催乳素调节绵羊睾丸间质细胞睾酮分泌机制的研究

本实验利用睾丸间质细胞体外培养方法，研究了催乳素（ＰＲＳ）对睾酮分泌调节的机制。结果表明，体外培养的绵羊睾丸间质细胞对激素的刺激在培养的前四天较敏感。ｈＣＧ依剂量关系刺激睾酮的分泌。ＰＲＬ对ｈＣＧ的刺激作用起着双相调节作用：低剂量的ＰＲＬ（１￣３０ｎｇ／ｍｌ）可以增加ｈＣＧ的刺激强度３５￣７１％，而高剂量的ＰＲＬ（１０００ｎｇ／ｍｌ）则抑制ｈＣＧ的活性４０％。当培养液中加入不同剂量的睾酮合成前体物     

lncRNA-NAS对湖羊睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及其靶基因鉴定

[目的]本文旨在探究lncRNA-NAS对湖羊睾丸间质细胞(LC)睾酮分泌的影响.[方法]利用RT-qPCR对湖羊lncRNA-NAS进行组织表达谱分析,针对lncRNA-NAS设计siRNA并将其转染睾丸间质细胞;利用ELISA、Western blot、细胞计数(CCK-8)、RT-qPCR等技术分析干扰lncRN...     

白细胞介素-1α对仔猪睾丸间质细胞睾酮分泌的影响

用体外培养的仔猪睾丸间质细胞,研究了白细胞介素－１α（ＩＬ－１α）对间质细胞睾酮分泌的影响。结果,ＩＬ－１α能抑制ｈＣＧ诱导的间质细胞分泌睾酮,其睾酮产生量随ＩＬ－１α剂量的增加及作用时间的延长而下降;用２０Ｕ／ｍＬ和５０Ｕ／ｍＬ的ＩＬ－１α作用４８ｈ,可分别抑制６０％及６５％的睾酮分泌量;但无ｈＣＧ诱导时,５０Ｕ／ｍＬ的ＩＬ－１α可使间质细胞基础睾酮的生成量增加１倍。提示睾丸内ＩＬ－１α可能通过多种途径调节间质细胞睾酮的产生。     

奶牛子宫内膜上皮细胞和间质细胞的分离、培养及鉴定

为了分离培养奶牛子宫内膜上皮细胞和间质细胞,给建立奶牛子宫内膜体外模型提供条件,研究采用胰蛋白酶和胶原酶消化法分离细胞,随后传代培养纯化细胞,并通过光镜观察和免疫细胞化学染色对其进行鉴别.结果表明:0.3%胰蛋白酶消化组织块1 h后可得到上皮细胞,纯度＞80%;上皮细胞呈多边型,核大而圆,具有细胞角蛋白免疫反应性.用0.1%胶原酶Ⅱ继续消化2 h,可得到间质细胞,纯度＞90%;间质细胞贴壁后可见梭形和多角形两种形态,免疫细胞化学染色显示这两种细胞均具有波形蛋白免疫反应性,而细胞角蛋白无免疫反应性,提示它们为来源于内膜基质的基质细胞,说明采用酶消化法能够成功地培养奶牛子宫内膜间质细胞和上皮细胞.     

弓形虫感染对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及机制研究

为探究弓形虫RH株速殖子体外感染对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响,构建了弓形虫与小鼠睾丸间质细胞共培养试验模型。将纯化后的弓形虫虫体与细胞按照0∶1、1∶5、1∶1、5∶1、10∶1、20∶1的比例共培养6 h,筛选最佳的弓形虫和细胞共培养比例。在弓形虫与细胞比例为20∶1条件下,共培养3 h、6 h、9 h和12 h,筛选最佳共培养时间。同时,使用瑞氏-吉姆萨染色液对细胞进行染色,观察共培养情况下细胞状态。培养结束,ELISA检测细胞上清的睾酮浓度,Western blot检测细胞内睾酮分泌相关蛋白StAR、CYP11A1、3β-HSD和CYP17A1的表达水平。结果表明,弓形虫与细胞共培养6 h,当弓形虫与细胞比例高于5∶1时,睾酮分泌量显著增加(P<0.05)。弓形虫与细胞比例为20∶1时,睾酮分泌量随培养时间的延长而增加,且感染组明显高于对照组(P<0.05)。染色结果发现,弓形虫1 h内即可进入MLTC-1细胞,12 h细胞内出现大量空泡,60 h左右细胞大量破裂。Western blot结果显示,共培养12 h时,感染组CYP11A1、3β-HSD和CYP17A...     

