鼠痘病毒EVM135和EVM085蛋白免疫原性及抗体中和活性的鉴定

正痘病毒属病毒的A33和H3L蛋白是其成员共有的中和抗体的两个主要靶标。为检测鼠痘病毒(ectromelia virus, ECTV)A33和H3L蛋白同源物的免疫原性及抗体中和活性,以ECTV-Moscow株基因组DNA为模板,PCR扩增A33和H3L同源基因EVM135、EVM085目的序列,分别构建pET30a-EVM135、pET30-EVM085原核表达载体,转化Rosetta感受态细胞,IPTG诱导表达,利用镍层析柱纯化并进行逐步透析复性,免疫兔制备多克隆抗体。建立间接ELISA方法测定其抗体效价分别达1∶120 000和1∶360 000,Western blot和IFA证实该多克隆抗体具有良好的特异性和反应性;ECTV病毒中和试验表明抗EVM135多克隆抗体中和效价为1∶16,而抗EVM085多克隆抗体效价为1∶128。本研究通过高效表达EVM135和EVM085蛋白,并分析其免疫原性及抗体中和活性,为深入研究痘病毒致病和免疫机理,进而快速建立其诊断方法,为猴痘防控技术措施的研究奠定基础。     

低pH诱导光合放氧33kD蛋白构象显著变化

33kD蛋白分子是高等植物光系统Ⅱ(PSⅡ)放氧侧3个外周蛋白中的一个，仅含1个色氨酸残基(W241)．CD光谱与荧光谱的研究结果表明，当溶液的pH由6．2降到2．5时，33kD蛋白的溶液构象发生明显变化，无规卷曲增加，α-螺旋和转角比例降低．这种变化对pH是可逆的，低pH下再经NBS修饰，CD光谱特征不变，但200nm处负峰的峰值降低，表明蛋白构象中的无规卷曲进一步增加。同时，33kD蛋白的柔性降低，构象变化变成对pH不可逆，表明NBS修饰W241破坏了33kD蛋白构象变化的可逆性，NBS修饰后的33kD蛋白与PSⅡ的结合专一性与修饰前相比大大降低，且不能提高重组后PSⅡ放氧活力．这些结果表明低pH是诱导33kD蛋白构象由适应光合放氧显著变化至失活的主要原因，而不是NBS修饰．结合33kD蛋白与质子的特殊关系，对低pH诱导的意义进行了讨论。     

旱直播深度和氮肥施用量对金两优33产量的影响

[目的]探索金两优33的最适播种深度和N肥施用量。[方法]采用裂区设计,研究不同N肥施用量(纯N150.0(CK)、187.5、225.0、262.5 kg/hm2)和不同直播深度(2.0(CK)、4.0、6.0 cm)对金两优33产量的影响。[结果]随着N肥施用量的增加,金两优33的有效穗数、每穗实粒数和实收产量先增加后减少,N肥施用量为225.0 kg/hm2时,有效穗数最多;N肥施用量为187.5 kg/hm2,每穗实粒数最多,实收产量最高。随着播种深度的增加,金两优33的有效穗数、成穗率、千粒重、实收产量均降低,播种深度为2.0 cm(CK)的处理分别比播种深度为4.0、6.0 cm的处理增产20.77%和257.10%。[结论]金两优33的最适播种深度为2.0 cm,最适N肥施用量为187.5 kg/hm2。     

转Bt基因棉新棉33B叶片氮素代谢特征及其化学调控潜力

新棉33B 在开花期间 ,叶片硝酸还原酶活性呈现递减趋势 ,蛋白酶活性和叶蛋白含量呈增加趋势 ,全氮、氨基酸含量与硝酸还原酶活性呈正相关。蕾期至盛花期毒蛋白含量呈马鞍形变化。缩节安系统化控处理使功能叶片硝酸还原酶、蛋白酶的活性、叶片蛋白含量、氨基酸和全氮的含量以及叶片毒蛋白的含量均有提高 ,最终提高单株结铃数和单铃重     

小麦新品种淮麦33适宜播期播量研究

为探明小麦新品种淮麦33的最佳播期和适宜播量,以半冬性小麦新品种淮麦33为研究材料,采取播期、播量两因素互作裂区试验设计,分析播期、播量互作条件下对产量及产量三要素的影响。结果表明,处理组合A2B2、A3B5产量最高,淮麦33适宜播期为10月10日左右,适宜播量为222.0kg/hm2左右。     

