2019年福建某原种猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒流行毒株ORF5基因的遗传变异分析

为确诊福建某原种猪场保育猪群临床暴发的疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),以及了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)毒株流行情况,从该猪场采集2周龄?8周龄各周龄段保育猪临床疑似发病猪全血各5份,将各周龄段5份血样各取50 μL混匀,并分别命名为2W、3W、4W、5W、6W、7W、8W.利用PRRSV ORF5基因特...     

α-银环蛇毒素融合基因表达载体的构建及原核表达

设计并人工合成2条引物,对作者构建的重组质粒pMD-α-BGT进行PCR扩增获得α-BGT基因。将目的基因连接至pUCm-T载体构建克隆质粒pUCm-α-BGT。克隆质粒经BamHⅠ、NotⅠ双酶切后连接至融合蛋白表达载体pGEX-4T-1中,成功构建融合基因表达载体pGEX-α-BGT,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。表达产物经15%SDS-PAGE分析,在约34ku处可见明显的外源蛋白质表达带,与预计的分子量大小一致,其表达量约占细菌总蛋白的32.6%。Westernblotting和间接ELISA检测结果表明,α-BGT的融合表达蛋白与天然α-BGT标准品具有相似的抗原性。     

北极狐白介素-18基因的克隆与序列分析

根据GenBank中登录的犬白介素-18（IL-18）基因序列,设计了1对特异性引物。将北极狐外周血淋巴细胞经植物血凝素（PHA）诱导,用TRIzol裂解,提取总RNA,通过反转录聚合酶链式反应（RT—PCR）扩增狐狸IL-18基因,连接pMD18-T载体,转化DH5d感受态细胞,获得阳性重组质粒。核苷酸测序结果显示,获得的基因序列全长590bp,含582bp的开放阅读框,编码193个氨基酸,与已知犬IL-18序列的同源性高达98．7％,氨基酸同源性为96．4％。     

２，４-二叔丁基苯酚对啤酒花幼苗生长与光合特性的影响

前期对不同植龄啤酒花根系分泌物及根际土壤的化学物质进行了分离鉴定,结果发现有酚类物质的存在且２,４-二叔丁基苯酚含量较高,为了进一步证实啤酒花是否存在自毒作用,采用田间小区栽培试验,研究了不同用量［０（ＣＫ,Ａ０）,７．５（Ａ１）,１５．０（Ａ２）和２２．５ｍｍｏｌ／ｍ２（Ａ３）］２,４-二叔丁基苯酚处理对啤酒花幼苗生长及光合特性的影响。结果表明,２,４-二叔丁基苯酚用量Ａ１ 和Ａ２ 处理,啤酒花生长好,地上部、地下部、总生物量及日均光合速率均比对照高,且达到显著差异（犘＜０．０５）;２,４-二叔丁基苯酚用量Ａ３ 处理,啤酒花地上部、地下部和总生物量及光合特性均较对照降低,差异达到显著水平（犘＜０．０５）。啤酒花幼苗叶片光合速率日变化呈双峰型,最高峰出现在上午９：００左右,次高峰出现在中午１５：００左右,午间有明显的“午休“现象,与对照（Ａ０）相比,Ａ１、Ａ２、Ａ３ 三个处理的次高峰出现的时间均有推迟,且Ａ１ 和Ａ２ 处理的幼苗午休”现象不太明显,气孔因素是导致其“午休”的主要原因。     

转化生长因子-β在母胎界面的表达调节作用

转化生长因子-β（TGF-β）是一种多功能细胞因子,在细胞生长、分化、免疫调节和细胞外基质合成以及血管生成等方面起重要作用。TGF-β由多种实质细胞分泌产生,其中包括外周单核细胞、T淋巴细胞和树突状细胞等。TGF-β可影响生殖活动的各个环节,包括性腺轴的调控、子宫内膜周期性变化、胚胎着床和发育。同时,TGF-β在免疫耐受中是主要的调节因子,TGF-β通过自分泌或旁分泌的方式介导母胎界面的免疫调节过程,以防止发生胎儿的免疫排斥反应。文章综述了TGF-β家族在妊娠过程中免疫调节作用的最新研究进展。     

