ZBED6基因敲除猪肾脏转录组分析

【目的】探究锌指BED结构域结合蛋白6(zinc finger BED domain-containing protein 6,ZBED6)基因敲除对猪肾脏组织基因转录表达的影响,并解析ZBED6基因调控猪肾脏代谢的靶基因及其通路。【方法】对8月龄ZBED6基因敲除巴马香猪(ZBED6 KO)和同月龄野生型巴马香猪(WT)的肾脏组织(n=3)进行总RNA提取,利用实时荧光定量PCR检测胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF2)和差异基因的表达量;以Illumina Hiseq高通量测序技术对ZBED6 KO和WT猪肾脏组织mRNA进行转录组测序(RNA-Seq),用猪Sus scrofa 11.1作为参考基因组序列,通过生物信息学软件TopHat、Cufflink、Cuffmerge和Cuffdiff对测序数据进行分析,筛选ZBED6 KO和WT猪肾脏组织中的差异表达基因,对差异表达基因进行层次聚类和KEGG通路富集分析,并通过实时荧光定量PCR验证RNA-Seq结果中差异表达基因的可靠性。【结果】实时荧光定量PCR结果显示,ZBED6 K...     

外源性RFRP-3和MLT对雄鼠初情期生长及繁殖性能的影响

【目的】探究外源性RF-酰胺相关肽3(RF-amide related peptide 3,RFRP-3)和褪黑素(melatonin, MLT)对雄性昆明小鼠初情期生长、繁殖性能的影响及两者之间的关系。【方法】以初情期雄性昆明小鼠为研究对象,单独给予雄鼠生理盐水、外源性RFRP-3或MLT以及混合给予RFRP-3、MLT,检测其对雄鼠平均增重、平均采食量、料重比、睾丸发育情况,血清生长激素(growth hormone, GH)、黄体生成素(luteinizing hormone, LH)水平,以及生长、生殖相关基因表达的影响。【结果】外源性RFRP-3能抑制雄鼠GH基因表达,并抑制体重增长,提高料重比;而外源性MLT促进雄鼠GH基因表达,使体重增长较快,料重比降低;RFRP-3和MLT共同处理下,GH基因表达增加,体重增长速度与单独给予MLT组接近。RFRP-3可抑制褪黑素受体1A(melatonin receptor 1A,Mtnr1A)、LH基因表达及睾酮分泌,小鼠睾丸各级生精细胞和间质细胞数量减少;MLT可促进Mtnr1A、LH基因表达及睾酮分泌,睾丸间质细胞密度极显著增加(...     

广灵驴FTO基因克隆、序列分析及组织差异表达

【目的】对广灵驴脂肪和肥胖相关基因(fat mass and obesity-associated gene, FTO)进行克隆及序列分析,同时检测其在广灵驴各组织中的表达差异,以探究广灵驴FTO基因结构对其生理代谢功能的影响。【方法】运用RT-PCR技术扩增并克隆广灵驴FTO基因CDS序列,进行基因及蛋白质功能分析,同时运用实时荧光定量PCR方法检测FTO基因在广灵驴7种组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌及皮下脂肪)中的差异表达。【结果】广灵驴FTO基因CDS区序列长1 518 bp,编码505个氨基酸,序列提交至NCBI,登录号:MZ169553。广灵驴FTO基因与马、猪、牛、人、羊驼、绵羊和山羊的相似性为99.3%、90.3%、89.5%、90.8%、90.7%、89.2%和89.2%;系统进化树分析发现,广灵驴与马的亲缘关系最近。FTO蛋白分子质量为58.35 ku,理论等电点为5.07,脂肪系数为80.36,不稳定系数为48.82,平均疏水指数为-0.550,为不稳定的酸性亲水蛋白。FTO蛋白无信号肽和跨膜区,主要定位于细胞质中,具有34个磷酸化位点与5个糖基化位点...     

世界蔬菜

基因调控番茄成熟期美国麦迪欧生物技术公司已研究出用转基因方法来控制番茄提前或延缓成熟期的技术,从而为规模化调节番茄的上市时间找到了一条最好的路子;也为市场提供反季节蔬菜找到了最经济的方法。这种转基因番茄已经过8年试种,其果实中的番茄红素含量比普通番茄高出2．5倍,在同样的种植条件下每季可开3～4次花(常规品种仅开2次花);果实成熟过程中和成熟后,其细胞膜的衰老过程变慢,因而更耐贮藏。这种番茄已通过了国家对转基因作物的品种鉴定。     

四川的绵羊品种/群体导入FecB的可行性探讨

四川的绵羊品种/群体的繁殖力都比较低,一胎只产1只羔羊,极少产2只,本文详细介绍了 FecB基因与绵羊繁殖力的关系、四川的主要绵羊品种/群体和国内携带FecB基因的绵羊品种/群体,针对四川的绵羊品种/群体,探讨了导入FecB的措施与方法,导入后羊群的饲养管理等,以期通过导入FecB基因来提高四川的绵羊品种/群体的繁殖力...     