I群禽腺病毒间接33K-ELISA检测方法的建立

【目的】建立一种鉴别I群禽腺病毒（FAVI）灭活苗免疫和野毒感染的检测方法,为FAVI的防控与净化提供技术支撑。【方法】以FAVI 33K重组蛋白为包被抗原,筛选和优化间接ELISA的条件,建立FAVI抗体的间接33K-ELISA检测方法,检验其特异性、敏感性和重复性,并鉴别检测FAVI活病毒感染血清和灭活苗免疫血清各50份。【结果】33K重组抗原最佳包被浓度6.0 μg/mL,包被条件为37℃孵育1 h后4℃过夜,最佳封闭液为5%脱脂奶,封闭时间1.0 h;待检血清稀释度1∶100,抗原抗体最佳作用时间1.0 h;酶标二抗最佳稀释度1∶3000,作用时间45 min。优化后的间接33K-ELISA的阴、阳性临界值为0.316。其特异性、敏感性、重复性试验及鉴别检测结果表明,优化后的间接33K-ELISA具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点,且能成功鉴别FAVI感染与灭活疫苗接种。【结论】间接33K-ELISA操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性好、适于批量检测,可有效鉴别FAVI感染和灭活苗免疫接种,利于挑选出FAVI感染动物,为FAVI的防控与净化提供了新思路和新方法。     

高产稳产玉米新品种豫玉33

豫玉 3 3玉米新品种 (原名郑单 95 8) ,是由河南省农科院粮食作物研究所利用自选系郑5 8作母本 ,外引系昌 7-2 (选 )作父本杂交选育成的高产、稳产玉米单交种。 2 0 0 0年 9月通过河南省农作物品种审定委员会审定。1　特征特性该品种株型紧凑 ,产量高 ,稳产性好。在黄淮海地区夏播生育期平均 93～ 96ｄ ,株高2 49ｃｍ ,穗位高 1 0 7ｃｍ ,叶色浅绿 ,叶片窄而上冲 ,株型结构合理 ,透光性好 ,适宜密植。果穗长 1 6.5ｃｍ ,穗粗 4.8ｃｍ ,穗行数 1 4.8,行粒数3 6,果穗均匀 ,无秃尖 ,结实性好 ,子粒半马齿型 ,黄粒白轴 ,千粒重 2 78.6ｇ ,出子率…     

牛瑟氏泰勒虫P33表面蛋白基因的克隆与原核表达

本研究根据GenBank牛瑟氏泰勒虫P33表面蛋白基因设计1对引物,利用全血基因组DNA提取试剂盒提取牛瑟氏泰勒虫全血基因组DNA,PCR扩增得到了大小为786 bp的基因片断,测序分析证明,它与已报道序列的核苷酸同源性可达99%.将该基因与pET-28a(+)载体进行连接,经酶切和PCR鉴定,证明成功构建了含有目的基因片段的重组表达载体pET-28a-P33.将此质粒转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中,用IPTG进行诱导.结果证实,该基因在大肠杆菌中用IPTG诱导4 h时表达量达到高峰,表达产物为分子质量约30.3 ku的融合蛋白,其表达量占菌体总蛋白的43%,以包涵体形式存在;Western blotting试验证明,表达蛋白P33可被牛瑟氏泰勒虫阳性血清所识别,表明该融合蛋白具有较好的反应原性.     

33%二甲戊乐灵乳油的高效液相色谱分析研究

采用高效液相色谱法,使用Sun Fire TM C18不锈钢色谱柱和紫外检测器,以乙腈-水(80∶20,v/v)作为流动相,流速为1 m L/min,柱温30℃,在240 nm的波长下,对二甲戊乐灵乳油进行定量分析测定。结果表明,二甲戊乐灵的线性相关系数为0.999 9,标准偏差为0.045,变异系数为0.14%,平均回收率为99.47%。该分析方法操作简便、快速、准确,重现性好,可用于二甲戊乐灵乳油的质量控制中。     

巴西橡胶树热研7-33-97·PR107·RRIM600生理特性比较

[目的]为热研7-33-97推广提供科学依据。[方法]以3个橡胶树无性系热研7-33-97,PR107,RRIM600为试材,研究了不同品系的干胶含量,排胶初速度,堵塞指数,蔗糖,硫醇,无机磷,镁离子含量,黄色体破裂指数等生理指标。[结果]RRIM600、热研7-33-97和PR107的干胶总产量分别为538.725、26.89和409.37 g。3个品种干含依次为PR107>RRIM600>热研7-33-97。热研7-33-97蔗糖含量介于RRIM600和PR107之间。RRIM600硫醇含量较低,热研7-33-97与PR107硫醇含量较高。热研7-33-97与RRIM600无机磷含量较高。热研7-33-97镁离子含量最高。破裂指数以热研7-33-97最高,RRIM600最低。品系PR107的堵塞指数在各个阶段均明显高于热研7-33-97与RRIM600。[结论]热研7-33-97是一个较耐刺激且高产的品系。