梅花鹿成纤维细胞因子受体2基因多态性及其与茸重性状的关联分析

【目的】探索梅花鹿成纤维细胞因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)基因多态性及其对茸重性状的影响。【方法】应用直接测序法对梅花鹿FGFR2基因的全部外显子进行测序分析,通过MassARRAY^® SNP分型技术对314头24月龄梅花鹿进行基因分型和单倍型分析,分析FGFR2基因不同基因型和单倍型与茸重的关联性。【结果】在梅花鹿FGFR2基因中共发现12个多态性位点,其中5个位于外显子区域,且突变均未引起氨基酸改变,属于同义突变,其余7个位点均存在于内含子区域。分型结果显示,g.80975864 T>G位点未分型成功,后续对其余11个位点进行了分析,g.80943673 T>C、g.80943683 C>A及g.80938352 C>T 3个位点属于中度多态位点(0.25＜P＜0.5),其余位点均属于低度多态位点(P＜0.25)。χ²检验结果表明,g.80998742 G>A和g.80987708 G>A 2个位点偏离Hardy-Weinberg平衡(P＜0.05),其他9个位点均处于Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05)。关联分析结果表明,11个多态性位点各基因型之间的茸重差异均不显著(P＞0.05)。单倍型结果显示,FGFR2基因存在5种单倍型,不同单倍型间梅花鹿茸重差异均不显著(P＞0.05)。【结论】FGFR2基因的11个突变位点可能不是影响梅花鹿茸重性状的关键位点。     

梅花鹿茸水提物对脂多糖诱导的小鼠肠道炎症的保护作用

为探讨梅花鹿鲜茸水提物对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肠道炎症的保护作用，选取60只雄性成年昆明小鼠随机分为6组，即阳性对照组、阴性对照组、空白对照组、鹿茸水提物高、中、低剂量预保护处理组。阳性对照组灌胃10 mg/kg维生素C,阴性对照组与空白对照组均灌胃10 mL/kg生理盐水，鹿茸水提物高、中、低剂量预保护处理组分别灌胃200,100,50 mg/kg鹿茸水提物，连续灌胃14 d。第15天，空白对照组小鼠腹腔注射3.5 mL/kg生理盐水，其他各组小鼠腹腔注射3.5 mL/kg LPS水溶液，3 h后采集血液、解剖。采用ELISA试剂盒和荧光定量PCR法测定小鼠体内免疫因子和炎性因子的分泌量、炎性因子mRNA相对表达量及氧化应激水平。结果表明：鹿茸水提物预保护处理组的小鼠体质量显著高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);阴性对照组IL-1β和IFN-γ分泌量极显著高于空白对照组(P<0.01);与空白对照组相比，阴性对照组小鼠肝脏中NO的含量极显著升高，CAT和SOD活力极显著降低(P<0.01);与阴性对照组相比，鹿茸水提物预保护处理组NO含量极显著降低(P<0.01),SOD活力极显著升高(P<0.01);与空白对照组相比，阴性对照组LPS可引起小鼠空肠组织中IL-1β、NLRP3、NLRP1a的mRNA相对表达量的异常升高，差异极显著(P<0.01);与阴性对照组相比，鹿茸水提物预处理保护组可抑制3种炎性因子的mRNA相对表达量的异常升高，鹿茸水提物预保护处理组mRNA相对表达量与阳性对照组相近。说明鹿茸水提物可通过降低机体内炎性因子mRNA的相对表达量，减轻炎症级联反应，同时提高机体免疫水平，增强抗氧化能力，从而减轻LPS引起的肠道损伤。     

HGF及其受体c-Met基因在损伤修复的马鹿茸组织中的表达特征

为了探求鹿茸损伤修复的分子机制，本试验收集了意外折断修复50 d和65 d后的鹿茸样品，利用qRT-PCR技术和免疫组织化学技术检测HGF和c-Met基因在损伤修复的鹿茸与健康鹿茸组织中的表达。结果表明，HGF及c-Met基因在损伤茸总组织中的相对表达量显著高于健康鹿茸，在茸皮、间充质、软骨和骨四个组织中，茸皮组织相对表达量最高，间充质组织的相对表达量最低；与健康鹿茸组织相比，损伤茸茸皮组织中HGF及c-Met基因的相对表达量极显著降低(P<0.01)，而在损伤茸间充质组织中的相对表达量极显著增加(P<0.01)，损伤茸与健康茸的软骨和骨组织相对表达量差异不显著(P>0.05)。在损伤修复过程中，HGF及c-Met基因随损伤修复进程的继续表达量也随之上升。因此，HGF及c-Met基因对马鹿茸组织损伤修复及再发育可能具有促进作用。     

半乳糖凝集素1的生物学功能及其在鹿茸再生过程中的作用研究进展

半乳糖凝集素1(galectin-1,GAL-1)是一种分子质量约为14 ku的β-半乳糖苷结合蛋白,分布于许多不同类型的细胞和组织中,在细胞内外均具有广泛的生物学活性,参与调节多种生理病理过程。GAL-1以剂量依赖性和细胞特异性双向调控细胞增殖,通过血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)途径促进血管的生成,参与机体的免疫调节,诱导T细胞凋亡、抑制T细胞增殖和抗原递呈细胞活化等。此外,GAL-1被认为是多种类型肿瘤的标志物,肿瘤细胞通过分泌GAL-1促进肿瘤内的血管生成和自身免疫逃逸。鹿茸是指鹿科动物头部衍生的未骨化密生茸毛的幼角,也是在自然界哺乳动物中迄今为止发现的唯一可实现周期性完全再生的骨质附属器官。鹿茸的再生是基于鹿茸干细胞增殖的过程,GAL-1在鹿茸干细胞中表达,并且鹿茸的再生过程与GAL-1生物学功能息息相关。然而,GAL-1在鹿茸再生过程中所扮演的角色仍待深入研究。作者综述了GAL-1的结构、生物学功能及其在鹿茸再生过程中的作用,以期为GAL-1和鹿茸再生机制的研究带来新的启示。     

