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在当前的养猪生产中,猪链球菌病属于常发病,主要表现为败血症、脑膜炎、心内膜炎、关节炎和突然死亡,以及与其它病原一起作用引起的肺炎。虽然该病的发生比率各个场有所不同,引起该病的病原也有较大的区别,但引起该病的主要猪源型链球菌为:C群的兽 相似文献
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根据国内外报道,利用微生物发酵技术生产植酸酶,是获得大量稳定高效植酸酶的主要途径,大量高浓度的植酸酶主要存在于真菌中,但是由于黑曲霉天然菌株产植酸酶酶量低,并且直接使用成本也较高。构建基因工程菌以提高产酶量,进而进行大规模的发酵生产,已成为全球对植酸酶的研究重点。因此,有必要建立直接对植酸酶基因片段有效扩增的相关技术,优化反应条件。聚合酶链式反应(PCR)用于扩增位于两端已知序列之间的DNA区段,自Mullis在1983年建立以来,已成为分子生物学及相关领域的经典试验方法,技术本身也获得长足进步,可靠性不断提高。对PCR扩增… 相似文献
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44.
45.
提取一株猪源大肠埃希氏菌卡那霉素耐药菌株E.coliBJ96147的质粒DNA进行转化,转化子能稳定表达其全部抗生素抗性,表明E.coliBJ96147对卡那霉素(K)、庆大霉(GM)、链霉素(S)、氯霉素(C)、四环素(Tc)、复方新诺明等六种抗生素的抗性由耐药性R质粒介导;根据已发表的编码卡那霉素抗性的磷酸转移酶[APH(3′)-Ⅱ]钝化酶基因的核苷酸序列,设计合成了一对引物P1和P2,用PVR技术检测其钝化酶基因,结果该引物扩增出了预期的578bp大小的PCR产物,淫限制性内切酶HindⅢ进行酶切分析,发现产物被切成二条带,与预出现的389bp及189bp二条带相符,说明PCR可用于检测猪源大肠埃希氏菌卡霉那素磷酸转移酶[APH(3′)-Ⅱ]钝化酶基因。 相似文献
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1材料与方法
1.1材料
抗原为Eae-Stx1/2B纯化蛋白;EHEC O157标准菌株(EDL933).抗体为单抗2H9纯化腹水,蛋白浓度为4.16毫克/毫升.
1.2方法
EHEC O157检测方法的建立.抗原包被浓度和抗体工作浓度的初步选择,用PBS调整Eae-Stx1/2B纯化蛋白浓度为8、4、3、2、1、0.5、0.25、0.125、0.06微克/毫升,纵向包被1小时,封闭,洗涤,单抗从1:1000开始进行倍比稀释,横向加入各孔内,37℃反应1小时,加酶标二抗,洗涤,加底物液显色后终止,测定OD值.以OD值接近1.0,且前后稀释度出现较大变化时,该孔的包被浓度初步确定为最佳包被浓度,该孔抗体的稀释倍数为单抗的初步工作浓度.抗原的最佳包被温度和包被时间的确定.取5块酶标板,用初步确定的Eae-Stx 1/2B纯化蛋白的最佳包被浓度包被酶标板,分别于37℃0.5小时、37℃1小时、37℃2小时、37℃3小时、37℃4小时温育和4℃过夜;以初步确定的单抗工作浓度进行间接ELISA检测,测定其OD值.OD值最大最稳定的为最佳包被温度和时间. 相似文献
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50.
对川姣集团法式产仔猪舍内主要环境参数进行了时空分布规律研究。监测结果表明,哺乳母猪周围环境指标比较理想,其各种指标值为:氨气20.72(mL/m3),硫化氢气体为0.31/(mL/m3),二氧化碳996.14/(mL/m3),温度22.26℃、湿度66.16%,风速0.04 m/s;时间规律分布结果表明,舍内各时间阶段内环境参数最大平均值与最小平均值间差值较小,环境比较稳定,其值为:氨气2.33/(mL/m3)、硫化氢0.12/(mL/m3)、二氧化碳265.78/(mL/m3)、温度1.44℃、湿度7.98%、风速0.04 m/s;空间规律分布结果表明,舍内各层环境指标最大平均值与最小平均值较小,环境比较稳定,其值为:氨气2.27/(mL/m3)、硫化氢0.02/(mL/m3)、二氧化碳126.37/(mL/m3)、温度1.56℃、湿度3.17%、风速0.02 m/s。由此表明,川姣集团的法式产仔猪舍内环境调控能力好,其环境调控工艺值得借鉴与推广。 相似文献