检测鸭呼肠孤病毒抗体间接ELISA方法的建立

RT—PCR扩增鸭呼肠孤病毒（Duckreovirus,DRV）的dB基因,克隆到pET-32a（＋）表达载体,再转化大肠杆菌Transetta（DE3）;含有重组质粒pET—σB的大肠杆菌经IPTG诱导,获得大小为55000的以包涵体形式表达的σB重组蛋白。Westernblotting显示,σB重组蛋白能够与兔抗DRV多抗血清特异性结合。以高亲和NI—NTA树脂在变性条件下纯化、梯度尿素复性的σB重组蛋白为包被抗原,建立了检测DRV抗体的间接ELSIA方法。分别以间接ELSIA方法和血清中和试验对DRV感染鸭血清和SPF鸭血清进行检测,两者的符合率为100％。该间接ELSIA方法对鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒和禽流感病毒阳性血清均无交叉反应。     

沈阳市犬狂犬病临床流行病学调查

众所周知,狂犬病是人畜共患传染病,是迄今为止人类病死率最高的急性传染病,其病死率高达100%。中国狂犬病发病人数连续7年呈增长态势,狂犬病死亡人数在我国法定报告传染病中始终占据首位,死亡病例数仅次于印度,属于世界上狂犬病严重流行的国家之一。笔者为了了解沈阳市犬狂犬病的流行情况和带毒情况,对全     

一例猪呼吸道病综合征的防制措施

猪呼吸道病综合征（PRDC）是由两种或两种以上的病原（细菌、病毒、支原体、环境应激等）引起的呼吸道疾病的总称。临床特点是发病速度快，体温升高、食欲不振、咳嗽、呼吸加快、眼鼻分泌物增多，病情时好时坏，死亡率可达20％。猪呼吸道疾病综合征是生长肥育猪的一种新型呼吸道疾病，该病具有多病原性的特征，病毒主要有：蓝耳病病毒（PRRSV）、圆环病病毒（PCV2）、流感病毒（SIV）、伪狂犬病毒（PRV）、猪呼吸道冠状病毒（PRCV）等；细菌主要有：副嗜血杆菌、传染性胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、链球菌等：还有支原体、弓形体、猪蛔虫等；环境因素包括NH3、H2S、CO2、温度、湿度、卫生等。猪呼吸道疾病综合征传播较广，病情严重，也较难控制，如不及时控制，可造成猪只的大批死亡．损失严重。现将一起典型的病例介绍如下。     

如何加强狂犬病的预防

狂犬病是一种由狂犬病毒引起的人兽共患急性传染病。一旦发病,死亡率可高达100％。狂犬病的潜伏期可以从几天至数年,病程进展迅速,患者表现出特有的怕水症状(因此又称“恐水症”),一般一周内患者即痛苦地死亡。     

猪囊尾蚴头节单链抗体-PE40重组蛋白的表达及抗虫活性分析

将含有抗猪囊尾蚴头节单链抗体基因（ScFv）和绿脓杆菌外毒素基因（PE40）的重组质粒pET28．ScFv-PE40转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导,表达产物通过SDS-PAGE和westernblot鉴定,其表达蛋白的相对分子量约为68ku,表达量约占菌体总蛋白的13．8％。将融合蛋白通过金属Ni2^＋亲和层析柱纯化后,目的蛋白纯度在95％以上,可溶性蛋白的回收率约为50％,回收量为5mg／L。本研究所进行的纯化重组蛋白的体外杀伤六钧蚴试验表明,重组蛋白对六钩蚴具有较强的杀灭作用,而且与其剂量呈正相关性。     

犬猫常见人畜共患疾病防治

1狂犬病1.1症状狂犬病是由狂犬病毒所致的人畜共患急性传染病。该病流行广,病死率几乎为100%。人的狂犬病通常由病兽以咬伤的方式传给人。人患病表现为恐水、恐声、怕风,恐惧不安、咽肌痉挛、进行性瘫痪等。狂犬病临床分四期:即潜伏期、前驱期、兴奋期、昏迷期。1.2预防及治疗1.2.1预防狂犬病的主要传     

用裁截的E2重组蛋白作为抗原建立ELISA检测猪瘟病毒抗体

猪瘟 ( CSF)是猪的一种传染性致死性疫病 ,该病在家猪群和野猪群中流行传播 ,造成地方流行性感染。猪瘟病毒 ( CSFV)是黄病毒科瘟病毒属成员之一 ,本属中还有另 2种具有经济重要性的病毒 :边界病病毒 ( BDV)和牛病毒性腹泻病毒( BVDV)。瘟病毒属成员在结构上和抗原性上密切相关。 CSFV的基因组为长约 1 2 .3kb的正极性RNA,其编码为单一多蛋白 ,形成成熟的病毒蛋白。CSFV感染后 ,在猪体内产生抗结构蛋白 E2 、Erns及非结构蛋白 NS3抗体。囊膜糖蛋白 E2 是CSFV最具免疫原性的蛋白。为在无疫区进行CSF监测 ,或开展 CSF扑灭计划…     

表达幽门螺杆菌外膜蛋白的重组耻垢分枝杆菌疫苗菌对小鼠的免疫保护作用

为研究含pLAO的重组耻垢分枝杆菌疫苗(Recombinant Mycobacterium smegmatis,rM.S)对小鼠的保护作用。将重组耻垢分枝杆菌疫苗pLAO(MS)2×107灌胃免疫接种BALB/c小鼠,同时设PBS组、耻垢分枝杆菌空菌组,免疫4周后,各组处死一批小鼠,取胃组织待用;余下的小鼠用幽门螺杆菌标准株(Helicobacter pylori SS1,Hp SS1)攻击2次,4周后处死小鼠,进行胃组织快速尿素酶试验、Hp培养、炎症程度及其炎症活动度评分,以评价疫苗对胃黏膜Hp感染的免疫保护作用,ELISA检测Hp特异性血清IgG和IgA水平。结果表明疫苗组Hp定植评分均明显低于PBS组和空菌组,疫苗组不仅可以降低Hp的定植,而且能减轻Hp造成的小鼠胃黏膜的局部慢性炎症反应。免疫后BALB/c小鼠特异性抗体显示rM.S疫苗诱导的Hp特异性血清IgG、IgA水平都升高。因此rM.S疫苗经灌胃接种BLAB/c小鼠能降低Hp定植,减轻胃黏膜的炎症反应,对Hp感染有明显的预防保护作用。     

伪狂犬病间接ELISA方法的探索

伪狂犬病（Pseudorabies,PR）是由疱疹病毒科的伪狂犬病毒引起的一种急性传染病,在世界各地广泛流行.在我国,本病对猪的危害很严重,引起仔猪的高发病率,成年猪症状轻微,常呈现隐性带毒,成为新的传染源,用血清学方法检测动物血清中伪狂犬病病毒抗体,在伪狂犬病的诊断和流行病学调查及疫苗的免疫效果上有一定意义.为了有效控制和消灭此病,急需快速、准确、敏感性高、特异性强、便于广泛推广应用的诊断方法和疫苗免疫效果的检测方法.本实验试图建立一种以ELISA试剂盒形式能检查出猪血清中伪狂犬病病毒抗体的方法,以便进一步调查猪伪狂犬病的流行情况和疫苗的免疫效果.