黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡相关基因表达的影响

为探讨黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡的影响,本试验通过向大鼠睾丸间质细胞的体外培养体系中添加终浓度为20μg/m L的黄芪提取液,利用荧光定量PCR技术研究黄芪对大鼠睾丸间质细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达量的影响。结果:添加终浓度为20μg/m L黄芪提取液的实验组与不添加黄芪提取液的对照组相比,间质细胞内Bax基因表达量显著降低(P0.01),Bcl-2基因表达量无显著差异,Bax/Bcl-2比值显著下降(P0.05)。结论:黄芪在一定程度上能够通过抑制凋亡基因Bax的转录,抑制大鼠睾丸间质细胞凋亡。     

IGF-Ⅰ对山羊睾丸间质细胞分泌cAMP和睾酮的影响

利用山羊睾丸间质细胞体外培养的方法,研究ＩＧＦ－Ⅰ对ｃＡＭＰ和睾酮的影响。结果表明：①ＩＧＦ－Ⅰ可使间质细胞外ｃＡＭＰ积聚能力的显著增强（Ｐ＜０．０５～Ｐ＜０．００５）。②ＩＧＦ－Ⅰ可使间质细胞分泌睾酮的能力显著增加（Ｐ＜０．０５～Ｐ＜０．０１）。③ＩＧＦ－Ⅰ可刺激山羊间质细胞经ｈＣＧ诱导睾酮分泌的显著增多（Ｐ＜０．０５～Ｐ＜０．０１）。以上结果与催乳素和白细胞介素－ｌα这些含氮激素（因子）调节睾酮分泌的机理不同。     

c-jun对体外培养仔猪睾丸间质细胞睾酮分泌的影响

本试验用c-junASODNs诱导c-jun基因发生转录后沉默,探讨原癌基因c-jun对仔猪睾酮分泌的作用及可能机制。以2~3周龄长白仔猪为研究对象,采用体外培养体系,研究c-jun对基础状态下和hCG诱导下间质细胞(Leydig cell,LC)睾酮分泌及基础状态下LC增殖及凋亡的影响。结果显示,c-junASODNs以剂量依赖性方式抑制基础状态下和hCG诱导下睾酮分泌(P0.01)及基础状态下LC增殖(P0.01),当1μmol/Lc-junASODNs时,显著抑制LC的凋亡(P0.05)。结果表明,c-jun在基础状态下还是hCG诱导下均可促进仔猪LC睾酮的分泌,这种作用与c-jun促进LC增殖和凋亡有关。     

不同分离方法对绵羊睾丸间质细胞纯度的影响

旨在探寻一种分离纯度较高的绵羊睾丸间质细胞的分离方法。试验比较了3种不同的分离方法对绵羊睾丸间质细胞纯度的影响。结果表明,机械分离结合细胞筛过滤法,不仅操作简便,而且分离出的间质细胞纯度高于90%。     

成年小鼠睾丸间质细胞的分离、鉴定及功能检测

为建立成年小鼠睾丸间质细胞分离纯化方法,并对分离纯化的睾丸间质细胞进行睾酮分泌功能检测,对成年小鼠睾丸组织进行Ⅰ型胶原酶消化、Percoll分离液密度梯度离心,分离成年小鼠睾丸间质细胞.细胞纯度用3β-羟类固醇脱氢酶(3β-hydroxy-steroid-dehydrogenase,3β-HSD)染色鉴定.将分离纯化的睾丸间质细胞进行体外培养,在基础睾酮和人绒毛膜促性腺激素(hCG)刺激培养条件下,用放射免疫分析法对培养上清中的睾酮含量进行检测.结果显示,通过该方法能获得高纯度成年小鼠睾丸间质细胞(＞95％),培养的睾丸间质细胞具有分泌基础睾酮以及对hCG刺激反应的能力.提示采用该方法对成年小鼠睾丸间质细胞进行分离纯化具有高效性、可用性,通过该方法获得的睾丸间质细胞是体外研究药物对睾酮分泌功能影响的良好模型.     

睾丸肾上腺素能受体和胆碱能受体的分布及神经递质对睾丸间质细胞增殖的影响

试验旨在研究不同发育时期小鼠睾丸肾上腺素能受体(β1AR、β2AR、β3AR、α1A、α1B和α1D)和胆碱能受体(M1、M2、M3、M4和M5)mRNA的表达,以及神经递质去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)和乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)对发育期小鼠睾丸间质细胞增殖的影响。RT-PCR结果表明,β1AR和β2AR mRNA在睾丸发育的3个时期都表达,β3AR、α1A和α1B mRNA在小鼠发育早期的睾丸表达,在成年期睾丸不表达,α1D mRNA在睾丸发育的早期不表达,成年期表达;胆碱能受体M1R、M2R、M3R和M5R mRNA在睾丸发育的3个时期都表达,而M4R mRNA主要在成年期表达。另外通过NE和Ach处理体外培养的发育期睾丸间质细胞,发现Ach处理组BrdU阳性细胞的数量明显增加(P＜0.01)。结果表明,肾上腺素能受体和胆碱能受体在小鼠睾丸的整个发育时期都表达,Ach可促进发育期小鼠睾丸间质细胞的增殖。     

牛磺酸对大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮的影响及作用机理初探

将雄性Wistar大鼠（220～250g）的睾丸间质细胞混悬液用不连续梯度（5％、30％、58％、70％）Percoll分离液分离，在细胞培养液中分别加入牛磺酸及促性腺激素（HCG）、雄烯二酮、孕酮、cAMP进行培养，用放射免疫分析方法测定作用24h后培养液中睾酮含量。结果表明，牛磺酸可使睾丸间质细胞分泌睾酮的能力显著增加；能增加HCG和cAMP诱导的睾酮分泌；能促进雄烯二酮和孕酮向睾酮的转化。牛磺酸能增加睾丸间质细胞睾酮的分泌，并可能在类固醇合成的多个环节中都起到了一定的促进作用。     

IGF-I对山羊睾丸间质细胞分泌cAMP和睾酮的影响

本实验利用山羊睾丸间质细胞体外培养的方法,研究ＩＧＦ－Ｉ对ｃＡＭＰ和睾酮的影响。结果表明：（１）ＩＧＦ－Ｉ可使间质细胞外ｃＡＭＰ积聚能力显著增强（ Ｐ＜０． ０５～ Ｐ ＜０． ００５）。（２）ＩＧＦ－Ｉ可使间质细胞分泌睾酮的能力显著增加（Ｐ＜０．０５～Ｐ＜０．０１）。（３）ＩＧＦ－Ｉ可刺激山羊间质细胞经 ｈＣＧ诱导睾酮分泌显著增多（ Ｐ＜０． ０５～ Ｐ＜０． ０１）。以上结果与催乳素和白细胞介素－１α这些含氮激素（因子）调节睾酮分泌的机理不同。     

家兔睾丸间质细胞的分离纯化及原代培养

为了研究家兔睾丸间质细胞(Leydigcell,LC)的分离纯化程序及体外生长特点,试验采用4种不同消化程序对家兔睾丸组织进行消化,percoll梯度分离出兔LC,并进行体外培养。结果表明:经4℃保存和34℃孵育,0.5mg/mLⅠ型胶原酶消化40min获得的细胞数最多,经percoll梯度分离的细胞纯度达92%;34℃、5%CO2条件下细胞生长良好,呈现梭形和不规则形2种形状。