近交系五指山小型猪心脏的解剖学研究

利用大体解剖学方法对20头不同月龄近交系五指山小型猪心脏的解剖特点进行细致观察并测量，获得了心脏的有关解剖数据。结果表明：2和4月龄近交系五指山小型猪心脏的大体形态、腔室划分和内部结构是相同的，而且与人的基本一致，但心脏的大小和某些解剖学常数与成年人有明显差异，心基部各血管的直径与其它地方猪种和人的相比也有明显不同。本研究通过对心脏的解剖，为近交系五指山小型猪用于比较医学和临床器官移植提供了基础资料。     

中国农科院育成国际领先水平小型猪近交系

<正>中国农业科学院北京畜牧兽医研究所冯书堂研究员主持完成的国际首例小型猪近交系研究,在用于人类疾病模型研究、新药临床前评价、食品安全评价、异种器官移植、疫苗研制等医学领域取得突破性进展,经专家鉴定,该成果在同类研究中居国际领先水平。据介绍,科研团队历经10年,以2头五指山猪为系祖培育的近交群体为材料,利用"仔配母、兄妹全同胞"近亲繁殖等综合技术措施,攻克了猪近交后代畸形率高、弱仔率高、成活率低的难题,组建了第20代至第23代近交系群体,第23代近交系数已高达0.993,标志着世界首例近交系猪育成,并被《每日科学》认为是一     

要闻

<正>国际首例小型猪近交系育成中国农业科学院北京畜牧兽医研究所研究员冯书堂,主持完成的国际首例小型猪近交系研究,在用于人类疾病模型研究、新药临床前评价、食品安全评价、异种器官移植、疫苗研制等医学领域取得突破性进展,经专家鉴定,     

版纳微型猪近交系FABP4基因编码区序列扩增及生物信息学分析

以GenBank中登载的普通猪FABP4基因为参考序列,设计特异性引物,采用RT-PCR技术从版纳微型猪近交系卵巢组织中扩增FABP4基因的编码区序列,经直接测序后采用生物信息学软件对编码区序列和蛋白质结构进行生物信息学分析和结构预测.结果表明:版纳微型猪近交系(BMI)FABP4基因编码区序列长399bp,编码132个氨基酸;BMI FABP4基因同普通猪比对同源性为100%,未发现碱基突变;生物信息学分析表明不同物种FABP4基因编码区核苷酸序列与氨基酸序列具有较高的保守性;蛋白结构预测显示,FABP4蛋白空间结构为由2个α螺旋和10个反向平行的β折叠围成的桶状结构.     

甘蓝型油菜（Brassica napus L.）RIL群体抗倒伏及其相关性状的QTL分析

油菜倒伏严重影响了油菜的产量和品质,为了定位甘蓝型油菜（Brassica napus L.）与抗倒伏性状相关的QTL,用抗倒伏品系浙平1号和易倒伏品系高芥1号组合重组自交系（RIL）家系为材料,通过两年两点试验,对该RIL群体的F2:6和F2:7家系抗压力性状进行了QTL分析,并应用一年两点数据对该群体F2:6家系结角层性状进行了QTL分析。结果表明,在4个试验中共检测到11个家系抗压力QTL,可解释4.41%～52.64%的表型变异,LOD值范围是2.68～26.58。其中qRP16-1可以在3个不同的试验中（南京-2012、溧水-2012和南京-2013）重复检测到,qRP1、qRP4和qRP8-1同时在2个不同的试验中（溧水-2012和溧水-2013）重复检测到。qRP2-1、qRP2-2、qRP8-2、qRP8-3、qRP16-2、qRP3和qRP8-4等7个QTL只能在特定的试验中检测到。同一地点不同年份间家系抗压力性状QTL相对同一年份不同地点间易被重复检测到。在2个试验中共检测到2个结角层厚度QTL,位于第15连锁群的qTPL15在2个试验中重复检测到。     

近交系大鼠STR复合扩增DNA多态性的分析

实验从已筛选出的近交系大鼠的 2 0个基因座位点中 6个位点 ,合成 6对引物 ,利用聚合酶链反应 (PCR)扩增技术对国内已知的SHR、SHRSP、L EW、RCS、WKY和 F3 44等 6个近交系大鼠各 4只进行了 DNA多态性的分析。结果表明同一品系不同个体之间没有多态性 ;不同品系个体之间具有显著多态性 ;利用这6个特异性的位点对国内 6种常用近交系大鼠可有效地进行遗传背景的鉴别。该方法能有效地对近交系与杂交系、品系与品系、品系与亚系加以区分 ,并大大地提高了其监测效率。因此 ,本实验为实验动物遗传背景的监测提供一个高效快捷、简便准确的方法     