肉牛热应激与综合防治措施

热应激是应激的一种,同其他应激一样,一般反应都涉及到神经系统、内分泌系统及免疫系统的一系列活动,其中肾上腺皮质激素在机体的适应过程中起着主导作用。实现这一过程的生物学途径为：应激源→受体器官→中枢神经系统→垂体前叶→促肾上腺皮质激素→肾上腺皮质部→肾上腺皮质激素（主要是糖皮质激素）分泌→靶组织／靶器官→应激反应。在应激反应中,下丘脑-垂体-肾上腺轴起到了关键性的作用,而且提供了一个将神经信息转换成生理反应的模式。     

高效液相-串联质谱法测定猪、牛和羊尿液中18种同化激素的含量

建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测动物尿液18种同化激素的方法。动物尿液在37 ℃（±0.5℃）下酶解16 h后,调节pH=7.0（±0.5℃）,C18固相萃取柱净化,用HPLC-MS/MS进行检测。18种同化激素在1~ 500 μg/L浓度范围内线性关系良好(r2≥0.99),回收率在70.9 ~112%之间,日内变异系数范围为1.2 ~ 13.1%,日间变异系数范围为3.5~16.7%,检测限为0.5 μg/kg,定量限为1.0 μg/kg。本方法操作简便,灵敏度高,适用于动物尿液中18种同化激素的同时测定。     

m6A表观遗传修饰及其调控机制研究进展

N⁶-甲基腺嘌呤（N⁶-methyladenosine,m⁶A）修饰是现阶段发现的真核生物体内最广泛的RNA表观遗传修饰方式,近年来研究显示,m⁶A在真核生物间具有较高的保守性,在基因表达及细胞命运调控中发挥着关键作用,且对mRNA的可变剪接、定位、翻译及稳定性有较大影响。现有的m⁶A修饰检测技术可以较为准确、高效地检测出生物样本中的m⁶A修饰丰度,并能快速、简便地进行m⁶A修饰的高通量测序,以及在单碱基分辨率下检测m⁶A修饰在RNA上的位置。尽管m⁶A修饰相关调控蛋白对畜禽复杂经济性状的影响近年来已有少量报道,但其中的作用机制仍未得到充分阐明。大量人类及模式生物上的研究表明,m⁶A修饰相关蛋白能够影响生长发育、繁殖、热应激、炎症及癌症等生物学过程,为探究畜禽m⁶A修饰参与复杂性状调控机制提供一定的借鉴意义。作者主要从m⁶A甲基化修饰相关蛋白（甲基转移酶、去甲基化酶及读取蛋白）、m⁶A检测技术、m⁶A对哺乳动物复杂性状的调控机制、m⁶A与其他表观修饰的互作机制等方面进行阐述,为m⁶A在畜禽遗传育种中的应用提供新的见解。     

DHEA诱导小鼠PCOS模型过程中性激素的变化规律

【目的】鉴于在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)发病机理和治疗方式上的诸多争议,以及使用人类PCOS材料进行研究的局限性,本研究通过构建PCOS小鼠模型以探究在模型构建过程中性激素水平的变化规律。【方法】皮下注射脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone, DHEA)诱导昆明白雌鼠产生PCOS样临床症状,通过结晶紫染色查看小鼠性周期是否发生停滞;利用HE染色的方式确定卵巢发育状况;利用ELISA技术调查建模过程中血清睾酮和雌二醇浓度的变化规律。【结果】使用结晶紫对小鼠阴道上皮细胞染色可准确区分小鼠各个性周期阶段;使用6 mg/100 g DHEA持续诱导20 d后,昆明白小鼠性周期循环发生了一定的停滞,且在建模过程中体重变化与芝麻油溶剂的加入呈显著相关(P<0.05),与DHEA处理无关;DHEA连续处理后可见卵巢中巨大囊状卵泡出现,血清睾酮水平出现显著升高(P<0.05);自PCOS模型构建的第5天起,血清睾酮水平显著上升(P<0.05),且维持到建模结束;而血清雌二醇水平出现了阶段性变化,在第10、15天...     

兽医临床三种β-内酰胺酶的检测方法比较

β-内酰胺环类抗生素如阿莫西林、氨苄西林、头孢菌素等具有高效、广谱、低毒的优点,在兽医临床上广泛应用.但近年来耐药菌株逐年增多,且有交叉耐药和多重耐药现象,而使其应用受到限制.在细菌产生耐药性的机制中,β-内酰胺酶的产生是最主要的.因此,寻找一种快速检测β-内酰胺酶、且结果可靠的方法是当务之急.近年来,笔者对本实验室保存的猪、鸡常见致病菌,用三种不同的检测方法进行了β-内酰胺酶的检测,现将各种方法介绍如下.