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51.
52.
【目的】探索胎牛骨骼肌卫星细胞分离、培养、鉴定及基因转染的方法。【方法】分别采用Ⅰ型胶原酶消化、Ⅰ型胶原酶与胰蛋白酶二步消化及链霉蛋白酶消化法对胎牛骨骼肌卫星细胞进行培养,比较了3种不同分离方法所得细胞数及其存活率的差异;利用差速贴壁法和Percoll密度梯度离心相结合的方法纯化骨骼肌卫星细胞,对纯化后的细胞进行myostatin基因RT-PCR以及结蛋白(Desmin)免疫细胞化学染色鉴定,最后通过电转染法对纯化的骨骼肌卫星细胞进行EGFP基因转染研究。【结果】3种消化培养方法中,以链霉蛋白酶消化法分离得到的胎牛骨骼肌卫星细胞数显著高于其它2种方法(P0.05),但细胞存活率较低(P0.05);而采用Ⅰ型胶原酶与胰蛋白酶二步消化法可以得到相对较高的细胞数及存活率。利用差速贴壁和Percoll密度梯度离心相结合的方法可以得到纯化的骨骼肌卫星细胞;电转染法适用于骨骼肌卫星细胞的基因转染。【结论】建立了胎牛骨骼肌卫星细胞分离、培养、纯化、鉴定及基因转染的方法,为通过转基因方法改良秦川牛产肉性能研究奠定了基础。 相似文献
53.
本试验选取了miR-1、miR-133、miR-24、miR-122、miR-103、miR-143、let7 7个miRNAs,旨在对其表达量及靶基因表达谱进行分析.选用4只绒山羊的背部和后腿肌肉提取RNA,反转录后,利用SYBR荧光定量PCR来检测各miRNAs的表达量,并采用靶基因指纹图谱(MTFP)技术获得各miRNAs的靶基因表达谱.结果表明,miR-NA表达量依次为:miR-1> miR-133> miR-24> let7> miR-143> miR-103> miR-122,其中miR-1和miR-133表达规律相似,且这7个miRNAs在成羊中的表达量均高于羔羊;此外,miRNAs表达量的差异还受性别影响,且miR-NA表达量与靶基因个数及其表达量之间具有相关性.对5个miRNAs的10个靶基因测序并比对,表明靶基因分别编码与信号转导、细胞周期等相关的蛋白.通过这7个miRNAs与其靶基因表达的分析,揭示了肌肉发育相关miRNAs及脂肪发育相关miRNAs在绒山羊骨骼肌中的异同,有利于绒山羊肉质基因的研究. 相似文献
54.
55.
鸭胚骨骼肌生肌调节因子MyoD1和Myf5发育性变化研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究采用Real-timePCR分析生肌调节因子MyoD1和Myf5在不同鸭品种(高邮鸭和金定鸭)胚胎期及初生早期(13、17、21、25、27日胚龄和出雏后7日龄)骨骼肌发育中的表达模式以及表达差异。结果表明,MyoD1mRNA和Myf5mRNA在两个品种鸭胸肌早期发育中表现出一致的表达规律,均呈"波浪"型;在腿肌早期发育中均呈近似"反√"型的表达趋势,在27日胚龄时表达量最低,出生后7日龄表达量又上升,但MyoD1mRNA的表达量仅有小幅增加,与27日胚龄的表达量差异不显著(P>0.05),而Myf5mRNA的表达量有大幅增加,与27日胚龄的表达量差异极显著(P<0.01),胸肌和腿肌中两基因的mRNA表达量在同一胚龄不同品种间差异均不显著。结果提示:骨骼肌中MyoD1和Myf5基因表达具有显著的时空性,但不存在品种差异,为进一步深入研究MyoD1和Myf5基因在胚胎期骨骼肌发生过程及其调控机理中的功能提供一定的理论依据。 相似文献
56.
