SRAP分子标记分析体系的建立及白簕资源亲缘关系分析

本实验对影响SRAP-PCR体系中的Mg2＋、dNTPs和引物浓度等因子进行了体系优化,建立了一套适合白簕SRAP检测的25μL反应体系：1.5mmol/LMg2＋,1.5mmol/LdNTPs,1μmol/L引物,10ng模板DNA,1.5UTaqDNA聚合酶;进一步以白梗簕菜为模板,利用优化的体系进行多态性标记引物组合分析,共筛选出17对引物;利用这些引物对7个白簕品种进行SRAP遗传多样性分析,共扩增出461条谱带。其中多态性谱带155条,多态性谱带比率为33.6%,白簕品种间的相似系数为0.7077~0.9474。经UPGMA聚类分析结果显示,所检测的7个白簕品种分为两大类,其中亲缘关系较近的青梗簕菜和细叶密刺簕菜聚成了一组;而其余的4个种,包括白梗簕菜、细叶小刺簕菜、紫柄簕菜、大叶大刺簕菜和红梗簕菜,聚成另一组。     

刺五加的同工酶与遗传分化的研究(Ⅱ)--花丝长度不同的刺五加类群的遗传多样性

该文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测了花丝长度不同的三个刺五加类群的异柠檬酸脱氢酶(IDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、过氧化物酶(POD)、细胞色素氧化酶(CCO)和酸性磷酸酶(ACP)五种同工酶型.结果显示,在多态位点0.99标准下,刺五加多态位点比例(P)为0.37,平均每个位点的预期杂合度(He)为0.320 0～0.387 7,平均每个位点的实际杂合度(Ho)为0.270 3～0.359 9,刺五加类群内基因多样度(Hs)为0.338 7,类群间基因多样度(Dst)为0.035 6,类群间基因分化系数(Gst)为0.095 1,刺五加三个类群的遗传相似性(I)为0.909～0.941,遗传距离(D)为0.059～0.091.初步推测刺五加是由雌雄同株的两性花逐步向雌雄异株的单性花分化,L-刺五加将进化成单雄性,S-刺五加将进化成单雌性.其遗传分化的时间约为29.5～45.5万年.     

刺五加总RNA提取方法的比较

为了获取到高质量的刺五加总RNA,以叶片为试材,比较不同提取方法的提取效果。结果表明,改良的异硫氰酸胍法效果最优,方法简单、经济,通过该方法获得的总RNA能够很好的满足后续分子生物学实验的要求,试剂盒方法效果次之,CTAB法效果第三,Trizol法最差。     

短梗五加的繁育试验

在短梗五加的繁育栽培试验中,对种子催芽、硬枝扦插、嫩枝扦插进行不同的对比试验。结果表明,种子催芽以变温加激动素（k inetin）效果最佳,硬枝扦插宜以枝条和根条浸蘸ATP生根粉或吲哚丁酸（IBA）为主,嫩枝扦插以ATP生根粉加遮阴棚效果最好。     

刺五加栽培关键技术

刺五加的人工种植技术逐渐开展起来,但其种植技术理论尚不成熟,针对野生刺五加自然生长特点及其生产模式的要求,从种苗繁育、栽植、田间管理、病虫害防治、采收等对刺五加栽培关键技术进行了总结,以期达到高效种植目的。     

刺五加种皮结构及种胚形态发育观察

利用体视显微镜和扫描电镜分别观察刺五加种子外部形状、外种皮表面、外种皮内侧、内种皮外侧、外种皮横切面结构.结果表明,刺五加种子呈扁平状新月形;外种皮表面近于平滑,表面细密而平整;外种皮横切面由两部分细胞组成,外侧5～7层,最内侧1层.采用层积处理的方法,保持温度23～24℃ 3个月可完成种胚形态发育,在0～5℃条件下2个月解除生理休眠.     

刺五加的形态解剖与遗传分化的初步研究

报道了3类花丝长度不同的刺五加植株之间的部分形态学及解剖学特征。结果表明；伴随异长雄蕊特征的其它表现在于果实形状、花丝角度、导管长度、导管长宽比等。并对花丝长度不同的刺五加的遗传分化做出了推测。     

刺五加对犊牛肝脏SOD及MDA活性的影响

以犊牛为研究对象,研究刺五加对犊牛抗氧化机能的影响。选用7日龄中国黑白花公犊牛12头,随机分为4组,对照组为未添加组,试验组分别在鲜牛乳中添加2 g/kg刺五加粗粉、1 g/kg刺五加超微粉(UMPⅠ)1、g/kg刺五加化微粉(UMPⅡ),检测投喂后14,21,28 d犊牛血清和28 d犊牛肝脏中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性。刺五加提高了犊牛肝脏和血清中SOD活性,降低了MDA的含量,对GSH-Px活性无显著影响。结果表明不同的刺五加加工产品都可增强犊牛抗氧化机能,其中刺五加化微粉的作用最为显著。     

舒肝解郁胶囊对抑郁模型大鼠脑内5-HT、DA及其代谢产物水平的影响

目的 研究舒肝解郁胶囊对抑郁模型大鼠脑内5-HT、DA及其代谢产物水平的影响。方法 将28只雄性SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、舒肝解郁组、氟西汀组四组;采用慢性轻度不可预见性应激（CUMS）结合孤养方式建立抑郁大鼠模型,舒肝解郁组和氟西汀组大鼠于造模同时分别给予舒肝解郁胶囊和氟西汀干预;用库仑阵列电化学高效液相色谱法分别检测大鼠内侧前额叶皮质（mPFC）及海马CA3区 5-HT、DA及其代谢产物的含量。结果 应激21 d后,模型组与正常对照组比较,大鼠mPFC区5-HT、5－羟吲哚乙酸（5-HIAA）、DA和高香草酸（HVA）的浓度均显著降低,差异有统计学意义（P<0.01）,海马CA3区5-HT、DA和5-HIAA的浓度均显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）;与模型组比较,舒肝解郁组和氟西汀组可显著增加大鼠mPFC区5-HT 、DA和HVA浓度,差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）,海马CA3区5-HT、DA和5-HIAA浓度显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 舒肝解郁胶囊能增强抑郁模型大鼠中枢5－HT和 DA神经递质系统的功能,这可能是其抗抑郁作用的神经生化机制之一。     

刺五加种子休眠解除过程中过氧化物酶和酯酶同工酶的变化

剌五加种子用100 mg/L赤霉素(gibberellin,GA)浸泡后进行变温层积(15～18℃14周,2～6℃14周)处理。层积16周后,种子开始萌发,GA处理种子的萌发率明显高于对照,在28周时,GA处理的萌发率达到69.33%,而对照只有50%。在实验期间,聚丙烯凝胶电泳始终能够检测到1条过氧化物酶(peroxidase,POD)和1条酯酶(esterase,EST)同工酶带,GA处理促进这两条同工酶带的表达。与对照相比,GA处理使层积16周出现的POD新条带更强,使EST新条带提前(第12周)出现(对照在第16周)。结果表明,外源GA处理促进层积打破刺五加种子休眠的效应,GA的这种效应与促进POD和EST同工酶的基因表达有关。