首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   9724篇
  免费   358篇
  国内免费   541篇
林业   390篇
农学   561篇
基础科学   1037篇
  512篇
综合类   4761篇
农作物   548篇
水产渔业   129篇
畜牧兽医   2183篇
园艺   388篇
植物保护   114篇
  2024年   167篇
  2023年   638篇
  2022年   728篇
  2021年   627篇
  2020年   512篇
  2019年   587篇
  2018年   202篇
  2017年   424篇
  2016年   404篇
  2015年   331篇
  2014年   406篇
  2013年   464篇
  2012年   569篇
  2011年   542篇
  2010年   515篇
  2009年   509篇
  2008年   530篇
  2007年   414篇
  2006年   347篇
  2005年   300篇
  2004年   250篇
  2003年   180篇
  2002年   136篇
  2001年   119篇
  2000年   121篇
  1999年   88篇
  1998年   68篇
  1997年   64篇
  1996年   65篇
  1995年   54篇
  1994年   48篇
  1993年   46篇
  1992年   48篇
  1991年   48篇
  1990年   39篇
  1989年   18篇
  1988年   7篇
  1987年   5篇
  1986年   2篇
  1955年   1篇
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 93 毫秒
61.
构建表达eae和stx1/2B的融合基因,克隆eae基因的C端280个氨基酸残基(Int280)基因部分,以正确地阅读框定向插入到含有stx1/2B融合基因的质粒,构建重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS—PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达。薄层扫描分析表明:目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的50.67%。由于该融合蛋白由eae、stx1B、stx2B等三部分抗原组成,可刺激机体产生针对紧密素和StxB的抗体,在EHEC O157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。  相似文献   
62.
为探讨HBV/HAV复合疫苗的可行性,利用DNA重组技术将HBsAg与HAW复合多表位抗原基因VPX进行融合,插入到真核表达质粒pVAX1多克隆位点,构建成核酸表达疫苗pVAX1/SVPX,将其转染CHO细胞。转染细胞培养48h后,进行RTPCR、Western-blot、ELISA分析,结果表明HBV/HAV复合抗原基因SVPX能够在CHO细胞内转录、表达,融合蛋白具有HBV和HAV抗原的特性。  相似文献   
63.
羊痘的研究进展   总被引:11,自引:0,他引:11  
羊痘病毒能引起山羊痘、绵羊痘和牛的结节性疹块病。羊痘是以发热、全身性的皮肤损伤、痘疹和淋巴结病变为特征。羊痘病毒是所有动物痘病毒中最为重要的一种,严重影响养羊业和国际贸易的发展。本文从病原学、流行病学、诊断和预防控制等方面对羊痘做一综述。虽然此病从临床症状和宿主特异性上很容易做出诊断,但进一步的实验室确诊还是必要的,现已有多种检测方法和诊断试剂。控制该病最有效的方法还是使用疫苗对易感动物进行免疫接种。  相似文献   
64.
构建了含羊奇异变形杆菌外膜蛋白A(ompA)编码基因的重组载体pNZ8149-ompA,并将其电转入乳酸乳球菌NZ3900中。利用Westen blot检测目的蛋白的表达,流式细胞仪及间接免疫荧光技术检测目的蛋白在乳酸乳球菌中的定位。将重组乳酸乳球菌灌胃BALB/c小鼠,分别于口服后1,2,3,4,5,6,7d取其十二指肠、空肠、回肠、盲肠的肠道冲洗液,通过平板菌落计数法检测乳酸乳球菌在肠道的定植情况。Western blot检测到目的蛋白于49 000处出现特异性条带;流式细胞仪检测到重组乳酸乳球菌表面荧光强度明显强于空质粒对照组;间接免疫荧光试验检测到重组乳酸乳球菌菌体表面出现绿色荧光。灌服小鼠后,重组乳酸乳球菌在小鼠各肠段的定植比例不同,定植能力于口服后6d达到高峰,7d后在重组菌在十二指肠、空肠、回肠和盲肠的定植率分别占第1d的15.23%,24.19%,48.57%,40.07%。本试验证明羊奇异变形杆菌ompA能够稳定表达于乳酸乳球菌表面,且重组乳酸乳球菌在小鼠肠道内具有良好的定植能力,其定植能力为回肠盲肠空肠十二指肠。这为研究乳酸乳球菌作为羊奇异变形杆菌口服疫苗抗原递送载体提供了试验基础。  相似文献   
65.
党建工作是高职院校稳定的基础,就业工作是高职院校发展的基础,探索实现两者融合互动,必将对高职院校人才培养发挥更大作用。分析了两者融合互动的必要性、存在的问题和创新举措,以实现二者有机融合,优势互补,进而提升高职院校毕业生的就业竞争力。  相似文献   
66.
随着中国城镇化率跃过50%的拐点,我国城市发展从"扩大增量"进入"提质存量"的阶段,城镇化模式也逐渐升级,从过往一味"大"而"全"的思路,到如今注重精细化的策化、规划,强调产城融合、错位发展、生态优先等发展概念。面对城镇化2.0时代的挑战,本文将结合实践经验,对现代城市新区开发规划的基本要求、关键要素进行较深入的探讨。  相似文献   
67.
68.
Dvl1及其结构缺失突变体ΔDIX(dsh and axin)和ΔDEP(dsh,Egl-10 and pleckstrin)腺病毒载体的构建并验证其在MSCs(mesenchymal stem cells)中的表达情况。将目的基因定向克隆至pAdTrack-CMV穿梭载体上,并经PmeⅠ线性化后在BJ5183细菌中与pAdEasy-1骨架质粒同源重组,获得重组腺病毒载体,在QBI-293A细胞中包装及扩增,实时荧光定量PCR和Western bolt验证Dvl1在MSCs中的表达情况。经PCR、PacⅠ单酶切鉴定及测序分析,成功构建Ad-Dvl1、Ad-ΔDIX和Ad-ΔDEP腺病毒载体,目的基因序列与GenBank报道一致,并选出150 MOI为最适感染MSCs的感染复数,成功构建了Ad-Dvl1、Ad-ΔDIX和Ad-ΔDEP腺病毒载体,并获得高滴度的病毒子,qPCR和Western blot证实Dvl1在MSCs中高表达并增加了β-catenin在细胞中的累积,为进一步研究Dvl1在MSCs迁移过程的作用奠定了基础。  相似文献   
69.
由于重庆市大城市带大农村的特点,因而被中央确定为全国城乡统筹的试点市。所以,重庆市各级各地、各行备业都有搞好城乡统筹的义务和责任。  相似文献   
70.
《山东农机》2011,(10):70-70
2011年9月24日至25日.农业部为了系统研讨玉米播种、施肥、植保和收获等环节的农机农艺融合问题,加快玉米生产机械化,农业部农机化管理司、科技教育司和种植业管理司在山东省潍坊市共同举办了玉米生产农机农艺技术融合座谈会。来自农业部农机化管理司、科技教育司、种植业管理司及部属事业单位的有关负责同志,国家玉米产业技术体系科学家及育种、栽培、植保、  相似文献   
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号