羊口疮病毒F1L基因真核表达质粒构建及对小鼠的免疫原性

构建羊口疮病毒F1L基因的真核表达质粒,并探讨其对小鼠的免疫原性。本试验采用PCR扩增pMD18TF1L克隆质粒的F1L基因并将其克隆至pVAX1载体中,构建真核表达质粒并转染至MDBK细胞,采用RT-PCR和间接免疫荧光检测F1L基因在MDBK细胞中的转录和表达。将构建的pVAX1-F1L、pVAX1空载体、PBS对照通过后腿肌肉注射的方式免疫KM系小鼠,通过间接ELISA、MTT和FACS法对该DNA疫苗的免疫效果进行评价。结果表明,成功构建了真核表达质粒pVAX1-F1L,并能在MDBK细胞中获得较高水平的表达。免疫小鼠后诱导的特异性抗体水平、脾淋巴细胞增殖反应、CD4~+、CD8~+细胞百分比和IL-2、IFN-γ、IL-4细胞因子水平均高于pVAX1组和PBS对照组。因此,制备的重组核酸疫苗免疫小鼠后能够诱导机体产生体液免疫和细胞免疫。     

壳寡糖对小鼠生长性能、血清免疫和抗氧化指标的影响北大核心CSCD

本试验旨在研究灌胃不同剂量壳寡糖(COS)对小鼠生长性能和血清免疫球蛋白含量、细胞因子水平、抗氧化酶活性的影响。选取60只5周龄无特定病原体(SPF)级ICR雄性小鼠,随机分为6组,包括1个对照组和5个试验组,每组10只。5个试验组小鼠分别按照0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 g/kg BW的剂量灌胃COS(溶解于生理盐水),对照组灌服等体积的生理盐水。试验期6周。结果表明:1)灌胃不同剂量COS对小鼠体重无显著影响(P>0.05)。2)灌胃0.6 g/kg BW COS可显著提高小鼠胸腺指数(P<0.05),较对照组提高了32.87%。3)灌胃0.6 g/kg BW COS可显著提高小鼠血清免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白M(IgM)含量(P<0.05),较对照组分别提高了12.14%和20.69%。4)灌胃不同剂量COS对小鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1β(IL-1β)、转化生长因子-β(TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均无显著影响(P>0.05)。5)灌胃0.6 g/kg BW COS可显著提高小鼠血清中髓过氧化物酶(MPO)活性(P<0.05),较对照组提高了27.61%;灌胃0.8 g/kg BW COS可显著提高小鼠血清过氧化物酶(POD)活性(P<0.05),较对照组提高了45.08%。综上,在本试验条件下,COS可促进小鼠免疫器官发育并具有调节血清免疫和抗氧化指标的功能。     

中草药复合添加剂的小鼠急性毒性试验

为研究补气血、补肝肾中草药复合添加剂的急性毒性,试验采用灌胃法,选取SPF级昆明小鼠40只,雌雄各半,随机均分为4组（对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组）,以0.86 g/mL的中草药混悬液,每次0.4 mL/10 g灌胃,24 h内,高剂量组灌胃2次,每次0.4 mL;中剂量组灌胃2次,每次0.3 mL;对照组灌胃0.4 mL蒸馏水2次;低剂量组灌胃1次,0.2 mL。连续7 d,每天观察小鼠的精神状况和死亡情况。试验结束后,小鼠眼球采血,检测血液生理及生化指标;剖解小鼠,取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏称重,计算脏器指数,制作病理组织切片,观察各脏器病理变化。结果显示,试验期间各组小鼠未见异常;中、高剂量组小鼠体重极显著高于对照组（P<0.01）;高剂量组肝脏指数、脾脏指数均极显著高于其他组（P<0.01）;试验组小鼠白细胞总数较对照组极显著升高（P<0.01）,但仍处在正常范围内;试验组小鼠血液肌酐显著降低（P<0.05）,中剂量组尿素氮显著低于对照组（P<0.05）;各组间其他生化指标均差异不显著（P>0.05）;病理组织切片结果显示,各组肝脏、脾脏和肾脏均无任何病理变化。综上所述,中草药复合添加剂对蛋白质代谢有明显的促进作用,可提高机体免疫力和肾脏功能,其最大给药量（34.4 g/kg生药）是临床成人每天用药（0.371 g/kg）的92.7倍,证明该药物无毒性,安全性好。     

小鼠胚胎干细胞裂解液诱导鸡胚成纤维细胞发生重编程的研究

本研究采用小鼠胚胎干细胞(ESCs)裂解液与鸡胚成纤维细胞共孵育,通过形态学观察和多能性检测,旨在探讨小鼠ESCs裂解液逆转化鸡胚成纤维细胞为多能干细胞的可行性。结果表明:与小鼠ESCs裂解液共孵育的鸡胚成纤维细胞均变为圆形细胞,形成了42.33个细胞集落;经AKP染色以及Oct-4和SSEA-1免疫细胞化学染色,均呈阳性反应,表现出一定的多能干细胞特性;经核型分析表明这些细胞来源于鸡胚成纤维细胞。单独的重编程操作过程和与鸡胚成纤维细胞裂解液共孵育均无法将鸡胚成纤维细胞重编程为具有ESCs特征的细胞,说明参与重编程鸡胚成纤维细胞的物质来源于小鼠ESCs裂解液。因此,ESCs裂解液诱导体细胞重编程逆转化为多能干细胞的作用能够在小鼠和鸡之间发生。     

