烟草NbbZIP28突变体的创建及其对病毒侵染胁迫的响应

【目的】bZIP类转录因子参与植物的生长发育、激素信号、抗病性及抗逆性等多种生物胁迫过程。前期研究表明黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)或烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)侵染本氏烟(Nicotiana benthamiana)上调内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERs）因子NbbZIP28;NbbZIP28沉默导致病毒积累量上升,本研究旨在验证NbbZIP28对病毒侵染胁迫的响应机制。【方法】通过CRISPR/Cas9基因编辑技术和烟草遗传转染创建NbbZIP28基因突变植株,以野生型植株为对照,分别浸润接种侵染性克隆TMV-GFP、摩擦接种TMV-GFP或CMV接种液,检测突变体植株对病毒侵染胁迫的敏感性变化,接种CMV后0-48 h,采用qRT-PCR检测内质网应激相关的未折叠蛋白反应（unfolded protein response,UPR)基因的表达。本氏烟接种TMV 24 h、接种CMV 48 h后,在接种叶上浸润融合蛋白NbbZIP28-GFP,瞬时表达48 h后,采用Western blot检测病毒诱导NbbZIP28蛋白的水解激活;采用在线搜索工具PlantCARE分析NbbZIP28启动子区域中参与防卫和应激反应的顺式作用元件。【结果】CRISPR/Cas9定点敲除NbbZIP28后,目的基因靶位点缺失了10个碱基,导致翻译错误、蛋白功能变化。在正常生长条件下,转基因阳性植株与野生型无显著的表型差异。植株接种TMV-GFP后4-8 d,突变体中的病毒浸润斑亮度或初侵染点数目均显著高于野生型,扩展至新叶的速度较快。接种CMV后12-48 h,突变体中UPR相关基因BiP、PDI、CAM及NbbZIP28下游基因NF-YC2的表达量显著低于野生型;5-7 d突变体中的病毒外壳蛋白（coat protein,CP）基因表达量显著高于野生型,花叶及皱缩症状更显著。蛋白质序列比对分析显示NbbZIP28具有与拟南芥AtbZIP28相同的S1P和S2P蛋白酶水解位点。Western blot检测发现,与接种清水对照相比,TMV或CMV侵染显著促进了全长的融合蛋白NbbZIP28-GFP在S1P和S2P位点发生裂解。NbbZIP28启动子序列中包含5个参与热应激反应的顺式作用元件（heat stress response element,HSE）、3个参与低温反应的顺式作用元件（low temperature response element,LTR）、1个参与防卫和应激反应的顺式作用元件（TC-rich repeats）。【结论】病毒侵染促进NbbZIP28的水解激活并上调相关的UPR基因;NbbZIP28敲除导致植株对病毒的敏感性上升,病毒诱导的UPR基因表达被抑制。NbbZIP28为病毒侵染胁迫下的UPR调控因子,在病毒侵染早期通过上调UPR信号和提高寄主基础防卫反应而延缓病毒的侵染和增殖。     

优质高产花生新品种阜花28的选育

为丰富高产型花生种质资源,辽宁省沙地治理与利用研究所通过选育实验,培育优质高产花生新品种阜花28,分别从植物学、生物学特征,籽粒品种,抗病性,产量表现等方面进行数据分析,得出该品种具有荚果均匀,商品性状好,蛋白、脂肪含量中等优势。在育种上可以作为新的优异种质材料加以利用;在生产上可以满足市场对于优质高产花生品种的需要,综合性状优良,推广应用前景广阔。     

鸡D28k钙结合蛋白cDNA的克隆与序列分析

根据已发表的鸡D28k钙结合蛋白(CaBP—D28k)基因序列设计合成1对引物,利用RT—PCR技术从新扬州鸡小肠组织RNA中扩增出鸡CaBP—D28k cDNA,并克隆至pGEM—T中,经PCR、XhoⅠ和BamHⅠ双酶切鉴定测序后,用DNAStar软件对克隆出的cDNA进行同源性分析。结果表明：新扬州鸡CaBP—D28k基因片断长为18．5kb,与GenBank中的CaBP—D28k基因具有高度的同源性(99．2％),在开发阅读框内仅有一个碱基的差别,中间没有出现缺失和插入,证明所得到的是鸡CaBP—D28k cDNA。     

