犬IFN-α优化基因的真核表达及抗病毒活性的研究

本研究根据酵母系统密码子的偏嗜性,对成熟蛋白基因核苷酸序列进行密码子偏嗜性改造,利用毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαC来表达犬IFN-α成熟蛋白基因。并采用非洲绿猴肾细胞(Vero) -水疱性口炎病毒(VSV)系统以细胞病变抑制法为基础来测定重组犬α干扰素的效价,同样方法测定了表达产物对PRV和CDV的抑制作用。本试验实现了犬α干扰素在酵母中的高表达,表达量高达58 mg/L,SDS-PAGE检测大小约为24 ku,比预测分子质量大,推测发生了糖基化。表达产物具有较强的种属特异性,在Vero细胞上对PRV具有较高的抗病毒活性,达到了3.6×10⁷ U/L,对CDV也有很好的抑制作用。本研究为犬IFN-α以后的临床应用研究奠定基础。     

褐藻岩藻聚糖生物活性的研究进展

褐色海藻富含对人体有益的功能性多糖——硫酸化多糖。多年来,从褐色海藻中分离出的硫酸多糖在药物、保健品、化妆品和功能性食物等领域中具有广阔的应用前景。岩藻聚糖作为褐藻多糖中的一员,其复杂的生物特性已被证明具有开发和进行工业化生产的价值,从而获得对人体有益的成分。由于海藻多糖具有上述特性,故作者主要对从褐色海藻中分离出的岩藻聚糖(又叫多糖硫酸酯)的抗凝血、抗血栓、免疫调节、抗肿瘤等生物活性方面及其在工业生产中应用等方面进行了综述。     

动物干扰素研究概况

随着我国养殖业的迅猛发展,各种疾病的发生和危害日益加重,特别是病毒性疫病,已成为传染病的主体。对于病毒性疾病的治疗仍然缺乏有效的药物,且大多数尚无效果可靠的疫苗,再加上新发和再发病不断出现,使得病毒病危害尤为突出,急待寻找提高机体免疫、抵抗病毒感染的替代药物。干扰素(IFN)作为一种细胞因子具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节活性,还可以促进机体免疫反应,提高机体抗病毒感染能力,使病毒在机体存活和复制的几率降到最低。目前发现Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型3种类型的IFN,利用3种类型的IFN的抗病毒和调节免疫的功能,研究抑制病毒复制的新型生物制剂,成为人们关注和研究的热点,为病毒性疫病,特别是新发或突发的重大疫病防控提供参考。     

3种检测牛白细胞源抗菌肽抗病毒活性方法的建立

为了建立牛白细胞源抗菌肽抗病毒活性的检测方法,采用半数组织细胞感染量(TCID₅₀)测定、荧光试验、MTT比色3种方法,用Vero ccl-81作为细胞模型,以猪水疱性口炎病毒(VSV)作为模式病毒,对牛白细胞源抗菌肽抗病毒活性进行评价。依据3种方法浓度水平测定的结果和由此结果推算出的抗病毒指标值建立回归模型,并对3种方法的稳定性进行试验。结果表明:抗菌肽浓度在0～62.5μg/mL时对Vero ccl-81细胞安全,在此浓度区间检测方法有效。在3种检测方法中,TCID₅₀法最准确,荧光试验特异直观迅速,MTT比色法准确又直观。TCID₅₀方法回归模型方程为:y=0.285x+1.890(R^2=0.928),荧光试验回归模型方程为:y=2.138x+6.136(R^2=0.903),CPE法回归模型方程为:y=10.229x+3.859(R^2=0.979),3种方法稳定性均较好。说明牛白细胞源抗菌肽基于TCID₅₀法、荧光试验、MTT比色法3种方法联合检测模型可以定量化地准确计算其抗病毒活性。     

Carob pods (Ceratonia siliqua L.) improve growth performance,antioxidant status and caecal characteristics in growing rabbits

The objective of this study was to evaluate carob pods and their effect on growth performance, antioxidant activities, carcass and caecal characteristics and equilibrium modification of the caecal microbiota population of growing NZW rabbits. Eighty weaned rabbits (initial body weight: 625.00 ± 26.46 g) were randomly allocated into four dietary groups of 20 rabbits each until 90 days of age. Dietary groups were as follows: C (basal diet with no supplementation), CP1 (basal diet + 2.5% carob pods), CP2 (basal diet + 5% carob pods) and CP3 (basal diet + 10% carob pods). Rabbits given the CP2 diet had significantly higher daily and final body weights compared with the other experimental groups. The increase in inclusion rate of carob pods significantly decreased feed intake, whereas carob pods at 5% in the CP2 group recorded the best value of feed conversion ratio. Rabbits in the CP3 group showed the worst slaughter weight and carcass dressing percentage weight. No significant effect was found on meat protein and ash contents. Cholesterol, low‐density lipoprotein, high‐density lipoprotein and triglycerides decreased significantly (p < 0.05) in rabbits treated with carob pods compared with the control. Because of high content of the antioxidant compounds in CP2 and CP3 groups, the activities of glutathione peroxidase, glutathione S‐transferase, catalase and superoxide dismutase increased, whereas the concentration of thiobarbituric acid‐reactive substance decreased significantly. Rabbits given the CP2 diet had a significantly higher volatile fatty acid concentration and a lower pH in content of the caecum compared to the other groups. The data of microbial analysis for C group showed a significant increase in Escherichia coli and Clostridium counts. Lactobacillus and Bacillus counts increased significantly more in the CP2 and CP3 groups than in the other groups. In conclusion, 5% of carob pods in the diet stimulated the performance of growing rabbits, and thus, it has potential as an unconventional feed resource for rabbits without any adverse effects.     

