H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的原核表达及其ELISA检测方法的建立

采用RT-PCR技术扩增了禽流感病毒（AIV）A／Goose／HLJ／p46／2003（H5N1）的NSl基因，将其克隆于融合蛋白表达载体pMAL-c2X上，转化DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞，经BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定及序列分析，表明筛选到了重组质粒pc2X-NS1。SDS-PAGE电泳结果显示，重组质粒转化TB1大肠埃希氏菌后，经0．3mmol／L的IPTG诱导，融合蛋白MBP-NS1得到大量表达，融合蛋白以可溶形式存在，分子质量约为67ku。Western-blotting检测结果表明，融合蛋白MBP-NS1能够与H5N1亚型AIV活病毒感染康复鸭血清发生特异性反应，而不能够与H5N1亚型AIV灭活疫苗免疫鸭血清发生反应。试验初步建立了以纯化的融合蛋白MBP-NS1为包被抗原的间接ELISA检测方法，为AIV灭活疫苗免疫家禽与AIV感染家禽的鉴别诊断奠定了基础。     

猪生殖与呼吸综合征病毒M基因和N基因的表达

将猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的M基因和N基因从重组质粒pMD18-T—M—N中亚克隆至pBV220原核表达栽体上，成功构建了重组表达质粒pBVM—N。将pBVM—N转化大肠埃希氏菌DH5α感受态细胞．重组菌经温度敏感诱导表达，其细菌裂解物经SDS—PAGE可检测到分子质量约为19ku的目的蛋白，与M基因表达产物一致；经蛋白质分析软件Bandscan分析，其表达量可达19．1％；Western-blotting分析表明，该重组蛋白可被兔抗PRRSV血清所识别，与预期的M基因表达产物相一致，而N基因未获表达。     

鸡传染性腔上囊病病毒VP2基因在昆虫细胞中的表达

为了深入研究鸡传染性腔上囊病病毒（IBDV）VP2基因的结构和功能,利用Bac-to-Bac系统研制出含有VP2基因的重组杆状病毒rBac-VP2,将rBac-VP2感染Sf9细胞,并用抗IBDV VP2特异性单克隆抗体经间接免疫荧光试验检测,证实感染重组病毒Sf9细胞能高效表达IBDV VP2基因产物;Western-blotting分析结果表明,VP2基因表达产物的分子质量约为40 ku.     

光照、蔗糖浓度对早熟禾愈伤诱导的影响

草地早熟禾是一种优良的草坪用草 ,以其生长速度慢 ,不需经常修剪 ,耐践踏 ,用途广等优点而越来越受到人们的青睐。不少学者对草地早熟禾组织培养进行了研究 ,并用幼穗、幼苗的胚轴做外植体诱导愈伤 ,得出幼穗为较好外植体的结论。但由于季节的限制 ,幼穗取材不很方便 ,而用种子作为外植体则可以克服这一点。本试验采用的外植体为早熟禾品种蓝肯的种子。将种子用 50 %硫酸处理 3 0min(分钟 ) ,清水洗净 ,然后再用 95%酒精消毒 3 0s(秒 ) ,0 .1%升汞消毒 15min,无菌水冲洗 5次 ,接种于“MS无机 +B5有机 + 2 .0mg/L 2 ,4-D + 3 0g/L蔗糖 + …     

火龙果茎段组织培养和快繁试验

火龙果 (ＨｙｌｏｃｅｒｅｕｓｕｎｄａｔｕｓＢｒｉｔｔ＆Ｒｏｓｅ)又称红龙果、仙蜜果 ,属仙人掌科三角柱属。原产于墨西哥等中美洲地区 ,属典型的热带植物。火龙果形状奇特 ,形似橄榄状 ,成熟时果实红色 ,其红色素是提取制造天然口红的最佳原料 ,且甜度可达 1 4～ 1 6度。种子异常香甜可口 ,花形特大 ,即可生食又可炒煮。经测定 ,火龙果含丰富的维生素、天然纤维素、葡萄糖及人体所需的Ｋ、Ｃａ、Ｎａ、Ｍｇ等矿物质、蛋白质 ,具有降血压、降火气、解毒、滋肺、养颜、明目之功效 ,对糖尿病、高血压患者有很好的保健作用。由于火龙果栽培…     

不同因子对冬虫夏草真菌产生分子孢子的研究

本文论述了冬虫夏草菌在不同培养基，不同温度及不同光照条件下产生分生孢子的研究，发现在玉米粉琼脂培养基、麦麸培养基、小麦培养基产生分生孢子较多。同时温度在15～18℃，完全黑暗条件下分生孢子产生较多。     

β- 氨基丁酸诱导甜( 辣) 椒抗疫病作用的研究

 报道了用β- 氨基丁酸( DL-β-aminon-butyric acid, BABA) 喷雾处理辣椒叶片和茎后的诱导抗疫病作用。研究证明: 高浓度BABA ( 1 000 g/mL) 对离体辣椒疫霉病菌无抗菌活性, 用其喷雾处理辣椒的茎叶所诱导的抗疫病作用可完全控制其危害; 用BABA 诱导处理后3 d 接种辣椒疫霉病菌, 辣椒植株开始表达出较高的诱导抗性, 这种抗病作用可持续20 d 以上, 并表现出与数量抗病性相似的特性。     

西瓜和甜瓜茎离体诱导四倍体

西瓜和甜瓜茎尖离体诱导四倍体受到茎尖苗龄、培养基中的激素浓度、秋水仙素浓度和处理时间等因素的影响。实验结果表明：8天左右苗龄的茎尖，在含有0.1%秋水仙素和较低浓度细胞分列素的液体培养基中处理24－48小时的诱导方法最有利于四倍体的产生。     

对鳞翅目害虫有活性的cry1C基因的克隆和表达

在鉴定苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis，简称Bt)Btc001菌株cry基因型的基础上，构建了Btc001菌株质粒DNA HindⅢ片段的文库，并利用聚合酶链式反应-限制性酶切片段多态性(PCIR-RFIP)方法筛选出含有crylC6全长基因的13．5kb大片段，酶切分析得到该片段的物理图谱，BamHI和EcoRI切完成了6．5kb含全长基因的亚克隆，并对这条6．5kb片段亚克隆、测序，序列在国际核酸序列数据库(GenBank)登记(AY007686)，并由Bt杀虫晶体蛋白基因国际命名委员会命名为cry1Cb2基因。根据序列设计了一对用于扩增全长基因的引物S581CB和S381CB，扩增产物插入表达载体pET-21b中，诱导后在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达。表达产物对小菜蛾(Plutella xylostella)表现出较高活性，LC50达到7．9μg/ml。     

菜豆普通花叶病毒长豇豆分离物外壳蛋白基因的序列分析及原核表达

 根据普通生物学和血清学特性,长豇豆病毒病的病原被鉴定为黑眼豇豆花叶病毒(Blackeye cowpea mosaic virus,Bl CMV)、豇豆蚜传花叶病毒(Cowpea aphidborne mosaic virus,CABMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumbermosaic virus,CMV)。