成年版纳微型猪近交系克隆猪的制备

本研究以版纳微型猪近交系成年母猪为材料,采用冷胰酶消化法获得成年猪成纤维细胞后,进行细胞的生物学特征检测,研究其作为供体细胞对体细胞核移植效果的影响。结果表明,版纳微型猪近交系成年猪的成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态,细胞冻存前和复苏后存活率分别为97.2%和92.6%(P>0.05),生长曲线呈"S"形,细胞群体倍增时间为36h,体外培养14代后仍能保持正常核型。以其作为核移植供体细胞,核移植重构胚卵裂率、囊胚率及囊胚细胞数分别为61.9%、13.0%和37枚,移植了重构胚的3头代孕母猪均妊娠,并且有1头母猪产下1头正常的克隆猪。综上所述,利用版纳微型猪近交系成年猪能建立稳定的成纤维细胞系,该细胞系作为核移植供体细胞可获得版纳微型猪近交系克隆猪。     

猪睾丸表达序列37 (TEX37)克隆、mRNA表达及蛋白质功能生物信息学分析

目的以版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line, BMI)为材料,初步探索猪睾丸表达序列37 (TEX37) 基因的特性和功能,为该基因在猪精子生成过程的作用研究奠定基础。方法利用Oligo7软件设计特异引物扩增BMI TEX37基因整个编码区,应用实时荧光定量PCR技术检测BMI 15个组织的TEX37 mRNA表达谱,并初步预测TEX37蛋白质的功能,最后构建TEX37的多物种氨基酸系统进化树。结果扩增得到BMI TEX37编码区序列长561 bp,编码186个氨基酸,基因登录号KU705619,氨基酸登录号AOC89037。多组织相对荧光定量表达分析表明：TEX37基因在睾丸中呈相对最高表达,在其他组织中呈相对较低表达。生物信息学分析表明：TEX37蛋白质含有TSC21结构域,二级结构以无规则卷曲为主,N末端疏水,C末端亲水,有2类磷酸化位点,无跨膜螺旋结构和信号肽。系统聚类表明：BMI与其他物种相似度在67%以上,进化较保守。结论该研究可为TEX37基因在猪精子生成方面的作用机理研究提供参考。     

版纳微型猪近交系RNF4基因克隆、多组织qPCR表达及功能生物信息学分析

目的以版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line, BMI)为材料,初步研究STRA8基因的功能,为该基因在猪精子形成过程的作用研究奠定基础。方法以GenBank下载的猪STRA8基因序列JQ965783及多条猪EST序列为参考序列,设计特异性引物扩增版纳微型猪近交系(BMI) STRA8基因。对STRA8蛋白质进行理化特性和功能生物信息学分析,包括二级结构、蛋白功能域、疏水性、跨膜结构、信号肽、亚细胞定位、磷酸化位点以及蛋白质功能分析;搜索并下载其他物种的STRA8蛋白质序列构建多物种系统进化树。应用实时荧光定量PCR技术检测BMI STRA8在版纳微型猪近交系15个组织中的mRNA转录表达水平。结果获得了包含编码序列1 101 bp的全长序列1 316 bp,编码366个氨基酸,序列已提交GenBank,基因登录号KU705622,蛋白质分子量(Mw) 41.06 ku,等电点(pI) 4.52。STRA8二级结构中α螺旋含量最高,占52.19%;含有1个蛋白功能域;在氨基端有1个HLH结构域和1个卷曲螺旋区域,在羧基端有2个低复杂度区域;疏水性结果表明STRA8基因N末端、C末端均亲水;无跨膜结构,无信号肽序列;该蛋白质位于细胞核中的概率是56.5%;STRA8蛋白共有34个磷酸化位点;系统进化结果表明：BMI与羊、水牛的相似度最高。STRA8基因mRNA在检测的BMI 15个组织中呈现差异表达现象,睾丸中表达量最高。结论结果将为进一步研究STRA8基因在猪精子发生方面的作用及功能提供参考。     

用微卫星引物对近交系小鼠进行遗传监测

目的 :近交系小鼠广泛地应用于医学和生物学研究领域 ,无品系污染是其基本要求 ,采用 1 0对微卫星引物对 BALB/ C-nu-nu、DBA/ 2、SCID、T73 9、TA2 、6 1 5六种近交系小鼠进行遗传监测 ,试图寻找相关品系遗传监测的基因位点和应用于实际监测。方法 :在确定实验材料符合要求的情况下 ,采用聚合酶链式反应扩增短串联重复序列 ,选择多态性位点作为相关品系的遗传监测标记。结果 :除 1个位点表现为单态性外 ,其余9个微卫星位点表现出多态性 ,其中 D2 Nds3、D3Mit1 5、D3Mit1 7、D3Mit1 8等 4个位点多态性显著 ,这 4个位点适宜用于小鼠遗传监测。上述结果说明微卫星 DNA多态性标记适用于近交系小鼠遗传监测 ,有助于遗传监测从表现型过渡到 DNA水平。