淡紫拟青霉T-DNA插入突变体的表型分析

研究淡紫拟青霉T-DNA插入突变体,鉴定突变体的表型特征,为淡紫拟青霉致病机制分析及致病相关的基因克隆奠定基础。PCR检测筛选的14株T-DNA插入突变体,观察和测定菌落形态,菌落生长速率,产孢量,孢子萌发率和菌丝干质量等生物学性状,并比较突变体致病力。结果表明突变体均含有beta-tubulin基因序列,T-DNA已整合进入野生型菌株20-7的基因组中。通过与野生型菌株对比,发现突变体菌落形态发生了不同程度的改变。菌落生长速率明显增大的菌株占全部菌株的85.71%,只有BN-11菌株的菌落生长速率降低。产孢量显著变大的菌株有BN-11和BN-12,为菌株总数的14.29%。孢子萌发率发生改变的菌株占78.57%。菌丝干质量发生明显增大和减少的菌株都占全部突变体的21.43%。筛选获得了1株致病力增强的突变体BN-11和11株致病力显著降低的突变体。     

蝙蝠蛾幼虫拟青霉病菌的分离与鉴定及致病力研究

从长有粉状病原物的蝙蝠蛾幼虫虫体上分离、鉴定了一种真菌,并用分离的菌进行了致病力研究.结果表明,通过侵染后幼虫表现出所分离死虫虫体的病害症状,确定该菌为拟青霉病的病原物,经鉴定为粉拟青霉Paecilomyces farinosus;不同温度下致病力表明,该病在10～25℃、感病后7d死亡率达50％以上,感病后21 d达...     

适于玫烟色拟青霉液相发酵生产的培养基和初始接种量及pH

从美国引进对刺吸式口器害虫具侵染力的玫烟色拟青霉(Paecilomyces fumosoroseus)菌株Pfr116,用5种培养液在25 ℃下进行深层培养,以菌丝生物量作为指标筛选出了适合于工业生产的发酵液配方(w/v):食用蔗糖2%,马铃薯20%,蛋白胨0.1%,NaNO3 0.01%,KCl 0.01%,MgSO4 0.025%,MnSO4 0.005%,FeSO4 0.005%及KH2PO4 0.05%.用此培养液对Pfr116 菌株进行48 h的深层发酵,可获>20 mg/mL的干菌丝产量,与萨氏培养液的菌丝产量无显著差异.通过对液培初始接种量和pH值进行优化,确定最佳初始接种量为培养液的菌丝含量1.5 ～2.0 mg/mL,最佳初始pH值为5～7.     

淡紫拟青霉发酵滤液对大豆胞囊线虫趋化性的影响

 实验室条件下,研究了大豆胞囊线虫幼虫对大豆根和根浸出液的趋化性以及淡紫拟青霉代谢产物对其趋化性的影响。结果表明,大豆胞囊线虫二龄幼虫(J₂)对大豆根存在着一定的趋化性,而淡紫拟青霉发酵滤液对J₂存在明显的驱避性。在根浸出液、真菌滤液及其混合液剂处理下,大豆胞囊线虫J₂在WA平板上靠近处理液的0~1cm区间中分布率存在极显著差异(P <0.0 1),而加样时间(液剂与线虫同时放置或提前2 4h处理)对其分布率没有显著影响。大豆幼根蘸取滤液后对线虫J₂在该区间的分布与不经处理的幼根差异显著(P <0.0 5),证明淡紫拟青霉发酵滤液可以明显地降低线虫与大豆根的亲和力,并强烈抑制线虫对大豆根的侵染。     

蓝莓采后病害病原菌分离鉴定及抑菌药剂筛选

以麻江蓝莓采后贮藏病果为试材,采用形态学、rDNA-ITS序列对比的方法,对病原菌的生物学进行鉴定,并通过离体试验的方法,研究了不同杀菌剂对蓝莓主要致病菌的室内毒力,以期为麻江蓝莓采后病害防控提供参考。结果表明:蓝莓采后腐烂病原菌菌株种类为灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、青霉(Penicillium)、拟盘多毛孢(Pestalotiopsis cocculi)、香灰菌(Xylaria sp.)、木霉菌(Trichoderma longibrachiatum)、粪壳菌纲藻(Sordariomycetes sp.),其中灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、青霉(Penicillium)、拟盘多毛孢(Pestalotiopsis cocculi)为主要致病菌。通过对青霉(Penicillium)室内毒力结果表明,10余种杀菌剂中以咪鲜胺对蓝莓采后腐烂病原菌主要致病菌蓝莓采后腐烂病原表现出较强的抑菌活性,其EC_(50)值分别为0.007 9μg·mL~(-1),推荐作为蓝莓田间防控的有效药剂。     

