内含NDV核酸的耐核糖核酸酶病毒样颗粒作为荧光定量RT-PCR内标的制备与鉴定

为制备检测新城疫病毒的实时荧光RT-PCR病毒样颗粒内标,扩增MS2噬菌体的成熟酶蛋白和衣壳蛋白序列,将其定向插入pET32a载体的相应位置,双酶切和PCR鉴定,构建pET32a-MS2重组质粒;根据新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测的目标片段,采用化学合成和klenow酶连接技术制备内标片段,将内标片段插入pET32a-MS2重组质粒,构建pET32a-MS2-IC重组质粒,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,经RNase和DNase消化后,采用荧光RT-PCR检测耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标的含量。结果表明,制备了高表达量耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标,可用于新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立。     

锦鲤疱疹病毒GY1506株的分离鉴定

对江苏省某养殖场患病鲤鱼进行病毒分离及鉴定。现场采样发现,发病鱼体表黏液增多,眼球凹陷,背鳍和鳃部溃烂。剖检后见肝脏、肾脏、胆囊肿大,肠充血。取病鱼组织匀浆上清接种CCB细胞,14 d后可观察到细胞变圆、脱落、空泡化等典型的细胞病变。采用世界动物卫生组织(OIE)推荐的锦鲤疱疹病毒(KHV)检测引物进行PCR扩增,鳃和肠均能扩增出预期大小的特异性产物。序列分析显示,扩增序列与KHV-J毒株胸苷激酶(TK)基因核苷酸序列同源性为100%。根据TK基因序列建立系统进化树,证实该毒株为KHV亚洲型毒株,命名为KHVGY1506株。     

浙东白鹅初生体重、体尺和免疫器官的测定

浙东白鹅是我国著名的中型肉鹅地方良种,其早期生长速度快、肉质鲜嫩、抗病力强,为充分挖掘浙东白鹅的遗传潜力,对其进行产业化开发,我们进行了浙东白鹅种质测定试验。1材料和方法1.1试验材料试验鹅来自象山县种鹅场的浙东白鹅选育种群的种苗鹅。1.2试验方法浙东白鹅种苗鹅出壳     

6株牛传染性鼻气管炎病毒BICP4基因序列的同源性分析

牛传染性鼻气管炎病毒的立即早期启动基因IER4.2编码感染细胞蛋白BICP4基因。各种疱疹病毒的BICP4基因的Ⅰ，Ⅲ，Ⅴ区变异性较大，并为其特征区。为了比较分离自不同牛种，不同部位的5种病毒株BICP4蛋白I区基因的差异性，本文根据已发表的IBBV K22毒株重复序列IRs中BICP4的基因序列设计了一特异性引物，对各毒株进行PCR扩增，均得到约540bp的片段，将其克隆，测序并连同K22株进行同源性比较。结果表明，6株病毒的核苷酸序列及氨基酸序列同源性均在98%以上，说明这些毒株重复序列中的早期基因高度保守，在一定程度上也显示出IBRV的高度保守性。     

当前养鹅业的发展趋势和存在问题

鹅属草食禽类 ,养鹅业是节粮型畜牧业 ,是当前增幅最大、效益最好的畜禽养殖项目之一。1　鹅的品种资源我国鹅品种资源繁多 ,仅列入全国家禽品种志的就有 12个。由鸿雁进化来的主要有狮头鹅、皖西白鹅、雁鹅、溆浦鹅、浙东白鹅、四川白鹅、太湖鹅、豁眼鹅、乌宗鹅、酃县白鹅等。由灰雁进化来的主要有伊犁鹅等。2　鹅的生物学特性2 .1　耐粗饲　鹅为草食禽类 ,能大量利用青绿饲料和部分粗饲料。鹅的肌胃压力大 ,可达鸭的 1.5倍 ,鸡的 2倍 ,对粗纤维有较强的消化力。鹅的盲肠十分发达 ,含有较多的微生物 ,能使纤维素发酵分解成低级脂肪酸。据…     

鹅皮下气肿的发生和防治

鹅皮下气肿又称气囊破裂,多发于1～2周龄以内的鹅。如捉捕时用力粗暴、过猛,或饲养密度过大,拥挤等因素可导致气囊破裂,也可因尖锐异物刺破气囊或肱骨、胸骨等有气腔的骨骼发生骨折,使气体转移,积聚于皮下,产生病理状态的皮下气肿,或呼吸道的先天性缺陷亦可使气体溢于皮下等情况均可致此病。1临床症状患鹅颈部皮下充满气体,俗称肿脖子,有时可见胸腹部和两翅内侧膨胀,轻者只局限于颈的基部,重者可发生于全身皮下,使胸腹围增大,皮肤发红发亮,羽毛逆立,触诊皮肤紧张,叩诊时有鼓音。患病初期,患鹅有食欲,能游泳,但不能潜水,若不及时治疗,2防治措…     

大批仔鸭病毒性肝炎和鸭瘟并发病例

我县经济开发公司畜牧水产分公司肉鸭场,于4月27日进栏樱桃谷雏鸭1750只,养至5月18日,整群仔鸭上喙部出现特征性的萎缩、变形、喙边缘呈波浪状,严重的上翻。5月20日开始出现死亡,24日死亡数达到高峰,最多的一天死亡108羽,最少也有8羽,至6月6日止,总数达1034羽,死亡率达59.09％。癌状:病初病鸭鼻流水涕,继而上喙皮肤糜烂、结痂、剥离痂皮呈现溃疡面,三天以后喙便出现萎缩、变形、上翻,上喙边缘不整,呈波浪状,喙色变白,采食困难,眼流泪,眼睑周围有象戴眼镜似的黄色粘结羽     

聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定禽呼肠孤病毒

从感染禽呼肠孤病毒的细胞中,以SDS和酚提取病毒核酸,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法将分节段的核酸分开,经银染色显示,呈3-3-1-3分布,此法可用于禽呼肠孤病毒的快速检测、鉴定。同样方法未能使传染性法氏囊病毒核酸显示。