用球孢白僵菌和粉拟青霉防治美国白蛾的研究

美国白蛾下树化蛹的过程为昆虫病原真菌与之接触侵染提供了有利环境。从来源于河北、北京地区的22株球孢白僵菌和2株粉拟青霉菌中,筛选出对美国白蛾高致病力的球孢白僵菌菌株FD和粉拟青霉菌株SH9-4,通过爬行接触接种的方法,测定了它们对进入下树化蛹过程的美国白蛾老熟幼虫的侵染效果。研究表明,接种144 h后,白僵菌校正致死率92.4%,LT50为87.06 h;粉拟青霉校正致死率94.9%,LT50为92.34h;受感染的老熟幼虫多在预蛹阶段死亡。同时,对生产出的白僵菌和粉拟青霉的固体菌剂,通过在树干基部施菌的方法进行了小规模的野外防治试验。结果表明,白僵菌和粉拟青霉对越冬代美国白蛾幼虫的防治效果分别为72.9%和83.5%,对第2代美国白蛾幼虫的防治效果分别为88.4%和87.0%。表明针对美国白蛾下树化蛹进行防治是用真菌防治美国白蛾可行的途径。     

三种丝孢类生防真菌孢子类疏水蛋白的含量与组分比较

比较研究了6株球孢白僵菌Beuaveria bassiana(Bb)、5株玫烟色拟青霉Paecilomyces fumosoroseus(Pf)和3株金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae(Ma)孢子类疏水蛋白(HLP)的含量和组分.结果表明HLP含量因菌种和菌株不同而呈现显著差异,其中Bb2861孢子HLP含量最高达23.4μg·mg-1,而Ma297的最低仅5.0μg.mg-1.HLP组分在三种生防真菌间差异明显,球孢白僵菌(12.0、15.0和17.5 kDa)和玫烟色拟青霉(15.0和17.5 kDa)的种内差异不明显.但是,金龟子绿僵菌的HLP组分种内差异较大,Ma2125主要包括17.0和14.5 kDa条带,Ma0201主要包括19.0和13.5 kDa,而Ma297主要条带仅为13.5 kDa.在对Bb2860不同菌体结构的比较研究中,发现其气生分生孢子、气生菌丝和液生菌丝的HLP含量分别为26.3、18.2和16.5μg.mg-1,相互间差异显著,且均含有15.0和17.5 kDa的主要条带.害虫生防真菌孢子HLP含量及组分的初步探明为研究其生物学功能与潜在应用奠定了基础.     

施麦粒提高淡紫拟青霉对大豆孢囊线虫田间防效

 田间试验了施麦粒(Wg)对淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinus菌株Ps-266(Ps)防治大豆孢囊线虫Heterodera glycines(SCN)的影响.Ps菌液(2×10⁷CFU/mL) 3000mL/hm²拌加入碎麦粒75kg播前2d,20d和40d处理土壤.播后35d和95d的SCN2龄幼虫、白雌虫和孢囊数量均显著低于Ps单用处理,而大豆产量显著提高(P≤0.05).3个Ps+Wg同剂量处理中,播前40d处理,对SCN幼虫孢囊的控制效果和大豆产量均显著高于播前2d和20d处理.由此揭示了淡紫拟青霉作为线虫生防剂的应用中,时间的提前量和辅料问题值得重视.     

青霉固体发酵产α- 半乳糖苷酶的研究

研究了碳氮比、氮源组成、含水量及发酵温度和时间对青霉N-3产α-半乳糖苷酶的影响.该菌28℃培养72 h酶活可达56.8 IU/g(干曲).     

适于玫烟色拟青霉液相发酵生产的培养基和初始接种量及pH

从美国引进对刺吸式口器害虫具侵染力的玫烟色拟青霉(Paecilomyces fumosoroseus)菌株Pfr116,用5种培养液在25 ℃下进行深层培养,以菌丝生物量作为指标筛选出了适合于工业生产的发酵液配方(w/v):食用蔗糖2%,马铃薯20%,蛋白胨0.1%,NaNO3 0.01%,KCl 0.01%,MgSO4 0.025%,MnSO4 0.005%,FeSO4 0.005%及KH2PO4 0.05%.用此培养液对Pfr116 菌株进行48 h的深层发酵,可获>20 mg/mL的干菌丝产量,与萨氏培养液的菌丝产量无显著差异.通过对液培初始接种量和pH值进行优化,确定最佳初始接种量为培养液的菌丝含量1.5 ～2.0 mg/mL,最佳初始pH值为5～7.     

