18味中药提取物体外抗鸭瘟病毒活性的研究

我国传统中药在临床中广泛用于抗病毒疾病的治疗,该研究以18味传统中药为研究对象,希望找到对鸭瘟病毒具有良好抑制作用的中药原料。首先,通过细胞病变观察法(cytopathic effect,CPE)初步筛选了18味中药水提取物和醇提物进行体外抗鸭瘟病毒活性研究,发现当虎杖醇提物质量浓度为0.062 5mg/mL和0.031 3mg/mL,茜草醇提物质量浓度为0.007 8mg/mL时,可抑制鸭瘟病毒引起的鸭胚成纤维细胞病变。进而通过四甲基偶氮唑盐法[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]进一步研究了虎杖和茜草醇提物的体外抗鸭瘟病毒活性。结果显示:当虎杖质量浓度为0.062 5mg/mL、茜草质量浓度为0.007 8mg/mL时,对鸭瘟病毒的体外抑制率分别为76.50%、48.91%,虎杖醇提物的半数有效质量浓度(50%inhibitory concentration,IC50)为0.022 7mg/mL,茜草醇提物的IC50>0.007 8mg/mL。提示虎杖和茜草醇提物均有不同程度的体外抗鸭瘟病毒活性,其中虎杖效果优于茜草,具有进一步研究的价值。     

激蛋散中虎杖的TLC鉴别研究

为了完善激蛋散质量标准，用薄层色谱法对组方中的虎杖进行了鉴别研究。结果表明，该方法简便，准确，专属性强。     

发根农杆菌介导的虎杖转基因体系的优化

为建立虎杖高效遗传转化体系,用携带有植物表达载体pCAMBIA1301的发根农杆菌ATCC15834侵染虎杖无菌苗获得毛状根。对影响虎杖毛状根诱导的因素如外植体种类、农杆菌活力、培养基种类、超声波辅助时间进行优化以获得最佳培养条件。通过潮霉素筛选阳性毛状根并确定最佳潮霉素浓度。结果表明以叶片为外植体,1/2MS为培养基,菌液OD600=0.8,超声波辅助5s时,虎杖遗传转化毛状根效果最佳。筛选出的毛状根经GUS染色和PCR分子鉴定表明,该方法的阳性转化率为92%。该研究优化了虎杖毛状根的培养条件,为后期实验探究建立了更加高效的虎杖转基因体系。     

虎杖苷十一碳烯酸酯的酶法合成与动力学研究

为建立绿色、高效、高选择性合成虎杖苷十一碳烯酸酯双前药的生物催化体系,本研究以棉状嗜热丝孢菌(Thiermomyces lanuginosus)脂肪酶(TLL)为催化剂,以反应介质、底物摩尔比、温度及反应时间等因素为变量,探究了 TLL催化虎杖苷十一碳烯酰化反应的特性.结果表明,TLL可在丙酮中实现对虎杖苷的高效转化,...     

虎杖中白藜芦醇的吸附特性和稳定性研究

[目的]研究用大孔树脂吸附分离虎杖中白藜芦醇的特性及其稳定性。[方法]分析大孔树脂对白藜芦醇的吸附曲线,分析流速、乙醇体积分数、提取时间、提取温度、pH等因素对大孔树脂吸附白藜芦醇的影响。[结果]AB-8树脂对虎杖中白藜芦醇的吸附更接近单分子层吸附。以1.5 m L/min流速通过层析柱时吸附率更高,用70%乙醇提取虎杖中白藜芦醇时提取率最高,3 h是最佳提取时间;60℃是最佳提取温度;p H为4时白藜芦醇提取率最高。稳定性研究表明,白藜芦醇在酸性条件下保存浓度基本不变。[结论]用大孔树脂吸附分离白藜芦醇具有一定的优势。     

复方虎杖胶囊对高尿酸血症小鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的：探讨复方虎杖胶囊（Fu fang hu zhang jiao nang,FHZ）对高尿酸血症小鼠T淋巴细胞亚群的影响。方法：小鼠随机分为空白组、别嘌呤醇组、模型组及5．O％、2．5％、1．25％FHZ组,灌胃给药6d后,采用腹腔注射黄嘌呤一次造模,半小时后摘眼球取血,尿酸酶比色法测定血尿酸;处死小鼠,取脾脏,剪碎、研磨后,制备成单细胞悬液,单色法应用流式细胞仪测定CD3＋、CD4＋、CD8＋百分比及CD4＋／CD8＋比值。结果：模型组血尿酸明显升高（与空白组比较,P〈0．05）,而别嘌呤醇组和5．0％、2．5％、1．25％FHZ组能明显降低血尿酸（与模型组比较,P〈0．05）。应用流式细胞仪检测脾脏T淋巴细胞分型结果显示：模型组、别嘌呤醇组和空白组CD3＋、CD4＋、CD8＋及CD4＋／CD8＋差异均无统计学意义;且5％FHZ组与模型组、空白组、别嘌呤醇组相比较差异亦无统计学意义。结论：FHZ具有明显的降低高尿酸血症小鼠血尿酸的作用,优于别嘌呤醇。急性高尿酸血症和FHZ对脾脏T淋巴细胞亚群无明显影响。     

微波程序控温控压辅助双水相萃取虎杖果实中白藜芦醇与大黄素的研究

以虎杖果实为原料,采用微波程序控温控压辅助乙醇-硫酸铵双水相萃取白藜芦醇与大黄素,对比了该方法与微波辅助提取、微波辅助双水相萃取对提取得率和纯度的影响,并进一步通过红外光谱分析产物结构。结果表明:料液比1∶20(g∶m L)、相分离系数0.5的乙醇-(NH4)2SO4双水相体系,程序控温分为5级,依次为室温、40、50、60和70℃,对应控压为137.9、344.75、689.5、1 034.25、1 379 k Pa,每级微波辐射1.2 min后间歇5 min,进行微波功率自动连续调整,在此条件下虎杖果实中白藜芦醇与大黄素得率为0.694%与2.067%,纯度分别为82.68%与87.25%,提取效果明显优于微波辅助提取和微波辅助双水相萃取,且不会引起生物活性物质失活或变性。该方法能显著提高虎杖果实中白藜芦醇与大黄素提取得率,稳定性好、重复性好、精密度高、回收率高,同时又能简化其分离纯化工艺,降低生产成本,因此该方法适合用于虎杖果实中白藜芦醇与大黄素的提取分离。     

环境因素对虎杖的品质和药效影响的模型讨论

根据影响虎杖品质和药效的环境因素的分析,建立了一个多元线性模型。并且,通过10个产地的实测数据运用多元回归的方法对模型进行求解。从而可以根据该模型和产地的环境因素来预测该产地虎杖的品质和药效,为虎杖的优良种植基地的选择与建设奠定理论基础。     

沼气越冬技术研究进展

为了指导沼气越冬技术的进一步发展,从保温措施、升温方法、工艺改善及菌群优化4个方面论述了沼气池冬季产气技术的研究进展。     

同步荧光检测虎杖提取物中白藜芦醇含量的新方法

建立了一种同步荧光检测虎杖提取物中白藜芦醇含量的新方法,系统地研究了检测条件对白藜芦醇荧光强度的影响,以及实验的准确性、重现性、回收率。该方法的线性回归方程为y=18.90x+3.1298,荧光强度与浓度在0~1.68×10-5mol/L的范围内具有良好的线性关系,检出限为8.839×10-10mol/L。研究表明,该检测方法操作简便、可行、成本低,检测结果较为准确,能满足科研和工业生产的要求。