凋亡基因Bcl-2与Bax在小鼠发情周期、妊娠及产后子宫中的表达

细胞凋亡作为细胞的一种主动死亡方式,与机体的生长、发育、分化、衰老、死亡等有重要关系。在雌性生殖器官,如子宫、卵巢、胎盘和乳腺中均有凋亡现象,其作用机理和发生机制尚不完全明确。其中任何一个环节的凋亡发生率过高或过低,均有可能影响妊娠的正常进行,导致不孕、流产、早产等。在雌性动物的发情周期中,整个机体特别是子宫等生殖器官出现     

玉米赤霉烯酮对小鼠睾丸间质细胞线粒体的损伤作用

将不同作用时间（时间梯度组）及不同质量浓度（质量浓度梯度组）的玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEA）作用于体外培养的原代小鼠睾丸间质细胞,时间梯度组设0（对照组）、6、12、24h4个观察组,染毒质量浓度为2.5mg/L;质量浓度梯度组设0（对照组）、5、10、20mg/L ZEA 4个观察组,染毒时间为12h。采用流式细胞技术测定线粒体膜电位和透射电子显微镜观察细胞超微结构的方法观测ZEA对睾丸间质细胞线粒体的损伤作用。结果显示,睾丸间质细胞线粒体膜电位2.5mg/L ZEA暴露6h较对照组显著下降（P〈0.05）,暴露12h及24h较对照组都有极显著下降（P〈0.01）;ZEA质量浓度为5mg/L组较对照组显著下降（P〈0.05）,10mg/L组和20mg/L组较对照组都有极显著下降（P〈0.01）。细胞超微结构分析显示,线粒体的空泡化和内质网断裂的程度与ZEA的暴露存在时间-效应关系和质量浓度-效应关系。结果表明,ZEA可导致睾丸间质细胞线粒体损伤,这是ZEA抑制睾丸间质细胞分泌睾酮的一个重要原因。     

科学家首次实现线虫全神经实时成像

正"这里再也没有隐藏的变量"研究人员日前第一次在活的生物体(秀丽隐杆线虫,Caenorhabditis elegans)内对所有的神经细胞活动进行了成像。5月18日发表在《自然—方法学》杂志上的这一成就展示了神经信号是如何实时穿过生物体的。早在1986年,科学家便已经绘制了线虫全部302个神经细胞的连接图——这是第一个并且迄今为止也没有在其他任何生物体中重复实     

雄性动物繁殖障碍的表现及处理措施

1生精机能障碍 睾丸在腹腔或腹股沟内没有下降到阴囊称隐睾，是睾丸韧带异常发育引起单侧或双侧睾丸没有下降而形成。一侧性隐睾的正常睾丸有精子形成，两侧隐睾没有精子形成。睾丸、附睾都比较正常，无有效治疗方法。常见于马、猪、犬等，牛、羊、鹿较少见。     

母体铅暴露对仔鼠海马内Calsyntenin-1表达的影响

探讨母体铅暴露对仔鼠海马内钙结合蛋白-1(Calsyntenin-1,Clstn-1)表达的影响。采用自由饮水模式建立铅暴露动物模型,将40只孕小鼠,随机分为对照组和低、中、高剂量染毒组,分别饮用去离子水和1、5、10g/L的乙酸铅水溶液。仔鼠21日龄,分别测其血液和海马组织中铅的含量,然后取其海马组织,分别通过免疫组化方法和Western blot技术检测各组仔鼠海马组织中Clstn-1的蛋白表达情况。结果显示,21d仔鼠血铅、海马铅水平均明显高于对照组(P0.01);免疫组化染色结果显示,Clstn-1免疫组化阳性反应主要定位于胞浆,在仔鼠海马组织的CA1区域中,每个铅暴露组仔鼠Clstn-1免疫组化阳性反应物的面密度与对照组相比增加显著,但平均灰度值明显降低(P0.01);Western blot结果显示,与对照组相比,铅暴露组仔鼠Clstn-1蛋白的表达明显高于对照组,并随染毒剂量增加,表达量增高,差异具有统计学意义(P0.01)。母体铅暴露可能通过上调仔鼠海马内钙结合蛋白的表达进而造成海马损伤,引起神经毒性。     

藿贞散对小鼠特异性免疫力的增强作用研究

目的:探讨藿贞散对小鼠特异性免疫的增强作用,并筛选藿贞散的最佳临床使用剂量。方法:将18-20日龄体质量15-20 g昆明小鼠200只随机分成5个大组,每组40只,以确定牛血清白蛋白(BSA)对小鼠的最佳免疫剂量;每大组再分为4小组,每小组10只,雌雄各半,Ⅰ-Ⅲ组为试验组,分别用2 425 mg/kg、4 850 mg/kg和9 700 mg/kg的藿贞散拌料,Ⅳ组为空白对照组,饲喂常规饲料。连续饲喂7 d后,各大组分别用0.1μg/只、0.3μg/只、0.9μg/只、2.7μg/只和8.1μg/只剂量的BSA皮下注射,并继续用前述饲料饲喂7 d后,每只小鼠采血0.5 m L,分离血清,用间接ELISA法检测小鼠抗BSA抗体的效价。结果:BSA的接种剂量为0.3μg/只时,抗BSA抗体的OD值最高,为0.277±0.059;而在0.3μg/只BSA剂量组中,藿贞散试验组以低剂量组的抗体效价最高,为0.300±0.059。结论:BSA对小鼠的最佳免疫接种剂量为0.3μg/只,藿贞散能提高小鼠血清抗BSA抗体的效价,其最佳剂量为2 425 mg/kg。