不同处理及pH变化对果胶酶诱导抗病性的影响

从不同处理方法、酶液pH变化等方面对果胶酶诱导黄瓜抗黑星病效能的影响进行了研究。结果表明，在果胶酶的4种不同处理试验中，以全株表面喷雾法处理的黄瓜黄化子叶黑星病的病情指数降低最多，浓度100和200U／ml的诱导防病效果分别为56．34％和64．13％；下胚轴注射、灌根和漫种等3种处理方法的诱导抗病效果均不显著。经果胶酶诱导处理的黄瓜绿苗叶片病情明显降低，而处理叶上部的未处理叶片发病情况与相应对照差别不大。该结果表明，果胶酶诱导黄瓜绿苗抗黑星病的作用属于局部诱导。果胶酶处理次数的增加可增强其诱导抗病效果，并延长诱导抗病时间。酶液pH变化对果胶酶的诱导抗病作用影响显著，pH5．5时，2个浓度的诱导效果最好，分别为51．87％和66．42％。     

淡紫拟青霉对尖孢镰刀菌的拮抗作用与机制分析

研究表明淡紫拟青霉次生代谢物质对尖胞镰刀菌的孢子萌发与菌落生长有明显的抑制作用.淡紫拟青霉与镰刀菌活体间存在明显的营养竞争作用;淡紫拟青霉菌能产生细胞壁降解酶和蛋白或多糖性质的拮抗性物质;此活性物质存在于胞内和胞外,胞外物质和胞内提取液-1对尖胞镰刀菌孢子生成的抑制率在90%以上,粗蛋白提取液和粗多糖提取液的抑制率在73%左右,丙酮提取液抑制率最低,仅为25.42%;淡紫拟青霉抑菌活性物质主要存在于水相中;活性物质对温度耐受力较差,100℃或80℃处理30 min,基本失去活性.     

灰黄青霉CF3对马铃薯土传病原真菌的拮抗性及其促生作用

为探索灰黄青霉Penicillium griseofulvum CF3对马铃薯土传病害病原真菌立枯丝核菌Rhizoctonia solani、茄病镰刀菌Fusariumsolani、硫色镰刀菌F.sulphureum及大丽轮枝菌Verticillium dahliae的拮抗性及对马铃薯的促生作用,采用菌丝生长速率法和甜瓜种子发芽法分别研究了CF3发酵液对病原菌菌丝的抑制作用、对立枯丝核菌微菌核形成的影响及其发酵液的促生作用,并采用盆栽试验法研究了CF3孢子粉对马铃薯植株的促生作用及对抗逆性的影响.CF3发酵滤液对4株病原真菌菌丝生长的抑菌率达53％～72.1％,对立枯丝核菌微菌核的抑制率达36.8％～100％,并显著促进甜瓜种子胚根、胚轴生长.灰黄青霉孢子粉拌土和包衣接种均能促进马铃薯植株生长并增强植株的抗逆性.其中,拌土接种使马铃薯地上植株鲜重和多酚氧化酶活性较对照分别增加38.3％和9％,丙二醛含量降低28.8％.研究表明灰黄青霉CF3对连作马铃薯常见土传真菌病害有较强的生防潜力,对马铃薯具有良好的促生作用.     

一株高致病力赭绿青霉的生物学特性及杀虫活性

为明确一株高致病力赭绿青霉Penicillium ochrochloron Q-1的生防潜力,室内测试了不同营养、环境因素及常见杀菌剂、杀虫剂对菌株Q-1的影响,并采用室内毒力测定方法研究菌株Q-1对不同昆虫的毒力。结果表明：菌株Q-1对营养要求较低,最适生长和产孢培养基分别为淀粉琼脂培养基（SYA）和马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）,最适生长碳源为麦芽糖,最适产孢碳源为葡萄糖,最适生长和产孢氮源均为蛋白胨,最适生长及产孢温度为28℃,最适pH为6.0,同时菌株Q-1的孢子对紫外线具有一定的耐受力;化学农药中四螨嗪等杀虫剂对菌株Q-1生长影响较小,多菌灵、咪鲜胺等杀菌剂明显抑制菌株Q-1生长;在1×10⁷孢子/mL浓度下,菌株Q-1对棉铃虫幼虫、家蚕幼虫及柑橘全爪螨雌成螨的LT₅₀分别为4.08、21.37和28.43 h。综上,菌株Q-1生长快、产孢量高,对棉铃虫幼虫、家蚕幼虫及柑橘全爪螨雌成螨致病力高,本研究为赭绿青霉进一步开发利用提供理论依据。     

自然寄生红火蚁病原真菌的分离、鉴定及其对红火蚁的致病力

对采自广州番禺区、南沙区,惠州和深圳市等地的红火蚁Solenopsis invicta虫体进行病原菌的分离与鉴定。致病力测定发现分离物PL对红火蚁有一定致病作用。采用单孢分离法获得PL菌株,形态学鉴定该菌株为淡紫拟青霉Paecilomyces liacinus。对PL菌株的10个分离株PL01~10进行致病力测定,结果表明,经1×108孢子/ml的浓度处理后第15d,菌株PL04处理的红火蚁累计死亡率最高,为70.60%。