仔猪大肠杆菌K88ac—ST1—LTB三价基因工程灭活苗的研究

产肠毒素性大肠杆菌所致的仔猪黄、白痢在我国广大养殖地区流行十分广泛 ,发病率和死亡率都很高 ,即便是病愈存活的仔猪 ,其生长发育和生产性能指标也会受到严重影响 ,给养猪业造成了极其严重的经济损失。我们利用基因工程技术将大肠杆菌菌毛Ｋ88ａｃ抗原基因与肠毒素ＳＴ1和ＬＴＢ 基因融合在一起 ,获得了高效表达Ｋ88ａｃ -ＳＴ1-ＬＴＢ 融合蛋白的基因工程菌株所表达的产物 ,既保持了Ｋ88ａｃ菌毛抗原和ＬＴＢ 肠毒素良好的免疫原性 ,又赋予了ＳＴ1的免疫原性 ,同时在构建过程中 ,通过定点突变使ＳＴ1丧失了原有的生物毒性 ,这样就可以从…     

猪繁殖-呼吸综合征病毒上海株的分离鉴定

从上海地区５个发病猪场的病料中,分离到３株致Ｍａｒｃ－１４５细胞病变的病毒：ＳＨ１、ＳＨ２和ＳＨ３,理化特性研究表明,３株分离毒均对氯仿、乙醚、甲醛、热（５６℃）、酸（ｐＨ６以下）、碱（ｐＨ８以上）敏感。负染可见病毒以大小不等的具囊膜的球形粒子为主,囊膜上有纤突,直径为６０￣１００ｎｍ;超薄切片可见病毒粒子分散在细胞浆内,直径为４５￣８０ｎｍ。间接免疫荧光试验表明,３株分离毒均与ＰＲＲＳＶ高免血清呈强阳性反应,而与ＨＣＶ、ＰＰＶ、ＰＲＶ、ＴＧＥＶ高免血清的反应均呈阴性。综上可见,所分离的病毒为ＰＲＲＳＶ。     

间接法Dot—ELISA检测副鸡嗜血杆菌的研究

本文首次成功地建立了检测副鸡嗜血杆菌抗原的间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，Ｈｐｇ抗原的最低检出量为３．９１×１０＾５ＣＦＵ／ｍｌ。Ｈｐｇ人工感染样本的抗原阳性检出率为：口咽试子９５．５％；鼻窦及眶下分泌物拭子９０．９％。经统计分析，二者在５％显著水平无显著水平无显著差异。人工感染后４天及８天口咽拭子的抗原阳性检出率分别为１００％和９５．５％。经统计学分析，二者在５％显著水平无显著差异，Ｈｐｇ自然感染样本     

间接法Dot－ELISA检测传染性法氏囊病病毒的研究

本文应用间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ进行鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）抗原的检测，其最低检出量为０．４３μｇ／ｍｌ。对人工感染／自然病例的各组织脏器进行检测，结果法氏囊的ＩＢＤＶ检出率为１００％，脾脏的检出率为８０％／８４．９％，其它器官组织如肾、胸腺、心、肝、肺、盲肠扁桃体、胸肌等均含有一定量的病毒（１１～６０％）。经统计学分析，法氏囊与脾脏的病毒检出率之间具有显著性差异（人工感染差异极显著Ｐ＜０．０１，自然病例差异显著Ｐ＜０．０５），进一步证实法氏囊是ＩＢＤＶ最主要的靶器官。试验结果表明，该法检测ＩＢＤＶ抗原，敏感性高、特异性强、重复性好，并且经济、方便、快速，适于大批量样品检测，可作为一种诊断ＩＢＤ的比较理想的方法。     

种鸡场鸡白血病的净化研究(Ⅰ)--ALV感染情况调查

应用双抗主酶联免疫吸附试验（ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ）对北京地区和河北部分种鸡场及１家ＳＰＦ鸡场进行了鸡白血病病毒感染情况的调查,结果发现：不同品系的鸡对ＡＬＶ的感染率有显著差异;分别采用蛋清与肛拭作为试验样品,得到的结果是不相同的,研究认为,选择蛋清作为试验样品是鸡场净化过程中较理想的材料之一。     

铜对体外仔猪软骨细胞增殖和自分泌IGF—I、IGFBP的影响

体外分离、培养仔猪关节软骨细胞，然后在细胞培养液中分别添加0、7．8、15．6、31．2、62．5μmol/L铜。结果表明，软骨细胞在4种浓度的铜中可存活并增殖，而且能增加胰岛素样生长因子（IGF－I）、胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP3）的分泌量。但随铜浓度的增加，其存活率、增殖率、^3H-TdR掺入率及IGF－I、IGFBP3的分泌量有明显的差异。且以培养液中添加31．2μmol/L铜对软骨细胞的增殖作用最强，增殖率、^3H-TdR掺入数、IGF－I、IGFBP3的分泌量显著高于对照组9P＜0．01）。表明31．2μmol/L铜浓度是促进体外软骨细胞增殖和自分泌IGF－I、IGFBP3的最适浓度。     

一株基因Ⅶ型新城疫病毒的分离及分子鉴定

从一起新城疫暴发的病例中分离出1株新城疫病毒（NDV），命名为铜山分离株（TS）。运用RT-PCR技术，克隆了该分离株F基因的重要功能片段（约0.5kb)，并进行了序列测定。序列分析表明，TS分离株在F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为^112-R-R-Q-K-R-F^117，与NDV强毒株特征相符，且具有101外的K（赖氨酸）和121处V（缬氨酸）2个特征性氨基酸，与基因Ⅶ型NDV的特性完全相符。     

应用套式PCR分段扩增犬瘟热病毒融合蛋白的全基因

为研究犬瘟热病毒（ＣＤＶ）融合蛋白各段功能,根据ＣＤＶＯｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株的融合蛋白基因序列,设计合成了１０条寡聚核苷酸引物。对此１０条引物进行不同的配对,将１株犬瘟热疫苗弱毒株细胞培养物的总ＲＮＡ进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增,利用１次ＰＣＲ扩增得到了７个基因片段,最长的达１６６９ｂｐ,最短的为３１４ｂｐ;应用套式或半套式ＰＣＲ,扩增得到了能覆盖整个融合蛋白基因的８个片段     

欧福—SP消毒剂杀菌效果的测定

欧福－SP消毒剂是一种新型复合消毒剂。将消毒剂稀释成1：200、1：300、1：500、1：1000、1：1500五个稀释度，对大肠杆菌、沙门氏菌、绿脓杆菌、葡萄球菌进行5、10、20、30和60分钟等5个时间段的效果试验。结果表明，消毒液浓度越高、灭菌时间越长，消毒效果越好。一般情况下，使用1：1500浓度，灭菌20分钟以上为宜。