小麦基因组DNA快速提取及SSR标记PAGE的银染检测

为了提高SSR-PCR速率,降低试验成本,以8份抗条锈小麦幼苗为材料,比较分析了两种DNA提取方法(CTAB法和SDS法)以及两种SSR标记PAGE银染法(Sanguinetti银染法和Bassam银染法).结果表明:用CTAB法和SDS法均可获得质量较好的DNA,但CTAB法花费的时间较长,提取效率低(在相同条件下SDS法提取速度约为CTAB法的2倍);Sanguinetti银染法染色背景较浅、条带清晰、分辨率高、具有较高的多态性检出率,并且在速度上优于Bassam法,仅需30多min,而Bassam银染法染色步骤烦琐,对试剂质量和水质要求均较高,且未能染色成功.     

水稻AFLP指纹银染法显带研究

以转基因水稻为材料,对AFLP指纹银染技术及实验操作中的关键技巧做了比较详尽的叙述,取得了比较理想的实验结果。     

淮南猪染色体的研究

采用微量外周血淋巴细胞培养以及核仁组成区银染色(Ag—NORs)技术,对淮南猪体细胞核型以及核仁组成区进行了研究,结果表明,淮南猪二倍体细胞染色体组成为38xy(公)或38xx(母),NF=64;细胞分裂中期银染阳性核仁组成区为1、2、3和4的频率分别为0.3659、0.2683、0.1951和0.1707,平均有2.17条染色体的核仁组成区被正染。     

山西瘦肉型猪新品系（SD—Ⅰ）系染色体银染核仁组织区核型分析

（ＳＤ—Ⅰ）系猪银染核仁组织区具有较高的稳定性。其有效银染核仁组织区的位点分布集中在１０号和８号染色体的次缢痕处。当只有一个有效银染发生时，它一定出现在１０号染色体的一条单位上。在本次试验中。仅发现一例其有效银染发生在６号染色体上。有效银染核仁组织区的数量分布在１～４之间，优势银染数目为三。认为细胞悬液保存技术不适于核仁组织区银染处理。     

红麻种质资源遗传多样性和分子鉴定技术研究Ⅰ.红麻AFLP-银染技术和种质资源指纹图谱的构建

通过摸索和优化实验条件,建立了红麻的AFLP-银染实验体系,获得了清晰的红麻种质资源AFLP指纹图谱.通常不同品种的红麻种质资源在形态特征上差异很小,但AFLP-银染技术检测到不同来源和不同品种的在红麻种质资源中存在较大的遗传差异.这一技术对红麻种质资源的鉴定和遗传多样性的检测非常有效.     

柚子红枣酸奶的发酵工艺研究

以柚子汁、红枣汁和脱脂奶粉为主要原料,以保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌1:1为发酵菌种,对柚子、红枣酸奶的发酵工艺进行研究。通过一系列单因素试验和L9(34)正交试验确定出发酵工艺的各工艺参数和酸奶的最佳配方,制成一种营养丰富、风味独特并具有保健功效的柚子、红枣酸奶。试验结果表明,该酸奶最佳配方为柚子汁添加量20%、红枣汁添加量10%,白砂糖6%,接种量7%,复合稳定剂添加量为0.9%,复合稳定剂为黄原胶、羧甲基纤维素钠、果胶1:1:1的比例,发酵温度40℃,发酵时间8 h。     

捻转血矛线虫感染性三期幼虫gst基因的筛选及抗干燥功能分析

为研究干燥作用对捻转血矛线虫L3期幼虫mRNA表达的影响,筛选并分析干燥相关表达基因,本试验利用mRNA差异显示技术得到了捻转血矛线虫干燥相关基因,通过相对荧光定量PCR验证所获基因的表达情况,并在秀丽隐杆线虫中通过RNA干扰抑制相关同源基因的表达检测干燥后复苏虫体生存率以研究基因抗干燥功能。结果显示,差异表达序列GH-U02A与已知捻转血矛线虫谷胱甘肽-S-转移酶(GST)氨基酸同源性为94%。对秀丽隐杆线虫Ce-gst-7基因进行RNA干扰后,虫体在干燥后的生存率降低,证明gst基因在线虫中有抗干燥功能。     

黑河猪核型、Ag－NOR_s及C－带研究

采用微量外周血淋巴细胞培养及银染，Ｃ－分带技术，对黑河猪的核型、银染核仁组成区（Ａｇ－ＮＯＲ_ｓ）及Ｃ－带进行了研究。结果表明，其二倍体细胞染色体组成为３８，ｘＹ（公）或３８，ＸＸ（母）；Ａｇ－ＮＯＲ，为１，２，３和４的频率分别为０．１４６１，０．６２ｌ６，０．１８５４和０．０４６９，平均有２．２１条染色体呈银染阳性，Ａｇ－ＮＯＲ_ｓ联会百分率为０．３３％。１３，１５～１８号染色体Ｃ－带多态性研究表明，１３，１５～１７号染色体同源染色体之间大一中型Ｃ－带居多，１８号中－中型，大一中型居多，１０，１６号染色体有插入Ｃ－带。     

烟草AFLP银染分析体系的建立

以14个烟草品种为试材,初步建立了适合于烟草AFLP分析的银染分析体系:烟草基因组的DNA提取采用CTAB法;地酶切连接同步进行;预扩增选用E+A和M+C引物;选择性扩增选用E+3和M+3引物;扩增产物利用6%聚丙烯酰胺凝胶电泳,后用银染法检测。采用优化的体系,20对引物组合扩增出清晰的烟草AFLP图谱。