Pm0217F紫外诱变株间生物学特性差异研究

通过对Pm0217F菌株进行不同时间梯度的紫外诱变,得到5株不同的诱变菌株。通过对5个诱变株的菌落特征、生长速率、大孢子千分率、分生孢子不同聚集方式及虫草菌素含量等生物学特性比较,结果显示,诱变最适时间为60s,且大孢子比例高、拟青霉型产孢结构比例大的菌株生物学特性较优。     

一株高雄山虫草的分子鉴定

[目的]利用生物信息学方法初步探讨虫草属日本拟青霉的分类地位。[方法]提取日本拟青霉的基因组,并利用通用引物ITSL和ITS4采用PCR技术扩增rDNA18S-28S ITS序列。采用Clustalx1.83和MEGA5软件构建系统发育树,生物信息学比较分析确定其分类地位。[结果]PCR扩增产物为603 bp。将日本拟青霉重新命名为雪花高雄山虫草(Cordyceps takaomontana strain JLsnow)。将虫草重新分类,并对该类群及其特征进行了描述。[结论]从分子水平上说明日本拟青霉与其他虫草之间的差异,该研究为虫草属真菌的分类提供新思路。     

宛氏拟青霉提取物诱导小白菜抗低温胁迫的作用机理

为了揭示宛氏拟青霉提取物(ZNC)诱导小白菜抗低温胁迫的作用机理,本研究以黄秧小白菜为试验材料,探究叶喷不同浓度(20、30、40 ng·mL-1)ZNC对低温下小白菜生长的影响.结果表明,低温下,与清水对照相比,喷施不同浓度的ZNC均可显著提高小白菜的SPAD值、株高和地上部鲜重.ZNC还提高了小白菜叶片内超氧化物歧...     

21种植物提取物对3种柑桔病原真菌抑菌活性的初步研究

采用菌丝生长速率法测定油茶籽等21种植物甲醇提取物对柑桔青霉病菌、柑桔绿霉病菌和柑桔酸腐病菌的抑菌活性.结果表明,对柑桔酸腐病菌抑菌活性较高的是油茶籽、甘草、桃花心木和水茄提取物,以含干粉10 mg·mL-1处理后5 d抑菌率分别为96.96%、76.44%、82.73%和69.60%.对柑桔青霉病菌抑菌率达70%以上的有油茶籽、海芋、山菅兰、水茄、上海叶冬青等的提取物,对柑桔绿霉病菌抑菌率达60%以上的有油茶籽、桃花心木、侧柏、海芋、山菅兰、水茄、深山含笑等的提取物.综合而言,油茶籽甲醇浸提物对柑桔青霉病菌、柑桔绿霉病菌和柑桔酸腐病菌的抑菌活性高于其他植物的甲醇浸提物.     

三种丝孢类生防真菌孢子类疏水蛋白的含量与组分比较

比较研究了6株球孢白僵菌Beuaveria bassiana(Bb)、5株玫烟色拟青霉Paecilomyces fumosoroseus(Pf)和3株金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae(Ma)孢子类疏水蛋白(HLP)的含量和组分.结果表明HLP含量因菌种和菌株不同而呈现显著差异,其中Bb2861孢子HLP含量最高达23.4μg·mg-1,而Ma297的最低仅5.0μg.mg-1.HLP组分在三种生防真菌间差异明显,球孢白僵菌(12.0、15.0和17.5 kDa)和玫烟色拟青霉(15.0和17.5 kDa)的种内差异不明显.但是,金龟子绿僵菌的HLP组分种内差异较大,Ma2125主要包括17.0和14.5 kDa条带,Ma0201主要包括19.0和13.5 kDa,而Ma297主要条带仅为13.5 kDa.在对Bb2860不同菌体结构的比较研究中,发现其气生分生孢子、气生菌丝和液生菌丝的HLP含量分别为26.3、18.2和16.5μg.mg-1,相互间差异显著,且均含有15.0和17.5 kDa的主要条带.害虫生防真菌孢子HLP含量及组分的初步探明为研究其生物学功能与潜在应用奠定了基础.