不同氧浓度下猪睾丸间质细胞转录组分析

【目的】研究不同氧浓度下猪睾丸间质细胞表达谱差异,筛选缺氧导致猪睾丸间质细胞损伤的关键基因。【方法】将猪睾丸间质细胞分为缺氧组(1%氧气,H24组)、正常组(15.75%氧气,N24组),每组3个重复,在相应条件下分别处理24 h,用CCK8法检测细胞存活率;利用转录组测序技术筛选出缺氧组和正常组睾丸间质细胞中的差异表达基因,利用DESeq 2.0软件进行差异表达基因分析,并对差异表达基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,进一步筛选与氧含量相关的调控基因。【结果】缺氧刺激24 h后,与正常组相比,缺氧组猪睾丸间质细胞存活率极显著降低(P<0.01);转录组测序共获得1 654个差异表达基因,其中1 242个基因上调,412个基因下调。GO功能富集分析发现,共获得富集条目8条,其中生物过程1条,分子功能7条;KEGG通路富集分析发现,共获得10个显著富集的信号通路,包括HIF-1信号通路、JAK-STAT信号通路和糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路等。通过GO功能和KEGG通路富集分析共获得6个与缺氧应激相关的基因,分别为信号传导及转录激活蛋白5(signal transd...     

白细胞介素-1α对睾酮合成酶P_(450)17α活性的抑制

以国家品种资源库编目入库的云南地方稻种资源 61 2 1份为材料 ,以 31个分类、形态及产量性状为基本数据研究了云南地方稻种资源的核心种质取样方案。取样方案包括分组原则、组内取样比例的确定和组内取样方法 ,分组原则为按丁颖分类体系、程王分类体系、云南稻作生态区、行政地区和单一性状分组及不分组的大随机 ;组内取样比例的确定有平方根法、对数法、遗传多样性法和简单比例法 ;组内取样采用随机法和聚类法。结果表明 ,遗传多样性指数、表型方差、表型频率方差、变异系数和表型保留比例等 5个参数可作为检验各取样方案所得的     

维生素D对发生氧化损伤的猪睾丸间质细胞保护作用的研究

为了探究维生素D对发生氧化损伤的猪睾丸间质细胞是否具有保护作用,试验利用H₂O₂使间质细胞发生氧化损伤,再利用1α,25-(OH)₂VD₃刺激间质细胞,然后检测间质细胞的活力、总抗氧化能力、过氧化氢酶活力与培养液内睾酮浓度。结果表明：与不添加H₂O₂时相比,培养液内添加500μmol/L的H₂O₂可使间质细胞活力、总抗氧化能力、过氧化氢酶活力与睾酮分泌能力极显著降低(P<0.01),500μmol/L H₂O₂可使间质细胞发生氧化损伤。当在培养液内同时添加500μmol/L的H₂O₂与100 nmol/L的1α,25-(OH)₂VD₃时,与仅添加500μmol/L的H₂O₂相比,间质细胞的活力、总抗氧化能力、过氧化氢酶活力与睾酮分泌能...     

IGF—I和hCG对山羊睾丸间质细胞分泌睾酮的影响

采用体外培养山羊睾丸间质细胞的方法,应用ＩＧＦ－１和ｈＣＧ进行不同处理,利用放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定睾酮含量,结果表明：（１）３０～４０日龄山羊睾丸间质细胞适宜作为体外培养的材料;（２）山羊睾丸间质细胞的敏感性随ｈＣＧ的重复刺激而下降;（３）ＩＧＦ－１能够促进睾酮的分泌（Ｐ〈０．０５～Ｐ〈０．０１）（４）ＩＧＦ－Ｉ和ｈＣＧ对睾酮的分泌具有协同促进作用（Ｐ〈０．０５～Ｐ〈０．０１）。