人参皂苷Rh2通过激活Akt和Erk通路促进神经分化

目的研究人参皂苷Rh2的促神经分化作用,初步明确相关分子机制。方法将细胞分为对照组、实验组,使用MTT检测Rh2对细胞毒性的影响,筛选最适药物浓度,用倒置相差显微镜观察拍照,使用Image-J软件对照片进行细胞分化率和神经突起长度统计分析,用Western Blotting检测其促神经分化所激活的信号通路,之后用相关通路抑制剂加以干预,检测神经突起长度、分化率和相关通路的蛋白表达变化。结果人参皂苷Rh2浓度在2~6μM不影响细胞存活,能够促进神经分化,随剂量依赖性增加,其中6μM的效果最显著,其通过激活PI3K/Akt、MEK/Erk发挥作用,其中p-Akt和p-Erk在30 min表达最明显,Rh2可以降低由于PI3K/Akt、MEK/Erk抑制剂所致p-Akt、p-Erk抑制的效果。结论人参皂苷Rh2促进神经突起生长、增加和延长,具有较好促进神经分化的效果,具有开发为治疗神经退行性疾病的潜力。     

通过Forskolin将小鼠成纤维细胞重编程为神经元试验

为了给临床神经退行性疾病治疗提供有应用价值的方法、突破试验不能转化为临床这一瓶颈，试验通过使用单一小分子化合物Forskolin调控小鼠成纤维细胞命运的方法，使其重编程为神经元，并进行了RT-qPCR、免疫荧光检测。结果表明：经诱导后的神经元表现出典型的神经元形态；RT-qPCR结果显示神经元相关基因表达上调，成纤维相关基因表达下调；免疫荧光结果显示，诱导神经元的神经元相关蛋白TUJ1、MAP2的表达呈阳性。说明使用Forskolin替代转录因子在体外可以实现将小鼠成纤维细胞直接重编程为神经元，应用此成果可在临床治疗上避免外来遗传物介入导致的致瘤致病风险。