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本研究以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,PCR扩增含ULl8全长基因的片段并克隆至pMDl8-T载体,采用双脱氧末端终止法测序.序列分析显示ULl8全长891 bp,可编码297个氨基酸.将该基因亚克隆到原核表达栽体pQE.82L的6×His标签下游,获得原核表达质粒pQE-UL18,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白6 × His-UL18的分子量约为33 ku.Western blot证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应.进一步将UL18基因插入真核表达栽体pEGFP-N1中EGFP基因的5'端,获得与EGFP融合表达的真核表达质粒pEGFP-UL18,转染HeLa细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现,转染后24 h融合蛋白EGFP-UL18主要定位于细胞浆,仅有部分定位于细胞核,而48 h时则主要定位在细胞核.但对照载体pEGFP.N1转染细胞的荧光一直呈弥散型分布于整个细胞中. 相似文献
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王国东 《辽宁农业职业技术学院学报》2015,17(2):40-42
党建工作是高职院校稳定的基础,就业工作是高职院校发展的基础,探索实现两者融合互动,必将对高职院校人才培养发挥更大作用。分析了两者融合互动的必要性、存在的问题和创新举措,以实现二者有机融合,优势互补,进而提升高职院校毕业生的就业竞争力。 相似文献
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[目的/意义]作为未来农机装备的研究重点,农业轮式机器人正向着智能化与多功能化的方向发展。三维环境感知技术因其获取的信息量丰富、复杂环境下的鲁棒性和适应性好,成为了农业轮式机器人智能化无人作业的基础与关键,其发展水平直接影响到包括农业轮式机器人在内的无人农机的作业质量与效率。[进展]本文首先总结了农业轮式机器人和农业环境感知技术的发展现状,分析了不同类型农业轮式机器人的使用特点和应用现状。其次分析了在农业轮式机器人上实现三维环境感知所主要使用的感知设备及其对应的关键技术,重点阐述了基于激光雷达、视觉传感器和多传感器融合的农业轮式机器人三维环境感知技术的研究进展。[结论/展望]结合农业作业特点与实际需求,指出了农业轮式机器人三维环境感知技术在适用性、环境信息处理和感知效果等方面存在的一些问题,并提出了提升传感器的农业适用性、发展基于深度学习的农业环境感知技术、发展智能化的高速在线多传感器信息融合技术三个方面的建议,以期为农业轮式机器人三维环境感知技术发展提供参考与借鉴。 相似文献
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为研究产气荚膜梭菌α、β、ε3种主要外毒素的免疫原性,构建基因亚单位多价疫苗,本研究通过PCR分别扩增α-β2及ε3种毒素基因,分别克隆于p Pro HTa载体中构建重组表达质粒p Pro-α-β2-ε,并转化大肠杆菌进行这3个目的基因的融合表达。SDS-PAGE分析显示,表达的α-β2-ε毒素融合蛋白大小约90 ku,主要以包涵体形式存在。将其免疫BALB/c小鼠后,分别利用A型和B型产气荚膜梭菌强毒素对免疫鼠进行攻毒,并测定免疫鼠血清中抗体对毒素的中和活性。结果表明,免疫鼠对A型和B型产气荚膜梭菌毒素1 LD100和2 LD100的攻毒保护率分别为100%和60%以及100%和80%。体外中和试验显示,免疫鼠血清稀释为1∶20时,对1 LD100A型和B型产气荚膜梭菌毒素的中和效率均可达到100%。以上结果表明,本研究制备的α-β2-ε融合蛋白具有良好的免疫原性,能够有效刺激机体产生中和抗体,可以作为基因工程疫苗的有效组分,为产气荚膜梭菌多价候选亚单位疫苗的研究奠定了基础。 相似文献
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为利用RNAi技术获取抗水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)和南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)植株,分别针对两种病毒的S6和S10基因构建RNA沉默载体。采用重组PCR方法将RBSDV S6基因片段(R6)和SRBSDVS6基因片段(SR6)进行融合,获得600 bp的R6-SR6融合基因;将RBSDV S10基因片段(R10)和SRBSDV S10基因片段(SR10)进行融合,获得600 bp的R10-SR10融合基因。融合基因以反向重复的方式连入pBS载体,并定向插入到pCAMBIA1301载体上,获取了含有发夹结构的植物表达载体pCAMBIA1301-hp(R6-SR6)和pCAMBIA1301-hp(R10-SR10)。抗RBSDV和SRBSDV RNA沉默载体的构建为利用RNA沉默进行植物抗病毒研究奠定了基础。 相似文献
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工业设计在我国是刚刚发展起来的新兴学科,高校的教学模式正处在改革和探索时期。在工业设计教育中,存在艺术类与工科类两种不同的培养模式,它们的教学都有自己的侧重点,两者的区别也较大。而农业院校工科的工业设计专业更有自己的特点。通过对设计素描的教学目的以及农业院校工科工业设计学生特点的分析,对素描教学中的思维方式、教学内容、穿插联系等方面进行革新和探索,目的在于提高设计素描在教学中的准确性和科学性。 相似文献
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要想巩固脱贫攻坚成果,实现与乡村振兴的有机衔接,就要更加关注“三农”问题,找准并大力扶持广大农村地区的特色产业,激发农村地区可持续发展的内生动力。笔者以双峰县为例,分析其特色农旅产业融合发展模式以及提升乡村产业韧性的机制。研究发现双峰县基地农旅发展存在五大发展模式,农旅融合发展带来的产业融合、产业关联以及规模经济效应是提升乡村产业韧性的内在机制。探究县域农旅产业融合发展模式与理论机制,有利于识别乡村特色产业发展存在的机遇与挑战,为县域特色产业长久发展提供有益参考。 相似文献
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以第三次全国土地调查为契机和基础,融合对接现有森林资源管理“一张图”数据成果,形成高集成通用的一张数据底图。“三调”与“一张图”数据由于影像底图、分类标准、边界、空间位置及其他因素不一致导致数据存在差异,数据融合对接工作难度大。目前,“三调”与“一张图”的数据融合技术方法主要为分类标准的统一、内业标准的统一、外业补充调查的校正、数据库建设的统一等。研究国土“三调”与森林资源管理“一张图”数据融合方法,对着力提升森林资源保护发展水平以及建设自然资源“一张图”具有重要意义。 相似文献