全文获取类型
收费全文 | 39174篇 |
免费 | 1175篇 |
国内免费 | 4000篇 |
专业分类
林业 | 752篇 |
农学 | 4786篇 |
基础科学 | 57篇 |
1743篇 | |
综合类 | 16578篇 |
农作物 | 2919篇 |
水产渔业 | 1276篇 |
畜牧兽医 | 13536篇 |
园艺 | 1560篇 |
植物保护 | 1142篇 |
出版年
2024年 | 456篇 |
2023年 | 1444篇 |
2022年 | 1784篇 |
2021年 | 1825篇 |
2020年 | 1465篇 |
2019年 | 1688篇 |
2018年 | 864篇 |
2017年 | 1261篇 |
2016年 | 1524篇 |
2015年 | 1542篇 |
2014年 | 1737篇 |
2013年 | 1771篇 |
2012年 | 2635篇 |
2011年 | 2637篇 |
2010年 | 2545篇 |
2009年 | 2656篇 |
2008年 | 2615篇 |
2007年 | 2143篇 |
2006年 | 1783篇 |
2005年 | 1651篇 |
2004年 | 1381篇 |
2003年 | 1269篇 |
2002年 | 851篇 |
2001年 | 900篇 |
2000年 | 667篇 |
1999年 | 549篇 |
1998年 | 411篇 |
1997年 | 322篇 |
1996年 | 347篇 |
1995年 | 300篇 |
1994年 | 298篇 |
1993年 | 238篇 |
1992年 | 225篇 |
1991年 | 193篇 |
1990年 | 121篇 |
1989年 | 119篇 |
1988年 | 39篇 |
1987年 | 31篇 |
1986年 | 19篇 |
1985年 | 14篇 |
1984年 | 3篇 |
1983年 | 3篇 |
1982年 | 2篇 |
1981年 | 5篇 |
1980年 | 1篇 |
1963年 | 7篇 |
1955年 | 8篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 15 毫秒
101.
通过染色体整合β-1,4-葡聚糖酶基因glu14提高绿色木霉对小麦纹枯病的防治效果 总被引:2,自引:0,他引:2
绿色木霉LTR-2是生物防治菌株。利用来自巨大芽胞杆菌Ap25的β-1,4-葡聚糖酶基因glu14构建木霉表达载体pSilent/glu14,利用限制性内切酶介导法(REMI)转化绿色木霉LTR-2。PCR扩增及Southern杂交证实目的基因已插入木霉转化子的染色体DNA上。转化子的β-1,4-葡聚糖酶水解活性,对小麦纹枯病菌的平板抑制作用及温室防治效果较原始菌株LTR-2明显提高(P<0.01),其中转化子L-10的效果最好,平板抑制率比LTR-2提高了27.0%,温室防治效果比LTR-2提高了26.7%。本试验表明,利用REMI技术,将β-1,4-葡聚糖酶基因重组到木霉染色体DNA上,是获得高效木霉工程菌株的有效手段。 相似文献
102.
103.
《青海畜牧兽医杂志》2021,51(5)
CLOCK(Circadian locomotor output cycles kaput)是生物钟家族重要的核心基因之一,本实验提取了母牦牛的下丘脑、心、肝、脾、肺、肾、卵巢和肌肉8种组织,应用实时定量荧光PCR技术对青海高原母牦牛的八种组织中提取的RNA进行了CLOCK基因表达分析。结果显示:CLOCK基因的在八种不同的组织中均有表达,但存在差异,其中肝脏的表达量显著高于牦牛下丘脑、心脏、脾脏、肺脏、肾脏、卵巢和肌肉。 相似文献
104.
105.
106.
为研究简单异尖线虫肌钙蛋白类过敏原的免疫特性,本研究提取了线虫总RNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增肌钙蛋白类过敏原(Anis1)基因,克隆入pMD18-T载体,测序正确后将anis1基因亚克隆入带有组氨酸标签的表达载体pET-30a,转入大肠杆菌BL21中,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导,表达目的蛋白。通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,融合蛋白采用Western blotting分析。将纯化的Anis1重组蛋白免疫小鼠,分离血清,ELISA检测不同时期血清抗体效价。酶切和DNA测序结果显示重组质粒构建成功,并诱导出重组Anis1蛋白,重组蛋白经Western blotting分析证实为目的蛋白,纯化蛋白Anis1免疫小鼠后,与对照组相比,能产生较高的抗体水平。Western blotting分析显示,重组蛋白Anis1能被免疫血清识别,说明简单异尖线虫重组蛋白Anis1具有较好的免疫原性和免疫反应性。 相似文献
107.
1为什么新城疫病毒非常稳定而禽流感病毒确非常多变?这是由病毒的结构本身昕决定的、新城疫病毒的基因只包括一个RNA片断,而禽流感病毒的基因则包括有8个RNA片断,禽流感病毒多个RNA片断所构成的基因使得该病毒非常多变: 相似文献
108.
禽流感病毒核蛋白基因在重组杆状病毒中的表达 总被引:8,自引:3,他引:8
利用RT-PCR方法成功地扩增了我国禽流感病毒分离株A/Xingjiang/1/96(H14N5)的核蛋白(NP)基因,其限制性内切酶图谱和核苷酸序列与鸭源的标准H14N5毒株几乎完全一致,与其它毒株则有较大差异,说明该鸡源分离株与鸭源毒株有非常近的亲缘关系。将NP基因定向克隆到杆状病毒转移载体pVL1393中,再与杆状病毒线性DNA(BAC-N-BlueDNA)共转染于Sf9昆虫细胞中,经过三次蚀斑筛选,获得重组病毒rB2。用其细胞表达产物裂解后作SDS-PAGE蛋白电泳、Western-blot和dot-ELISA,结果表明NP基因在杆状病毒系统中获得了表达。同时用表达产物作琼脂扩散试验,结果表明表达产物与现行标准禽流感琼扩抗原具有相同的生物学活性。 相似文献
109.
110.
PRRSV SX-1株的分离与NSP2和ORF5基因的克隆及变异分析 总被引:1,自引:0,他引:1
从山东莘县恒顺猪场发病猪群中分离到PRRSV病毒(SX—1株)。用RT—PCR法对该分离株的NSP2和ORF5基因进行了扩增和克隆,并对其进行核苷酸序列测定和分析。结果表明,PRRSVSX-1株的NSP2发生30个氨基酸的不连续缺失,缺失位置与JXA1毒株相同;ORF5基因与JXA1、CH-1a、VR2332核苷酸同源性分别为98.8%、94.9%、88.9%,氨基酸同源性分别为99.0%、93%、87.5%。基因系统发育树分析结果显示,SX-1与JXA1、HUN株的亲缘关系很近,与CH-1a亲缘关系较近,与VR2332、CC-1、RespPRRS/ReproMLV等毒株处于不同分支。 相似文献