我国绵羊Fec B基因的研究进展

绵羊Fec B基因是BMPR-IB基因的A746 G位置的突变,导致249位置处的谷氨酰胺转变为精氨酸,从而引起一系列的生理效应.本文阐述了Fec B基因的由来、定位、生理效应、国内绵羊群体的Fec B基因的研究进展及Fec B基因在国内的应用,以期促进我国绵羊多胎繁殖基因的导入,提高绵羊群体的繁殖能力.     

水稻光温敏核不育系粘S的选育与应用

粘S是怀化市农业科学研究所用湘陵628S与黄华占杂交,经6a11代选育而成的水稻光温敏核不育系,2015年通过湖南省农作物品种审定.所配杂交组合粘两优4011、粘两优28、粘两优1086和粘两优2363先后通过湖南省或国家品种审定.介绍了该不育系的选育过程、特征特性、繁殖和制种技术要点.     

大豆细胞周期G1/S期阻滞对镉胁迫的应答调控机制

选取对Cd抗性不同的两个大豆品种为试验材料,采用培养皿双层滤纸法培养幼苗,分别添加不同Cd浓度溶液处理,Cd浓度设为0～2.5 mg/L处理4 d,通过对幼苗根尖细胞周期和相关基因表达的研究,旨在探讨Cd胁迫下大豆细胞周期G1/S期阻滞调控的应答机制。结果表明,不同的Cd浓度处理均能引起大豆幼苗根尖DNA的损伤,造成基因组的不稳定性,Cd处理后‘辽豆10号’细胞周期阻滞在G1/S期,而‘沈农豆20’则是阻滞在G2/M期;DNA损伤检验点基因ATM和ATR的表达量与Cd浓度呈明显的倒U型剂量-效应关系;DNA错配修复基因MSH2和MSH6的表达量与Cd浓度呈明显的倒U型剂量-效应关系。Cd胁迫引起DNA损伤被MRN蛋白复合体识别,从而诱导ATM激活,然后ATM通过磷酸化p21抑制CDK在cyclin-Cdk/PCNA复合体中磷酸化,使转录活化因子E2Fa不能脱离Rb控制,失去转录活化因子的作用,从而使细胞被阻断在G1/S期。     

AP2/ERF转录因子响应植物涝渍胁迫的研究进展

AP2/ERF (APETALA2/ethylene-responsive factor)是植物中广泛存在的一类超大家族转录因子,含有1～2个由60～70个氨基酸组成AP2/ERF结构域,根据AP2/ERF结构域的数量及结合序列可以将其分为5个亚家族：AP2 (APETALA2)、ERF (Ethylene responsive element binding factor)、DREB/CBF (Dehydration responsive element/C-repeat)、RAV (Related to AB13/VP)和Soloist。该家族转录因子在调控植物响应涝渍胁迫过程中发挥重要作用,本研究综述了AP2/ERF转录因子的发现、结构特征和分类,重点介绍了近年来该类转录因子参与调控植物对涝渍胁迫的响应过程等方面的研究进展,可为今后挖掘和利用该类转录因子基因进行分子遗传改良和种质创新提供参考。     

桑葚MaMYB44基因的克隆与生物信息学分析

本研究对桑葚(Morus alba L. cv.‘Cheongil’) MaMYB44转录因子进行了生物信息学等的研究,首先对桑葚中MaMYB44基因进行克隆。通过生物信息学分析,发现MaMYB44基因长度为720 bp,编码239个氨基酸,分子质量为58 215.61 Da,理论等电点5.10;通过分析桑葚蛋白MaMYB44的疏水性可知,其中的氨基酸呈现疏水性;通过桑葚MaMYB44蛋白进行跨膜区分析表明,Ma MYB44所有氨基酸都在细胞膜外,无跨膜结构,所以并不是跨膜蛋白;即使有信号肽结构的存在,但是螺旋结构并不存在;然后构建植物表达载体,获取阳性质粒,亚细胞定位后显示MaMYB44基因定位于细胞核中;进一步RT-qPCR分析得出结果,MaMYB44基因在茎中的表达量最高,其次是果实、叶、根。可初步推测该基因主要在桑葚茎中表达并行使功能。