野葛愈伤组织诱导与不定芽分化

采用MS为基本培养基，附加NAA、6-BA和IAA3种激素．诱导野葛不同外植体愈伤组织形成；再将愈伤组织接种在不同浓度6-BA的MS培养基上．分别在光照和黑暗条件下进行不定芽的诱导。结果表明．野葛幼叶、茎段和顶芽在适宜激素的诱导下均能形成愈伤组织，但不同激素组合其愈伤组织诱导率不同。幼叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA1．0mg/L．其诱导率为75％．茎段愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA3．0mg／L IAA0．2mg/L，其诱导率为70％。不同外植体形成的愈伤组织其不定芽的分化诱导率不同．茎段愈伤组织在不同浓度6-BA下均能诱导出不定芽；光照有利于芽的分化．在光培养条件下，茎段愈伤组织不定芽平均诱导率为66．7％。     

葛拟锈病菌rDNA-ITS的序列分析

分别从罹拟锈病的野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi、粉葛P.thomsonii Benth.和山葛P.montana(Lour.)Merr.获得病原物拟锈病菌(集壶菌)Synchytrium sp.的孢子囊堆,用其作材料进行了不同DNA提取方法的效果比较,同时对来自以上3种不同植物菌株的核糖体DNA(rDNA)-ITS进行了克隆和序列分析.结果表明:改良的氯化苄法提取基因组DNA的效率最高,但单孢子囊直接进行PCR扩增也可以满足ITS的克隆和分析;来源于野葛和粉葛菌株的ITS1-5.8S-ITS2分别为856 bp和907 bp,两者同源性为92%;而山葛菌株的ITS1-5.8S-ITS2为1 148 bp,与野葛和粉葛菌株的同源性分别为54%和55%.由此推断,粉葛与野葛上的菌株可能为相同种的不同变种,而山葛上的菌株为另一个种;或者3种植物上的菌株分别为3个不同的集壶菌种.     

TLC与RP-HPLC法快速测定野葛中葛根素和大豆苷

应用TLC和RP-HPLC建立野葛中葛根素和大豆苷的快速准确的测定方法.在GF254硅胶板上以乙酸乙酯、丙酮、甲苯、水(10∶8.5∶1.0∶1.7,体积比)作展开剂,上行约8 cm,采用紫外线(254 nm)-碘蒸气的硬板显色获得较好分离.RP-HPLC条件:色谱柱ZORBAX SB-C18(150 mm x4.6 mm,5μm),DAD二极管阵列检测器,检测波长250 nm,参比波长380 nm,柱温30℃,进样量5μL,流速0.6 mL/min,以乙腈-水为流动相梯度洗脱:0～9 min,乙腈、水体积比10∶90;10～19 min,乙腈、水体积比15∶85;20 ～ 30 min,乙腈、水体积比20∶80.TLC条件下葛根、葛藤、葛叶中葛根素和大豆苷薄层鉴别斑点明显,Rf值分别是0.43和0.51;RP-HPLC条件下葛属植物中5种组分能被较好分离,葛根素和大豆苷在400～800 μg/mL和112～176 μg/mL内线性关系良好,最低检测限为19.91、104.17μg/mL,主要组分葛根素平均回收率为99.86％,RSD为0.60％.     

4种地区野葛花粉活性及测定方法的比较

本研究利用TTC、I-KI和醋酸洋红染色法对湖南桃源、江西横峰、四川阿坝、湖北恩施4个地区的野葛花粉活性进行了测定,结果发现TTC法和醋酸洋红染色法比较适合野葛的花粉染色,而I-KI法则不太适合。另外,在4个地区中江西横峰的花粉活性比较高,四川阿坝的花粉活性比较低。     

PAL和4CL酶专一性抑制剂处理对野葛异黄酮生物合成的影响

采用外加代谢酶抑制剂阻断法.对PAL酶专一性抑制剂(AOA)和4EL酶专一性抑制剂(MDCA)处理后野葛愈伤异黄酮的生物合成,以及预苯酸、对羟基苯丙酮酸和对羟基苯丙乳酸的积累情况进行研究.结果表明,AOA处理虽显著抑制以苯丙氨酸为前体的异黄酮化合物的合成,但在野葛愈伤中仍有异黄酮的显著积累,说明野葛愈伤培养体系中应该存在其他黄酮生物合成途径.MDCA处理的野葛愈伤组织中,预苯酸、对羟基苯丙酮酸和对羟基苯丙乳酸发生了显著积累,表明上述物质可能为异黄酮生物合成的前体化合物.     

野葛--一物多用的蜜粉源植物

野葛(葛藤),赣南佬表叫毛葛,落叶豆科滕本植物.在土壤潮湿肥沃的地方,适应性广泛、生长迅速,赣南多专区17个县,温度在27℃以上时,一昼夜可长出60cm.野葛分布在我国南北各地的丘陵荒坡、沟洼路旁,全株伏地生长.其块根富含淀粉,可作粮食代用品,株叶应用于动物饲料,茎皮可作织布和造纸的原料,块根和种子可作中药.     

野葛愈伤组织提取物体外清除自由基活性的研究

为确定野葛愈伤组织提取物的清除自由基和抗氧化活性及开发新型天然抗氧化剂提供试验依据,采用1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH.)的有机自由基体系以及羟自由基和超氧阴离子自由基两种无机活性氧自由基体系,检测野葛愈伤组织提取物的体外清除自由基和抗氧化活性,并与野葛根提取物、葛根素、Vc和茶多酚进行对比研究。结果表明:野葛愈伤组织提取物对DPPH.自由基的清除能力较强,与野葛根提取物、茶多酚的清除能力相当,且显著优于葛根素和Vc;野葛根提取物的羟自由基(.OH)清除活性最高,茶多酚和野葛愈伤异黄酮次之,Vc对.OH的清除活性稍弱;野葛愈伤组织提取物的羟自由基清除活性随处理浓度增加而提高;野葛愈伤组织提取物、野葛根提取物和Vc均具有较强的清除O-2.能力,均显著高于葛根素和茶多酚。说明野葛愈伤组织提取物具有较强的清除自由基和抗氧化活性。     

壮药三裂叶野葛的显微鉴别研究

采用显微鉴别的方法研究壮药三裂叶野葛[Pueraria phaseoloides(Roxb.)Benth.]的组织结构和粉末显微特征,确定壮药三裂叶野葛的不同部位根、茎、叶的组织结构及根、茎叶粉末的主要显微鉴别特征,为壮药三裂叶野葛质量标准的制定提供参考依据。     

野葛

野葛[Pueraria lobata(Willd.)ohwi]是豆科(leguminosae)多年生藤本植物。野葛亦称葛藤、葛麻藤、粉葛藤、甜葛藤等。野葛在我国分布极广,除新疆、西藏未见报导外,几乎遍及全国各省区。在国外,苏联、朝鲜、日本、越南、印度、马来西亚等地也有野葛。美国曾从我国引种栽培繁殖,在饲用及保持水土上起了积极作用。