微粒体甘油三酯转运蛋白研究进展

从微粒体甘油三酯转运蛋白(MTP)结构、功能、活性与多态性、脂代谢中的作用、表达与调节等方面综述了微粒体甘油三酯转运蛋白是一种重要的脂质转运蛋白,着重论述了MTP与脂代谢关系、MTP表达与调节.MTP的活性、基因表达状态是控制极低密度脂蛋白合成、装配和分泌速率的重要因素,研究MTP基因表达与调节对预防动物脂肪肝、提高畜禽生产品质,探讨人类脂类代谢性疾病和心血管疾病等重要疾病形成机制,对防治这些疾病具有重要的临床意义.     

模拟干旱和盐胁迫下沙冬青种子硬实特性和抗逆性的研究

将1~5 d内每天吸胀的沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)种子视为不同硬实程度的种子T₁,T₂,T₃,T₄和T₅,与第5 d仍未吸胀的硬实种子(记作T_r)作为试材对其硬实特性和抗逆性进行研究,以期为沙冬青种子栽培驯化提供理论依据。结果表明:随着硬实程度的提高,种子的发芽势、发芽指数、活力指数呈上升趋势;电导率和丙二醛(MDA)含量逐渐下降;可溶性蛋白含量逐渐上升。不同处理对种子的硬实破除效果表明,80℃热水浸泡种子可达到最佳破除效果。通过测定模拟干旱胁迫和盐胁迫下不同硬实程度种子的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性和脯氨酸(Pro)含量,表明在相同逆境条件下,随硬实程度的加深,除极个别外,各项指标值均有不同程度的升高,且一定胁迫强度下硬实种子萌发幼苗的各酶活性和脯氨酸含量均极显著高于其他萌发幼苗(P<0.01),因此,硬实种子比非硬实种子有较强的保护酶调节系统。硬实程度越高,耐旱和耐盐能力也随之升高。     

培养液中铜水平对PK15细胞内铜离子浓度与CuZn-SOD活性的影响

在 PK15细胞无血清液体培养基中添加 0、7.8、15 .6、31.2、6 2 .5 μmol/L Cu,观察了培养液中不同铜水平对PK15细胞内铜离子浓度和 Cu Zn- SOD活性的影响及二者的相关性。结果表明 ,PK15细胞内铜离子浓度及 Cu Zn-SOD活性均随培养液中添加铜离子浓度升高和培养时间的延长而有不同程度的升高 ,其中以添加 Cu31.2 μmol/L组最高 (P<0 .0 5 )。PK15细胞内 Cu Zn- SOD活性与细胞内铜离子浓度和培养时间呈强正相关 (培养时间 :r=0 .873～0 .980 ,P<0 .0 5 ;铜离子浓度 :r=0 .90 0～ 0 .972 ,P<0 .0 5 )     

栗蚕蛹体液的一些免疫反应

为了探明栗蚕体内免疫机制,研究了栗蚕蛹体液免疫反应的某些特性。栗蚕蛹经细菌、真菌以及生理盐水诱导后,其体液对大肠杆菌(E.coli)、枯草杆菌(B.subtilis)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)及柞蚕链球菌(T.streptoc-occus)均表现出一定的抑菌作用。大肠杆菌诱导6 h后,栗蚕蛹体液中出现抗菌活性物质,诱导后4 d,体液的抗菌活性达到高峰值,11 d后活性消失。SDS-PAGE电泳结果表明,诱导后的栗蚕蛹血淋巴中有新蛋白产生,推测可能与其产生新的抗菌活性有关。     

秋季中华蜜蜂（Apis cerana cerana）工蜂有分泌活性的舌腺和无分泌活性的舌腺的超微结构比较

对秋季中华蜜蜂工蜂有分泌活性舌腺（９日龄）和无分泌活性的舌腺（采集蜂）的超微结构进行了观察和比较，发现二者的舌腺细胞的超微结构存在着差异。９日龄工蜂舌腺处在分泌活性状态。细胞核发达，多突起；粗面内质网发达，成平行状排列；胞内管、胞外管中都充满电子致密度均匀的物质，即王浆物质；有大量的分泌块；线粒体内嵴排列紧密，呈板层状。而采集蜂舌腺处在无分泌活性状态。核周边异染色质增多；粗面内质网不太发达，多呈泡状；胞内管中物质为一些不均匀的电子致密度大的粗颗粒物质；胞外管中只有少量水样物质；线粒体内嵴间隙相对变大，多发现内嵴间隙呈管泡状。