生长量、地径生长量、叶绿素a含量、叶绿素b含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧...     

禽腺病毒血清4型感染鸡组织中NLRP3基因转录水平的实时荧光定量PCR分析

旨在分析禽腺病毒血清4型(FAdV-4)感染鸡组织中NLRP3基因的转录水平,本研究设计鸡NLRP3特异性引物,利用RT-PCR扩增NLRP3基因180 bp片段并克隆至pMD-18T载体,制备重组质粒pMD-18T-NL-RP3.以pMD-18T-NLRP3质粒作为标准品进行荧光定量PCR并建立标准曲线.通过反应条件...