两系优质杂交晚稻奥两优28高产保纯制种技术

介绍了两系优质高档食用型杂交稻奥两优28双亲的特征特性．对花期预测技术进行了探索,提出了其高产保纯制种技术。     

荧光增白剂FB28对甜菜夜蛾围食膜形态的影响

用含有不同浓度荧光增白剂FB28的饲料饲喂5龄甜菜夜蛾幼虫,解剖取其围食膜,观察荧光增白剂FB28对围食膜的破坏状况。结果表明,1％荧光增白剂FB28处理6h时,甜菜夜蛾围食膜部分降解;0．1％荧光增白剂FB28处理6h时,甜菜夜蛾围食膜仪有微量食物外渗,处理10h时,围食膜降解,食物与围食膜混在一起。说明1％荧光增白剂FB28对甜菜夜蛾围食膜的破坏能力强于0．1％荧光增白剂FB28。     

糯稻新品系“28-06”特征特性与优质高产栽培技术

优质糯稻品系＂28-06＂适宜直播,其形态特征和抗病性较好,且米质及适口性优良,为促进其推广应用,介绍了该品系的高产栽培所需的播期确定、基本苗控制和肥水运筹等要点。     

粳稻品种垦育28号的选育与应用

为了培育优质、高产水稻新品种,河北省农林科学院滨海农业研究所以冀粳14号为母本、垦育12号为父本杂交,再经回交,对其杂交后代定向选育,2000年获得优异稳定品系,2004年通过河北省农作物品种审定委员会审定,定名为垦育28号。该品种适于旱育秧、工厂化育秧及节水栽培技术,秧田播种量为1 200～1 800 kg/hm2。施肥应注意前重后轻,施肥量为纯氮225.0～262.5 kg/hm2。注意N、P、K合理配合以及病虫害的防治,盐碱地施锌肥20.0 kg/hm2,以防缩苗。     

早熟粳稻三系不育系早秀28A的选育

摘要：早秀28A是以BT型不育系秀水110A作母本、秀水128早熟突变体作父本连续回交转育而成的粳稻三系不育系,具有败育彻底、早熟,早播可提早抽穗的特性。介绍该不育系的选育过程和主要特征特性。     

超级稻楚粳28号特征特性及高产栽培

楚粳28号是云南省楚雄州农业科学研究推广所水稻育种栽培站,以楚粳26号为母本,96Y-6为父本杂交选育而成的常规粳稻品种,2007年通过云南省农作物品种审定委员会审定,审定编号为：滇审稻200722,2010年获国家植物新品种权,2012年被农业部确认为超级稻品种。楚粳28号抗性好、适应性广、产量高、品质优,是目前云南省种植面积最大、推广速度最快的主栽品种。     

麻风树JcHDZ28基因克隆与功能分析

HD-Zip家族基因与植物的生长和对环境胁迫的抗性密切相关,被认为是作物改良的关键因子。在本研究中,我们通过RT-PCR技术从麻风树中克隆了1个HD-Zip家族基因,命名为JcHDZ28。JcHDZ28基因包含1个882 bp的开放阅读框,编码1个含有293个氨基酸的蛋白质。氨基酸序列分析结果表明,JcHDZ28含有高度保守的同源结构域和亮氨酸拉链(LZ)基序。表达模式分析结果表明,JcHDZ28基因在种子中的相对表达量最高,且盐胁迫下调该基因的表达。亚细胞定位分析结果表明,JcHDZ28基因编码1个核定位蛋白。过表达JcHDZ28基因增加了转基因拟南芥对盐胁迫的敏感性,且在盐胁迫条件下,转JcHDZ28基因拟南芥叶片脯氨酸含量显著低于野生型拟南芥,相对电导率显著高于野生型拟南芥,非生物胁迫相关基因在转JcHDZ28基因拟南芥中的表达也显著低于在野生型拟南芥中的表达。本研究结果可以为进一步阐明HD-Zip转录因子基因JcHDZ28在麻风树生长发育和响应非生物胁迫中的功能提供理论依据。