西瓜食酸菌TA基因酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用的检测

【目的】构建西瓜食酸菌TA基因的酵母双杂交诱饵载体,为探究TA基因编码产物参与西瓜食酸菌致病的机制奠定基础。【方法】通过PCR扩增TA基因,并定向克隆到载体p GBKT7,获得可用于酵母双杂交的诱饵载体p GBKT7-TA,经酶切鉴定和测序验证为正确后将p GBKT7-TA转化到酵母菌株AH109中;进一步用ADE2、HIS3、Lac Z报告基因活性检测法检测p GBKT7-TA的自激活作用,用固体及液体营养缺陷型培养基培养法检测p GBKT7-TA的毒性作用。【结果】诱饵载体p GBKT7-TA对酵母菌株AH109没有自激活及毒性作用。【结论】所构建的诱饵载体可用于酵母双杂交系统的后续工作,为进一步从被西瓜食酸菌侵染的黄瓜子叶c DNA文库中筛选与TA互作的蛋白奠定了基础。     

利用苦楝树诱杀木麻黄星天牛成虫的可行性研究——木麻黄防护林主要？…

通过大量野外调查,室内外饲养,造林试验和化学成分分析,认为苦楝树（Ｍｅｌｉａａｚｅｄａｒａｃｈ）是星天牛（Ａｎｏｐｏｌｐｈｏｒａｃｈｉｎｅｉｎｓｉｓ（Ｆｏｒｓｔｅｒ）成虫最喜欢取食的补充营养植物,有强烈的诱集作用,以苦楝树做诱饵树集中的诱杀沿海木麻黄（Ｃａｓｕａｒｉａｓｐｐ．）防护林星天牛是一种很有前途,可行性强的防治方法。     

夜夹法调查鼠情应注意的技术问题

目前,调查农田小型鼠类,多采用夜夹法,其结果受多种因素的影响。为确保调查数据的可靠性和可比性,测报人员应掌握以下技术问题。1鼠夹型号应保持一致,中型夹较适于地面小型鼠类的数量调查。     

柽柳类锌指基因ThZFL酵母诱饵表达载体的构建及其表达验证

利用PCR技术从柽柳cDNA文库中克隆出ThZFL目的基因序列,连接到pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态,经检验后提取质粒,用BamH I和EcoR I限制性内切酶双酶切pMD18-T-ThZFL载体和pG-BKT7-BD空载体,并将酶切产物胶回收后,用T4 DNA连接酶连接过夜后转化大肠杆菌DH5α感受态...     

小麦h型硫氧还蛋白Trx-h酵母双杂交诱饵载体的构建和自激活检测

为构建小麦h型硫氧还蛋白Trx-h酵母双杂交诱饵载体,并检测其对酵母细胞的自激活作用.利用RT-PCR扩增Ta Trx-h基因的ORF区域,并与pGBKT7载体连接构建诱饵载体pGBKT7-Trx-h,利用PEG/LiAC法转化酵母AH109后,通过表型筛选检测诱饵蛋白对酵母有无自激活作用.结果表明,含pGBKT7-Trx-h质粒的酵母在SD/-Trp-Leu培养基上能正常生长,说明诱饵载体表达产物对酵母细胞无毒性作用;在SD/-Trp-Leu-His-Ade培养基上不能生长,说明诱饵质粒无自主激活报告基因的作用.因此,可以利用该诱饵载体通过酵母双杂交方法筛选与Trx-h蛋白相互作用的蛋白.     

禽网状内皮组织增生症病毒蛋白酶PR酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定

为研究禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)蛋白酶PR与宿主细胞的相互作用,将REV PR基因克隆入酵母双杂交诱饵载体p GBKT7,构建诱饵载体p GBK-PR,经菌落PCR、酶切鉴定及测序验证正确后,将重组诱饵质粒转化酵母菌株Y2H Gold感受态,进行重组诱饵载体在酵母中的自激活活性和毒性检测。结果表明,成功构建诱饵载体p GBK-PR,此载体在酵母细胞Y2H Gold中无自激活活性和毒性。研究结果为进一步利用酵母双杂交技术筛选与REV蛋白酶PR互作的宿主蛋白奠定了基础。     

基于网箱灯光诱饵技术的匙吻鲟养殖试验

 在安康瀛湖库区进行网箱灯光诱饵技术（不投饵）养殖匙吻鲟试验。结果表明:灯光诱饵试验组相较无灯光组在鱼体长、体重、吻长等方面均有一定程度的提高。水库网箱利用灯光诱饵技术养殖匙吻鲟在安康瀛湖库区显示出较好的生长速度,具有广阔的推广前景。