猪HK2基因的克隆及序列分析

为克隆猪己糖激酶2基因,分析其生物功能,采用已报道的人及小鼠HK2的cDNA序列为依据,利用电脑克隆策略获得的ESTs设计引物,扩增新的猪HK2基因cDNA序列。将PCR产物克隆测序,分析获得的核苷酸序列及其编码蛋白的特性,分离的开放阅读框全长2754bp,编码917个氨基酸,与人和小鼠的核苷酸序列同源率分别为90%和87%,与人和小鼠的氨基酸序列同源率分别为96%和94%,利用生物信息学软件分析出此蛋白的理化特性并预测了其蛋白结构,为进一步开展猪HK2基因的结构功能、表达调控的相关研究奠定了基础。     

以色列野生二粒小麦与光稃野燕麦远缘杂种的分子标记鉴定

本试验采用5 srDNA间隔序列分析和SRAP标记验证以色列野生二粒小麦与光稃野燕麦远缘杂种的真实性,结果表明,引物对PⅠ/PⅡ在以色列野生二粒小麦与先稃野燕麦杂种中扩增了出父本特异带,父本的遗传物质导入了小麦基因组.经SRAP标记分析,引物对神me3-en3在该杂种中也扩增出了父本特异带,进一步证明了杂种的真实性.     

采用一种新型RNAi载体培育转基因高直链淀粉马铃薯

采用PCR技术分别克隆nos终止子、烟草axi1内含子和烟草ubi.u4启动子,亚克隆部分与马铃薯Sbe1同源、部分与Sbe2同源的融合基因SIII,构建具有“ubi.u4启动子—反向SIII—反向nos终止子—axi1内含子—正向nos终止子”结构的异源3¢端UTR反向重复序列型RNAi载体pCUSNI,采用农杆菌介导法转化马铃薯品种陇薯3号、甘农薯2号和大西洋,获得了16个转基因植株,其中14个的块茎直链淀粉含量大幅度增加,表观直链淀粉含量介于53.80%~85.33%;但随着直链淀粉含量的升高,转基因马铃薯淀粉含量下降。半定量RT-PCR分析表明,在直链淀粉含量超过80%的转基因株系中检测不到Sbe1和Sbe2基因mRNA的积累。结果表明,异源3¢端UTR反向重复序列型RNAi载体pCUSNI能够高频、高效地同时抑制马铃薯Sbe1和Sbe2基因的表达,是一个优良的RNAi载体。以载体pCUSNI为基础,再以植物的其他基因为靶,只需在pCUSNI的BamH I和Sac I位点之间插入干涉片段替换SIII即可完成载体构建,而不必构建靶标基因的反向重复序列,使载体制备迅速便捷。     

家蚕糖转运蛋曰BmST1基因的克隆与序列分析

糖转运蛋白运输葡萄糖、果糖、半乳糖、木糖等透过细胞膜为机体提供能量.根据GenBank已登陆的其他物种的糖转运蛋白序列与家蚕基因组框架图和EST序列获得家蚕同源糖转运蛋白基因BmST1.基因编码区长1 392 bp(GenBank登录号:FJ373021),编码463个氨基酸,预测蛋白分子质量为51.635 kDa.序列分析显示基因有2个外显子,含有11个跨膜结构域.RT-PCR表明该基因仅在此文所检测的家蚕丝腺中表达.     

土地利用关系法在非点源污染负荷预测中的应用

流域土地利用与非点源污染之间的关系非常密切。当流域内降雨特性近似时,基于土地利用类型－污染物负荷相关性的土地利用相关法很适合我国有限资料条件下的污染负荷预测。分析了土地利用关系法的基本原理和方法,结合在陕西黑河水库的应用实例,结果表明这种方法具有结构简单、应用方便的特点,适宜预测土地利用变化后的非点源污染负荷。     

林业企业实施森林认证行为的博弈分析

鉴于森林认证的迅速发展以及在中国的起步态势,建立林业企业实施森林认证的动力机制的囚徒困境、古诺模型及离散型贝叶斯博弈模型,对林业企业实施森林认证行为的进行博弈分析。认为对于实施森林认证的林业企业而言,其类型应属于强类型,即在林产品贸易过程中同林产品的需求者的讨价还价占据优势地位。相对而言保持强势的价格谈判姿态有利于实施森林认证的林业企业在林产品的经营过程中获取更高的利润。     

