猪圆环病毒与胸膜肺炎放线杆菌混合感染的诊治

2019年3月,大庆某规模化猪场个别猪出现发育不良、咳喘、消瘦、皮肤苍白和呼吸困难等症状,随后出现死亡。为明确发病原因,降低损失,对送检病死猪进行临床症状观察、剖检及实验室检测,并对病原菌进行药物敏感性试验。检测结果为致病性胸膜肺炎放线杆菌和猪圆环病毒混合感染所致,分离的胸膜肺炎放线杆菌对阿莫西林和头孢唑高度敏感。本研究为养殖场饲养猪的死亡病因分析和防治提供了参考。     

胸膜肺料放线杆菌溶血毒素特性鉴定及免疫原性研究

本文报道了胸膜肺炎防线杆菌（APP）血清型7型菌株深－8株分泌的溶血素。研究证明该株至少可分泌两种溶血素，一种为热稳定的溶血素，另一种为热不稳定的溶血素。本研究没有对热稳定的溶血素进行提纯分析，而对热不稳定的溶血素经过盐析及凝胶过滤层析提纯后，进行SDS－PAGE分析，表明该溶血素为分子量65kDa的蛋白。本研究利用纯化的65kDa的溶血素蛋白与APP所有型的阳性血清做交叉中和实验和琼脂扩散实验及动物实验，证明该溶血素蛋白具有一定的免疫原性及保护力，但其诱导的免疫反应对同源菌株的攻击只能提供部分保护。     

Molecular Identification and Antimicrobial Susceptibility Test of Porcine Contagious Actinobacillus pleuropneumoniae Serotype 3

In order to understand the serotype and drug resistance of porcine contagious Actinobacillus pleuropneumoniae(APP), a pair of primers was designed according to GenBank database to amplify specific 950 bp fragment, and the molecular identification and antimicrobial susceptibility test of APP serotype 3 were investigated.The results showed that the PCR product sequences were more than 99% homology with the APP serotype 3 published in GenBank.The isolated strains were highly resistant and multiple drug resistance.The molecular identification and antimicrobial susceptibility test of APP serotype 3 provided the basis for the identification, diagnosis and prevention of porcine contagious pleuropneumonia.     

胸膜肺炎放线杆菌3种Apx毒素及外膜蛋白Omp2的原核表达及免疫反应性鉴定

猪传染性胸膜肺炎是猪群一种常见的细菌性疾病,给养猪业造成了巨大的经济损失。为了对胸膜肺炎放线杆菌的感染情况进行监测,本研究设计了针对该菌毒素ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ和外膜蛋白Omp2的全基因PCR扩增引物,以实验室保存的血清2型和5型菌株基因组DNA作为模板成功扩增出特异性基因片段,分别将目的片段克隆入原核表达载体成功构建重组表达质粒pColdI-omp2、pColdI-ApxⅡ、pET-32am-ApxⅠ、pCold-ProS2-ApxⅢ。将重组质粒转化Rosetta感受态细胞,通过IPTG诱导表达,应用His单克隆抗体和临床阳性猪血清对表达的重组蛋白上清进行Western blot分析,结果表明表达蛋白的分子量大小与预期相符,通过诱导条件的优化可以稳定表达可溶性蛋白,可溶性蛋白能与His单克隆抗体和临床阳性猪血清发生特异性反应,证明重组蛋白具有良好的免疫反应性。该试验为后期建立胸膜肺炎放线杆菌抗体的ELISA检测方法奠定基础。     

Actinobacillus capsulatus peritonitis and chyloabdomen in a Warmblood gelding

Primary peritonitis in horses attributable to Actinobacillus equuli has been reported in Australia, New Zealand and North America. Published reports describe a rapid response to treatment with appropriate antimicrobial and supportive treatment and an excellent prognosis for survival. To our knowledge, this is the first reported case of Actinobacillus capsulatus in the horse. The case was complicated by the development of an idiopathic chylous abdominal effusion. The report highlights the importance of molecular methods in the correct identification of bacterial species. Prognosis for horses diagnosed with Actinobacillus peritonitis may be guarded given the atypical response to appropriate antimicrobial treatment in this case.     

达氟沙星对猪胸膜肺炎放线杆菌的体外药效研究

为了解猪胸膜肺炎放线杆菌对达氟沙星的敏感性和达氟沙星的杀菌效果,收集和分离48株猪胸膜肺炎放线杆菌,采用微量肉汤稀释法和菌落计数法对体外药物敏感性试验和生长曲线、杀菌曲线进行了研究。猪胸膜肺炎放线杆菌对氨苄西林、磺胺异恶唑、头孢噻呋、大观霉素、黏菌素耐药率高,对阿莫西林/克拉维酸、复方新诺明、氟苯尼考、多西环素、庆大霉素、四环素、恩诺沙星、氧氟沙星、达氟沙星敏感。达氟沙星最小抑菌浓度(MIC)集中在0.0078μg/m L。达氟沙星浓度在MIC及以上时,随浓度升高,杀菌时间缩短,为典型的浓度依赖型抗生素。该试验结果可用于指导猪传染性胸膜肺炎的临床预防和治疗。     

应用噬菌体随机十二肽库筛选猪传染性胸膜肺炎菌体抗原模拟表位

利用猪传染性胸膜肺炎灭活菌苗免疫日本大耳兔得到猪传染性胸膜肺炎抗血清,将血清用饱和硫酸铵粗提IgG后,经DEAE-sephadex-A50低压层析系统纯化,以此得到IgG作为配基包被酶标板,对噬菌体随机十二肽库进行3轮不同条件的富集筛选,通过改变筛选条件,噬菌体的回收率从5.76×10-5增加到了1.69×10-2,P/N值逐步提高;随机挑取10个噬菌斑进行扩增,用ELISA检测其免疫活性,结果有6个阳性克隆与纯化的IgG有较强的特异性结合能力;对筛选到的6个阳性克隆提取ssDNA进行测序,并分析其氨基酸序列,其中5个克隆所递呈的序列一致,用Blastp软件进行分析,2种类型的氨基酸序列之间无同源性,且未发现同源性50%以上的序列,提示该短肽可能模拟了猪传染性胸膜肺炎菌体的特异的抗原表位。     

猪胸膜肺炎放线杆菌的分离与鉴定

吉林省某规模化养猪场送检疑似猪传染性胸膜肺炎的死猪病料,采用不同培养基进行病原菌分离,结果分离出3株疑似胸膜肺炎放线杆菌。通过对分离菌进行镜检、培养特性试验、生化特性试验、PCR鉴定,确定为3株均为胸膜肺炎放线杆菌,致病性试验结果表明,分离的胸膜肺炎放线杆菌具有强致病性。     

胸膜肺炎放线杆菌的实时荧光PCR检测

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae，APP）引起的危害养猪业的五大疾病之一。至目前为止App共报道有2个生物型15个血清型。所有型都可能致病，但有显著差异。使用血清学方法监测猪传染性胸膜肺炎有其局限。一些猪细菌分离培养阳性，但血清反应仍为阴性，对这些猪群只能使用病原分离进行确诊。亚临床感染及处于潜伏期的动物，