为了探讨高原动物对高原低氧的适应机制,采用标准ATP酶测试盒对青海省(平均海拔4 000 m)16头成年牦牛心肌、骨骼肌ATP酶活性进行了测定和分析.结果:Na+ -K+ -ATP,Mg2+ -ATP,Ca2+ ATP和Ca2+-Mg2+-ATP 4种酶活性在骨骼肌线粒体中分别为3.65±1.31(μmolP/mg蛋白·h,下同),2.70士1.36,2.87±1.23和4.08士1.30;在心肌线粒体中分别为4.44±1.19,2.42士0.87,2.29±0.57和3.62±0.92;在骨骼肌组织中分别为2.02±0.80,1.54士0.36,1.69士0.91和2.02±0.96;在心肌组织中分别为1.41士0.67,1.04士0.51,1.24±0.54和1.42±0.60;骨骼肌、心肌线粒体中4种ATP酶活性均显著高于骨骼肌、心肌组织(P<0.05). 相似文献
57.
文章研究了补饲氮-氨甲酰谷氨酸(N-Carbamylglutamate,NCG,一种模拟内源性氮-乙酰谷氨酸,合成精氨酸的激活剂)提高哺乳仔猪的生长率的潜在机制。试验选取体重接近、性别相同的2组仔猪进行口服试验,每12h向日粮中分别添加0mg/kg(对照组)和50mg/kgNCG(试验组),试验期为7d。试验仔猪(n=32,BW=3kg)禁食7d并进行试验前处理。整夜禁食后,分别在0min和60min饲喂仔猪NCG和水(对照组)。之后分别在第0min和60min灌服试验组仔猪含NCG的母乳。在第60min,给仔猪灌服[3H]水浸剂量的苯丙氨酸,并在第90min宰杀,用以测定组织蛋白的合成。与对照组相比,NCG处理组的仔猪体重在7d内增加了28%(P<0.001),与禁食的仔猪相比,未禁食仔猪的背最长肌、腓肠肌、十二指肠的蛋白质合成速率均较高(P<0.001)。与对照组相比,NCG试验处理组仔猪背最长肌和腓肠肌的蛋白质合成速率分别提高了30%(P=0.05)和21%(P=0.068)。同时,补饲NCG的仔猪血浆中精氨酸和生长激素的浓度高于对照组。结果显示,补饲氮-氨甲酰谷氨酸可以提高血浆中精氨酸和生长激素水平,促进哺乳仔猪生长率和肌肉蛋白质合成的增加。 相似文献
58.
羔羊白肌病又称肌营养不良症,是饲料和母乳中缺乏微量元素硒和维生素E而引起的一种代谢障碍性疾病。特征为骨骼肌和心肌发生变性和坏死。该病以出生后数周至2个月羔羊多发,常呈地方性同群发病。1发病原因由于硒缺乏所致,在缺硒地区,羔羊发病率很高。据报道,本病常与母乳中维生素E缺乏,或硒、钴、铜和锰等微量元素缺乏有关。 相似文献
59.
玛多循化牦牛RBC,PCV,Hb及Mb的测定 总被引:5,自引:0,他引:5
对海拔 4 30 0m左右的 1 7头成年玛多牦牛和海拔 35 0 0m左右的 7头成年循化牦牛的RBC、PCV、Hb、心肌和骨骼肌Mb进行了测定 ,结果分别为 :8 60× 1 0 1 2 个 /L和 9 31× 1 0 1 2 个 /L ;0 4 7L/L±0 0 4 9L/L和 0 4 9L/L± 0 0 5 2L/L ;1 64 8g/L± 2 60g/L和 1 86 1g/L± 1 1 2 8g/L ,4 1 8 66nmol/g±5 9 99nmol/g和 30 0 0 1nmol/g± 66 68nmol/g ;338 34nmol/g± 83 91nmol/g和 2 68 36nmol/g±5 5 70nmol/g。玛多牦牛心肌Mb高于骨骼肌的Mb(P <0 0 5 ) ,较高海拔的玛多牦牛的心肌和骨骼肌的Mb含量均高于较低海拔的循化牦牛 (P <0 0 1和P <0 0 5 )。 相似文献
60.