青杨在混交林中的诱控研究

在黄斑星天牛危害核心区,营造多树种混交试验林,在混交林内配置高感树种青杨,青杨在混交林中起到了诱控作用。     

桑天牛诱饵技术研究及应用

１９９４～１９９５年,在野外进行了桑天牛成虫飞行距离、诱饵树设置位置、诱饵树根部施药毒杀成虫以及不同被害程度杨树林分利用诱饵法防治效果的研究。结果表明,成虫最远可飞行到２５００ｍ处的食物上取食,以在２５０～５５０ｍ间较多。诱饵树设在林外低矮植物间的引诱效果为设在林内的３１倍。林内诱饵树越高,引诱效果越好。诱饵树根部施入铁灭克２４０ｇ／ｍ２,在１５～２１天内对成虫的毒杀效果达６４０％～８６７％。利用诱饵树诱集成虫进行人工捕杀,可使林内有虫株率由原来的２７７％～９４８％,下降到５４％～５９４％。     

剑麻AhKH1775基因克隆及其酵母双杂交诱饵载体构建

KH结构域蛋白参与调控植物开花时间、花器官形成、叶发育、miRNA产生和对生物非生物胁迫的响应。前期实验发现AhKH1775可能参与调控剑麻株芽的发育,但是其调控机制仍不清楚。KH结构域蛋白可以通过复合体的方式参与转录后基因表达调控。为获得与AhKH1775相互作用的蛋白,本研究克隆了AhKH1775的完整编码框,构建了酵母双杂交诱饵载体,并检测了诱饵载体的毒性和自激活性。结果显示,克隆获得一个918 bp的编码框,成功构建了诱饵载体,诱饵载体无毒性,但存在自激活性,25 mmol/L的3-AT可以抑制诱饵载体的自激活性。本研究结果为进一步筛选与AhKH1775相互作用的蛋白和深入研究AhKH1775在剑麻中的功能提供依据。     

利用成虫取食习性防治3种杨树天牛

在野外调查桑天牛、云斑天牛、光肩星天牛成虫取食树种的基础上,试验室内用不同植物对成虫进行了饲养．结果表明,３种天牛成虫期的补充营养植物对成虫取食量、寿命、产卵量都有重要影响．补充营养植物内糖含量的多寡是影响取食与产卵的关键因子．利用桑科、蔷薇科、槭树科木本植物作诱饵分别诱杀桑天牛、云斑天牛和光肩星天牛,可有效地控制天牛灾害．     

拟南芥At4g05060基因的酵母双杂交诱饵表达载体的构建、表达及自激活检测

为研究At4g05060基因功能,采用PCR扩增拟南芥VAMP(vesicle-associated membrane protein)家族基因At4g05060的ORF序列,定向克隆至酵母双杂交诱饵表达载体pGBKT7,经酶切鉴定并测序后将其转化至酵母Y187细胞;然后采用Western blotting技术分析At4g05060基因在酵母中的表达水平,通过缺陷型培养基培养进行自激活检测。结果表明,成功构建酵母诱饵表达载体pGBKT7-At4g05060,并在酵母细胞正确表达,表达产物对报告基因无自激活作用。     

千年瑶寨

在学校读书的时候,南岗"千年瑶寨"神圣、神秘的传奇就像诱饵一样,一直吸引着我,呼唤着我的灵魂。在连州出差时,办完公事就即刻开始了"千年瑶寨"之行。南岗"千年瑶寨"深藏在粤北的大山内,其山路弯弯,途中难免一路颠簸。车过南岗后不久,就觉得自己立即     

拟南芥AtCYS6基因酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定

为了筛选与拟南芥半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因AtCYS6相互作用的蛋白,构建其酵母双杂交诱饵表达载体。本研究利用PCR方法扩增得到拟南芥AtCYS6的基因片段,与诱饵载体pGBKT7连接构建诱饵表达载体,经双酶切以及测序检测验证重组载体构建成功后,通过醋酸锂法将诱饵表达载体pGBKT7-AtCYS6与空载体pGBKT7分别转化到Y2HGold酵母菌株,检测其是否有自激活能力以及对宿主酵母菌株是否有毒性作用。结果表明:经PCR扩增后得到了AtCYS6基因,成功构建了无自激活和没有毒性的诱饵表达载体pGBKT7-AtCYS6。本研究结果可进一步为筛选与AtCYS6相互作用的蛋白质及功能研究提供科学依据。     

水稻LRR型受体蛋白激酶OsRPK1胞外区酵母双杂交诱饵载体构建

[目的]寻找水稻LRR型蛋白受体激酶(Leucine rich repeat receptor protein kinase) OsRPK1胞外结构域的互作蛋白.[方法]以日本晴水稻为研究材料,以水稻根部cDNA为模板通过PCR扩增方法得到OsRPK1胞外结构域基因编码片段OsRPK1-OD(969 bp).将该片段插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7,构建重组诱饵载体pGBKT7-OsRPK1-OD.[结果]对pGBKT7-OsRPK1-OD进行毒性检测和转录自激活鉴定,酵母生长结果发现,含有pGBKT7-OsRPK1-OD载体的Y2H Gold细胞,在SD/-Trp、SD/-Trp/X-α-gal营养缺陷型固体培养基上生长出白色菌落,在SD/-Trp/X-α-gal/AbA固体培养基上生长受到抑制;在SD/-Trp生长出含有pGBKT7-OsRPK1-OD载体的Y2H Gold酵母菌落大小与转化了空载的酵母菌落大小一致,显示插入的OsRPK1-OD对酵母生长无毒性作用.[结论]OsRPK1-OD无法参与激活转录酵母中报告基因HIS3,ADE2,MEL1和AUR1-C,该片段可以作为诱饵基因筛查水稻cDNA文库,寻找与之相互作用的蛋白质.     

马陆防治措施研究

近年来,马陆在很多地方暴发成灾,为此对马陆的防治方法及策略进行研究和探讨。在室内利用浸虫法对14种化学杀虫剂进行测定表明,异丙威、敌百虫、毒死蜱、功夫菊酯对马陆毒杀效果较好,药后4 d防效达100%。撒施生石灰(氧化钙)也能迅速有效地杀死马陆。室内利用10种饲料对马陆进行饲养表明,蜗牛肉、猪肉等对其生长有较好促进效果;室外利用饵料进行引诱发现,猪肉、白菜叶等对马陆引诱效果较好。在制定马陆的防治策略时,应根据具体的环境条件选择上述合适的防治措施。     

小反刍兽疫病毒酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-tH的构建、表达和鉴定

利用PCR技术扩增获得PPRV-tH基因片段,将其克隆至酵母双杂交系统诱饵载体pGBKT7中,经酶切、测序验证其正确插入后,将重组诱饵质粒转化酵母菌AH109中,检测其在酵母中有无渗漏、自我激活作用和毒性。利用Western blotting分析诱饵蛋白在酵母中的表达情况,以鉴定其作为诱饵蛋白的可行性。结果表明,成功扩增到了PPRV-tH,并正确构建了pGBKT7-tH诱饵表达载体,此载体在酵母细胞AH109中无毒性、渗漏和自我激活能力,且能正确表达tH蛋白。