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11.
【目的】研究牦牛MYL3基因的结构和表达特征,探究其生物学功能及影响牦牛肌肉生长发育的机制。【方法】以美仁牦牛cDNA为模板,PCR扩增MYL3基因编码区序列(CDS),利用MEGA11软件构建系统进化树,利用生物信息学软件对其编码蛋白进行分析。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MYL3基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏(参照)、睾丸、肌肉和脂肪组织中的相对表达量。【结果】牦牛MYL3基因CDS区长600 bp,共编码199个氨基酸,存在1个碱基突变位点,位于第165位(A>T)。系统进化分析结果显示,牦牛与普通牛的亲缘关系最近,与单峰驼的亲缘关系最远。生物信息学分析结果显示,牦牛MYL3蛋白为不稳定的亲水性蛋白,无信号肽,不存在跨膜结构,主要存在于细胞质内,有8个磷酸化位点和2个N 糖基化位点,蛋白的二级结构以α-螺旋为主,主要与调控肌肉生长发育的相关蛋白相互作用。RT-qPCR结果表明,MYL3基因在心脏中的表达量最高,极显著高于其他组织;肌肉中次之,与除心脏外的其他组织存在极显著差异。【结论】MYL3基因可能与牦牛心脏发育有关,对肌肉的生长发育和肉质有一定影响。 相似文献
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苏云金芽孢杆菌Bt营养期杀虫蛋白Vips主要分为Vip1、Vip2和Vip33种。Vip1和Vip2构成二元毒素,对叶甲科昆虫具有特异杀虫活性。Vip3对鳞翅目昆虫具有广谱杀虫活性,该蛋白广泛存在于Bt中,与已知杀虫晶体蛋白ICPs没有序列相似性。Vip3通过诱发细胞凋亡,最终导致昆虫死亡,这与Btδ-内毒素的作用机理完全不同,Vips的发现对于Bt的进一步开发利用具有重要意义。本文主要对营养期杀虫蛋白Vips的分布、特性、作用机制及应用等进行报道。 相似文献
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HUANG Yi HU Jian-da ZHENG Jing LI Jing WEI Tian-nan ZHENG Zhi-hong CHEN Ying-yu 《园艺学报》2012,(1):70-75
AIM: To study the effects of baicalin on CA46 cell xenografts in nude mice. METHODS: The nude mice with CA46 cell xenografts were treated with drugs via intraperitoneal injection daily, and were divided into 5 groups: negative control group, 15 mg/kg baicalin group, 30 mg/kg baicalin group, 60 mg/kg baicalin group and 4 mg/kg etoposide (VP-16) positive control group. After 12-day treatment, the weight of CA46 cell xenografts stripped from some nude mice in the 5 groups was used to evaluate the effect of baicalin on xenograft growth in the nude mice. The apoptosis, necrosis and pathological changes of the xenograft cells were examined under light microscope and transmission electronic microscope respectively. The expression levels of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/protein kinase B (Akt) signaling pathway-related proteins extracted from xenografts were determined by Western blotting. The other nude mice with CA46 cell xenografts in the 5 groups continued to be treated with the drugs until death in order to evaluate the effect of balcalin on survival time of the nude mice with CA46 cell xenografts. RESULTS: Baicalin remarkably inhibited the growth of CA46 cell xenografts, induced apoptosis and necrosis of xenograft cells, and reduced the protein expression of phospho-Akt (p-Akt), nuclear factor-kappa B (NF-κB), mammalian target of rapamycin (mTOR) and phospho-mTOR (p-mTOR) in the xenografts after 12-day treatment. Furthermore, baicalin prolonged the survival time of the nude mice with CA46 cell xenografts in a dose-dependent manner. CONCLUSION: Baicalin inhibits the growth and induces apoptosis of CA46 cell xenografts in the nude mice, and prolongs the survival time of the nude mice with CA46 cell xenografts through the mechanism of down-regulating PI3K/Akt/NF-κB and PI3K/Akt/ mTOR signaling pathways. 相似文献
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17.
采用PCR技术从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码MIC3的基因,克隆入pMD18-T载体,转化至E.coliDH5α感受态细胞,经抗性平板筛选、小量抽提质粒进行酶切、PCR及DNA测序鉴定后,亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1。然后筛选含有目的基因的重组质粒,并转染IBRS-2细胞,在G418压力下进行筛选,利用SDS-PAGE、Western blot和ELISA检测表达情况。结果显示,扩增的MIC3基因与GenBank上相应基因序列(AJ132530)的一致性达99.9%,构建的真核表达质粒pcMIC3能在转染的IBRS-2细胞中表达分子量约为39.2ku的MIC3,且表达的蛋白质具有良好的免疫活性,为进一步研究该质粒的动物免疫试验奠定了基础。 相似文献
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19.
H3亚型猪流感病毒荧光定量PCR检测方法的建立 总被引:2,自引:1,他引:2
通过RT-PCR方法克隆了H3亚型猪流感病毒HA基因一段靶序列,构建重组质粒作为标准阳性模板.根据GenBank中的H3亚型猪流感病毒HA基因保守序列设计了用于FQ-PCR的1对引物和1条TaqMan探针.通过条件优化,以10倍系列稀释的质粒为标准品进行荧光定量PCR扩增,并制作标准曲线,建立了检测H3亚型猪流感的荧光定量PCR方法.结果表明,该方法检测灵敏度可达1.0×100拷贝/μL,线性范围为109~100,达10个数量级;对起始浓度为1.0×109、1.0×108、1.0×107拷贝/μL的标准品的最终实际测得值(Ct)分别为13.68,18.21和20.57;变异系数分别为0.31%、0.17%和0.12%,均小于5%,说明此方法具有良好的准确性和重现性.对阳性组织病料的检测表明,该方法的检测灵敏度高出常规PCR,与套式PCR具有相近的灵敏度. 相似文献
20.
黄芪多糖对雏鸡外周血T淋巴细胞转化功能的影响 总被引:34,自引:3,他引:34
将108只1日龄伊莎系蛋用公雏均分为3组:一组为对照,其余2组在3日龄时,于背侧颈部皮下分别注射0.2、0.4mL黄芪多糖注射液(0.01g/mL)1次,再分别于7、21、35、49日龄时采用MTT比色法及微量全血培养3H-TdR掺入法检测外周血T淋巴细胞转化率的动态变化。结果表明,黄芪多糖对21、35日龄雏鸡T淋巴细胞转化功能有增强作用,且与剂量有相关性,而对7、49日龄雏鸡的作用不明显。MTT比色法与3H-TdR掺入法的检测结果无显著差异(P<0.05)。 相似文献