T1083替换融合质粒载体pGBKT7-TS转入酵母的自激活试验（摘要）（英文）

[目的]研究T1083替换融合质粒载体pGBKT7-Ts转入酵母的自激活实验,探讨其表达产物是否可作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[方法]将T1083替换突变BD融合质粒载体pGBKT7-TS转入酵母后,进行自激活和蛋白表达毒性检测试验。pGBKT7-TS对报告基因自主激活的检测。将pGBKT7-TS质粒转染S.cerevisiae strainAH109和S.cerevisiaeY187菌株,同时分别转入pGBKT7作为对照,在SD-Trp平板上挑取转化菌落,悬于适量无菌水中,再分别接种于SD-Trp ＋X-α-gal、SD-Trp-His ＋X-α-gal、SD-Trp-Ade ＋X-α-gal和SD-Trp-Ade-His ＋X-α-gal平板。30℃培养2 ～3 d,观察各平板菌落颜色。确定含有pGBKT7-TS质粒的AH109和Y187酵母细胞内HIS、ADE、Mel1、LacZ报告基因的表达情况。pGBKT7-TS对酵母AH109和Y187的毒性检测、挑取大于2 mm的pGBKT7-TS转化的AH109克隆和pGBKT7-TS转化的Y187克隆各1个,分别接种于50 ml SD/-Trp＋Kan（20μg/ml）培养基中,30℃、250 r/min培养16 h,检测OD600,若OD600〈0.8,则DNA-BD可能有毒性;若OD600≥0.8,说明DNA-BD无毒性。[结果]转化pGBKT7-TS的酵母菌AH109在SD-Trp ＋X-α-gal平板和SD-Trp-His ＋X-α-gal平板上均可长出菌落,但在SD-Trp-Ade ＋X-α-gal平板和SD-Trp-Ade-His＋X-α-gal平板上均无菌落生长,表明转入pGBKT7-TS后His报告基因有泄漏表达,但不能激活ADE和MELI报告基因。毒性检测试验中,重复2次,其OD600均大于0.8,说明DNA-BD融合蛋白对酵母AH109和Y187的生长无毒性,可以作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T1083替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了试验基础。     

以蚯蚓作为对虾饲科诱饵剂的探讨

The paper deals with the conception of earth-worm as a luring agent for prawn feed and the results of experimeat,     

全国水产品保鲜加工新技术交流及工作座谈会在福州召开

为适应我国对虾养殖业的不断发展，由东海水产研究所研制，浙江省水产供销公司乐清分公司综合加工厂生产的对虾配合饵料．经近年来在江苏、浙江，上海等地应用，效果显著，深受用户欢迎。     

木猫捕鼠器的制作

<正> 目前,广大农村老鼠药泛滥,导致猫狗大量中毒死亡,老鼠反而不轻易吃拌药诱饵。木猫捕鼠器则能活捕老鼠,三五个“木猫”抵得上一个真猫。因此,值得推广。 (一)制作方法 1.三面敞口令:用锯子、刨子等工具加工5块长约33厘米左右,宽为16.5厘米左右的木饭。首先把其中一块木板当作“猫尾”。在这块一端的中部锯一条裂缝,然后在裂缝顶部钉上一颗铁(1.5寸长)钉。接着用小铁钉把连同“猫尾”的四     

斑啄木鸟及诱饵树防治桑天牛效果的研究

通过两年对斑啄木鸟啄食桑天牛越冬幼虫的系统观察表明，在斑啄木鸟种群密度约为０．３７～０．５５只／ｈｍ２时，其平均啄食率可达２４．７１％，啄食高峰期在１月份。用栽植构树饵树诱杀桑天牛成虫的方法，两年后使试验林有虫株率下降了５１．３％～８４．８％，取得了良好的效果     

笼捕梭子蟹引诱饵料初步研究

根据国外对水产动物诱饵物质的研究动向，结合蟹的特性，本文设计了四个系列不同饵料配方，对蟹进行水簇模拟笼捕试验，筛选出相对具有引诱效果的几个饵料配方。     

新城疫病毒V蛋白C端酵母双杂交诱饵质粒的构建与鉴定

为构建新城疫病毒(NDV)V蛋白C端酵母双杂交诱饵质粒,用RNA试剂盒提取NDV F48E9株的RNA,通过反转录试剂盒将抽提的RNA反转录,以反转录合成的eDNA为模板,通过PCR扩增,获得V蛋白C端基因(VCTD).通过酶切连接的方法将V蛋白C端基因克隆至pGBKT7载体上,命名为pGBKT7-VCTD.将pGBKT7-VCTD转化酵母Y2H Gold酵母感受态细胞,转化产物涂布营养缺陷型平板,观察平板上菌落生长情况,判定诱饵质粒有无自激活能力:同时挑取平板上的生长的菌落接种液体培养基培养,绘制生长曲线,判定pGBKT7-VCTD诱饵质粒有无毒性.酶切和测序结果表明,成功构建pGBKT7-VCTD诱饵质粒,且该诱饵质粒在酵母细胞中无毒性和自激活能力.本研究成功构建了pGBKT7-VCTD诱饵质粒,为筛选NDVV蛋白C端纳米抗体奠定基础.     

用于筛选植物PGIP的酵母双杂交PGase诱饵载体

对真菌抗性较强的植物能利用自身的多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白（polygalacturonase—inhibiting protein，PGIP）来抑制真菌分泌的、降解植物细胞壁的主要物质——多聚半乳糖醛酸酶（polygalacturonase，PGase）的活性,目前，快速、有效的获取植物PGIP的方法是通过酵母双杂交技术来进行的，而这首先要获得真菌PGase的酵母诱饵载体．以真菌——互格链格孢PGase的cDNA的为基础，将其克隆到MATCHMAKER LexA Two—Hybrid System的诱饵载体中，并将诱饵载体（pLexA—PGase）成功转化酵母菌株EGY478[p8op-lacZ]，经检测无自激活作用，可直接用于快速、大量地筛选植物PGIP．     

朊蛋白(prp23-231)酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用的检测

PCR扩增小鼠朊蛋白（prp23-231）基因,克隆入诱饵载体psos,将重组质粒与对照质粒共转化酵母菌cdc25H,成功地构建了小鼠朊蛋白（prp23-231）酵母双杂交诱饵载体pSos-prp23～231,并证实该段基因表达的蛋白对酵母菌cdc25H既无毒性,也没有自激活作用。     

一种新型监测诱饵对红火蚁的诱集效果分析

红火蚁(Solenopsis invicta Buren)是我国最具危险的外来入侵生物之一，对农林业生产、人畜健康、公共安全、生物多样性等均具有严重影响。根据国际上红火蚁防控经验来看，化学防治手段较为成熟，但关键问题还是如何早期发现红火蚁，而诱饵诱集是早发现红火蚁的一种高效方法。本文介绍了一种新型的红火蚁监测诱饵，并比较分析了该新型诱饵与市售火腿肠在诱集效果上的差异。结果表明，两种诱饵在5 min时已经诱集到红火蚁，两者之间的红火蚁数量差异不显著，而在15 min时，诱饵诱集到的红火蚁数量显著多于火腿肠；室外试验发现，新型诱饵与火腿肠的诱集效果无显著差异。鉴于新型诱饵的野外保鲜性、使用成本及操作便利等特点，我们认为新型诱饵更适用于红火蚁的监测调查。