轻微至中度热应激对荷斯坦奶牛生理指标及产奶性能的影响

随机选用16头中国荷斯坦泌乳牛,研究轻微至中度热应激对其生理指标及产奶性能影响。结果表明：（1）泌乳牛在轻微热应激期（THI 74.5±1.0）的生理常数指标与非热应激期（THI 65.2±4.1）差异均不显著（P>0.05）;中度热应激期（THI 84.0±2.4）的各项生理常数指标均显著高于非热应激期（P<0.05）。从非热应激至中度热应激,THI每升高1,直肠温度上升0.04℃;从轻微至中度热应激,THI每升高1,泌乳牛的呼吸频率增加3.4次/min,脉搏增加2.6次/min。（2）在轻微和中度热应激期泌乳牛产奶量分别下降13.8%和26.9%（P<0.01）,产奶量与THI呈极显著负相关（P<0.01）（R= -0.82）,THI每上升1,产奶量下降1.9％。     

氨基酸胁迫对小麦种子幼苗生长和体内游离氨基酸水平的影响

摘 要：用赖氨酸、苏氨酸两种氨基酸单因子胁迫和两因子协同胁迫不同蛋白质含量小麦品种种子的发芽幼苗,发现5 mmol/l浓度可严重抑制根系生长,但对叶生长抑制较轻;两种氨基酸具有协同抑制作用。相比较,高蛋白含量基因型品种比低蛋白含量基因型品种可忍耐较高浓度氨基酸胁迫。HPLC方法测定胁迫植株体内游离氨基酸含量,发现胁迫氨基酸有比对照高3～10倍积累,同族氨基酸有比对照高2～3倍积累,相关氨基酸也有1～2倍积累。     

绿色农药分散剂GCL4-1的结构特征及应用性能研究

采用红外光谱、电位滴定、凝胶渗透色谱对改性木质素磺酸钠农药分散剂GCL4-1的分子结构进行了研究,结果表明,GCL4-1分子中磺酸基含量较改性前的木质素磺酸钠LS有明显提高,磺化度从改性前的1.33 mmol/g增加到1.96 mmol/g;其重均分子量为9700,数均分子量为2300。进一步研究了GCL4-1对农药水分散粒剂(WG)应用性能和药效等的影响,发现以GCL4-1作分散剂制备的WG具有良好的润湿性和崩解性,WG热贮前后的悬浮率都超过90%;WG悬浮液分散稳定性优良,2 h后的悬浮液沉淀层厚度仅为0.386 mm,颗粒粒径为7.22 μm。制得的80%烯酰吗啉WG防治黄瓜霜霉病的EC90值为58.32 mg/L,80%氟虫腈WG样品对小菜蛾的LC50值为0.5196 mg/L,室内毒力达到了国外同类制剂最好产品水平。GCL4-1的综合性能达到甚至超过Borregaard公司的Kinsperse126,是一种具有优良性价比的绿色农药分散剂。     

叶籽银杏GbMADS5基因的克隆与序列分析

MADS-box基因是一类编码转录因子的基因大家族,在植物的发育过程中具有重要作用。本研究采用RT-PCR技术从叶籽银杏（Ginkgo biloba var.epiphylla Mak.）中克隆了MADS-box基因GbMADS5。序列分析表明,该基因编码区全长为666bp,含有一个完整的开放阅读框,编码221个氨基酸残基组成的蛋白质,具有典型的植物MADS-box基因结构,编码肽链包含了MADS区、I区、K区和C末端,但该基因不具有拟南芥（Arabidopsis thaliana）AG基因的N端区域。GbMADS5基因编码的蛋白序列与其它植物的MADS-box蛋白序列有着较高的一致性,与裸子植物（Gymnospermae）的AG基因相似性最高,其中与苏铁（Cycas revolute）的同源性高达91.07%。系统发育树分析显示,GbMADS5基因属于AG亚家族基因。