鹿茸美容护肤作用和应用研究进展

鹿茸为我国传统的名贵中药，具有补肾阳、益精血和强筋骨功效，同时研究发现鹿茸在皮肤修复方面有很好的作用，具有美容护肤的功效。本文通过检索相关文献归纳总结了鹿茸在美容护肤方面的研究进展以及市场开发情况，为其在美容护肤方面的应用和产品研发提供参考依据。     

1例梅花鹿异位生鹿茸样组织的结构分析

在湖北鄂州一梅花鹿养殖场中发现1头雄性梅花鹿的左眼下部长出一块疑似鹿茸角的组织，将该组织取下，分离消化培养细胞，并对细胞进行茜素红、阿利新蓝、番红固绿、TRAP染色鉴定。将取下的该组织各部位制成切片进行HE染色，在光镜下观察各部位组织的病理组织学变化。结果表明：该组织外形与鹿茸角相似，表面光滑，无分叉，内部组织分层界限明显，分层情况及特征与正常鹿茸顶端组织结构相似，但组织已经骨化，可能与取样较晚有关。     

鹿茸多肽对TBHP诱导的H9c2心肌细胞凋亡的影响

目的探讨鹿茸多肽(velvet antler peptide,VAP)预处理对叔丁基过氧化氢(TBHP)诱导H9c2大鼠心肌细胞损伤及凋亡的影响。方法采用含10%胎牛血清(FBS)培养液(DMEM)传代培养细胞7d后,将H9c2心肌细胞分为空白对照组(Blank control group)、空白血清组(Blank serum group)、TBHP组(TBHP group)、100 mg·kg^(-1)VAP低剂量含药血清组(TBHP+VAPLgroup)、400 mg·kg^(-1) VAP高剂量含药血清组(TBHP+VAPHgroup)。正常对照组不做任何处理,其余给药组给予VAP处理24h后,给予200μmol·L^(-1)TBHP处理。MTT法检测各组细胞存活率;Hochst染色法检测各组细胞凋亡情况;Western blotting法检测心肌细胞Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达水平。结果MTT检测结果表明,与TBHP组比较,VAP高和低剂量组的H9c2细胞活性升高(P<0.01)。Hoechst染色法结果显示,与空白对照组比较,TBHP组的活细胞减少;与TBHP组比较,VAP高和低剂量组的活细胞增多。Western blotting法检测结果表明,与空白对照组比较,TBHP组上调心肌细胞Bax、Caspase-3蛋白表达水平,降低Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05);与TBHP组比较,VAP高和低剂量组降低Bax、Caspase-3蛋白表达水平,升高Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05)。结论VAP含药血清预处理可保护TPHP诱导的H9c2细胞心肌损伤。通过降低心肌细胞中Caspase-3蛋白的表达或抑制其活性,增加Bcl-2蛋白的表达,降低Bax蛋白的表达,上调Bcl-2/Bax,从而抑制心肌细胞凋亡。     

基于秀丽线虫的鹿茸功效及其机制研究进展

鹿茸作为传统中医药资源，药用历史悠久，但其功效和作用机制尚不清楚。秀丽线虫（Caenorhabditis elegans）生命周期短、便于操作观察与人类基因有高度保守性，在药物高通量筛选，了解药物作用机制等方面发挥重要作用。本文综述了鹿茸活性成分及主要功效的研究进展，结合秀丽线虫在鹿茸药用成分筛选和功效研究中的应用，为鹿茸产品开发利用和产业高质量健康发展奠定基础。     

复方中草药添加剂对生茸期梅花鹿生产性能、营养物质表观消化率、鹿茸营养成分和经济效益的影响

试验旨在研究复方中草药添加剂对生茸期梅花鹿生产性能、营养物质消化率、鹿茸营养成分和经济效益的影响，为梅花鹿的生产实践提供参考。12头3岁龄、体重[（74.79±0.78）kg]相近的健康雄性梅花鹿随机分为2组（每组6头），其中对照组（SC组）饲喂基础饲粮，试验组（ST组）在基础饲粮中添加10 g/（头·d）的复方中草药添加剂，预试期7 d，正式饲喂49 d。结果表明：(1)与SC组相比，ST组的茸重显著提高了0.21 kg(P<0.05)；(2)与SC组相比，ST组的粗蛋白、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维的表观消化率显著提高（P<0.05），有机物、干物质的表观消化率显著提高（P<0.01）。(3)与SC组相比，ST组鹿茸的水分、粗蛋白、干物质含量显著提高（P<0.05），(4)与SC组相比，ST组的平均鹿茸产值显著提高（P<0.05）。综上所述，本试验条件下饲粮中添加10 g/（头·d）的复方中草药添加剂可以显著提高生茸期梅花鹿的生长性能、营养物质表观消化率、鹿茸营养成分和经济效益。