基于RTNs分子标记的虎杖地理属性研究

[目的]研究虎杖的地理属性。[方法]应用基于反转录转座子（RTNs）的iPBS技术对四川省内6个地区的9份虎杖种质资源进行遗传多样性研究。[结果]从50个iPBS引物中筛选出22个多态性较高的引物对9个样品进行扩增，共得到161条扩增片段，其中66．5％的片段具有多态性，每个引物可扩增出4．86个多态性片段。UPGMA聚类结果表明，利用iPBS技术，当遗传相似遗传系数0．79为闽值．可将供试材料分为5类。多样性分析结果表明，虎杖种质资源在分子水平上存在较大差异，基于iPBS标记的虎杖基因型与地理属性有密切关系。[结论]试验研究了虎杖的地理属性，可为虎杖种质资源分类和深入研究植物与环境的关系提供参考。     

18味中药提取物体外抗鸭瘟病毒活性的研究

我国传统中药在临床中广泛用于抗病毒疾病的治疗,该研究以18味传统中药为研究对象,希望找到对鸭瘟病毒具有良好抑制作用的中药原料。首先,通过细胞病变观察法(cytopathic effect,CPE)初步筛选了18味中药水提取物和醇提物进行体外抗鸭瘟病毒活性研究,发现当虎杖醇提物质量浓度为0.062 5mg/mL和0.031 3mg/mL,茜草醇提物质量浓度为0.007 8mg/mL时,可抑制鸭瘟病毒引起的鸭胚成纤维细胞病变。进而通过四甲基偶氮唑盐法[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]进一步研究了虎杖和茜草醇提物的体外抗鸭瘟病毒活性。结果显示:当虎杖质量浓度为0.062 5mg/mL、茜草质量浓度为0.007 8mg/mL时,对鸭瘟病毒的体外抑制率分别为76.50%、48.91%,虎杖醇提物的半数有效质量浓度(50%inhibitory concentration,IC50)为0.022 7mg/mL,茜草醇提物的IC50>0.007 8mg/mL。提示虎杖和茜草醇提物均有不同程度的体外抗鸭瘟病毒活性,其中虎杖效果优于茜草,具有进一步研究的价值。     

HPLC同时测定虎杖多个指标成分的含量

[目的]建立测定虎杖中多种特征成分含量的分析方法,对不同产地的虎杖药材进行品质评价。[方法]建立HPLC色谱法,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(C18柱250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-浓度1%磷酸水溶液按以下梯度洗脱,0～30 min,乙腈20%～38%;30～70 min,乙腈38%～100%;流速为1.0 ml/min;检测波长为284 nm。[结果]白藜芦醇苷、白藜芦醇、大黄素苷、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚对照品浓度在一定的范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率在95.00%～105.00%(n=5)。[结论]该方法操作简便,结果准确可靠,可同时测定中药虎杖类蒽醌及中芪类成分的含量,为虎杖药材的品质评价提供一种简易、可行、特征性强的分析方法。     

虎杖中白藜芦醇的吸附特性和稳定性研究

[目的]研究用大孔树脂吸附分离虎杖中白藜芦醇的特性及其稳定性。[方法]分析大孔树脂对白藜芦醇的吸附曲线,分析流速、乙醇体积分数、提取时间、提取温度、pH等因素对大孔树脂吸附白藜芦醇的影响。[结果]AB-8树脂对虎杖中白藜芦醇的吸附更接近单分子层吸附。以1.5 m L/min流速通过层析柱时吸附率更高,用70%乙醇提取虎杖中白藜芦醇时提取率最高,3 h是最佳提取时间;60℃是最佳提取温度;p H为4时白藜芦醇提取率最高。稳定性研究表明,白藜芦醇在酸性条件下保存浓度基本不变。[结论]用大孔树脂吸附分离白藜芦醇具有一定的优势。     

种植密度对虎杖种苗生长发育的影响

分析不同种植密度对一年生虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.)幼苗生长发育的影响及二年生苗在5 cm×5 cm种植密度下的生长发育情况。结果表明,不同种植密度对一年生虎杖幼苗茎粗有影响,对茎分枝数无显著影响。二年生虎杖种苗在5 cm×5 cm的种植密度下根系多、主根长、地上茎高、芽头数多,且茎粗≥(0.74±0.15)mm,芽头≥2个。这可能是虎杖种子种苗在生长过程中,种植密度、年限与虎杖种苗地下根茎长度、茎粗生长呈正相关,需要进一步深入研究。     

虎杖提取物对CCl4致建鲤肝损伤抗氧化系统的影响

主要探讨基础饲料中添加虎杖提取物对建鲤肝损伤中抗氧化性能的影响.建鲤被随机分为6个组,每组20条,即Ⅰ组(CCl4)、Ⅱ组(0.5％虎杖提取物)、Ⅲ组(1％虎杖提取物),按每10 g体质量0.05 mL体内注射30％ CCl4;Ⅳ组(0.5％虎杖提取物)、Ⅴ组(1％虎杖提取物)体内不注射CCl4,只注射同体积植物油;Ⅵ为空白对照组,也注射同体积植物油.每日饲喂2次,连续8周,注射72 h后模型建立成功.检测建鲤血清中LDH、GPT、GOT、TP、ALB的表达水平;检测肝组织匀浆中SOD、GSH-Px、MDA、CAT、T-AOC含量的变化.结果表明:1％的虎杖提取物(Ⅴ组)对于清除自由基,防治肝损伤有很好的效果,能显著提高SOD、GSH-Px含量,降低MDA含量;显著提高T-AOC和CAT含量;显著增加TP、ALB活性;显著降低血清中GPT、GOT、LDH的活性,与空白对照组相比,差异不显著(P＞0.05);与CCl4组相比,差异显著(P＜0.05),而0.5％和1％虎杖提取物对照组则无明显变化.     

虎杖中白藜芦醇苷不同检测方法的比较

[目的]分析比较不同方法测定的人工栽培虎杖中白藜芦醇苷的含量差异。[方法]采用高效液相色谱法(HPLC)和毛细管电泳法(CE)对人工栽培虎杖中白藜芦醇苷进行测定,并对这2种方法的线性范围、定量重现性、最低检测限及分离分析时间进行比较研究。[结果]选定HPLC-FD为测虎杖中白藜芦醇苷的最佳检测方法。检测条件:色谱柱为Diamonsil-C18(250 mm×0.46 mm,5μm),激发波长为334 nm,发射波长为408 nm,流动相为浓度25%乙腈,流速为1.0 ml/min,柱温为25℃,进样量为10μl。[结论]高效液相色谱法是测定虎杖中白藜芦醇苷含量较理想的方法。     

虎杖不同组织部位及其愈伤组织中白藜芦醇含量的测定

通过超声波提取虎杖根状茎中不同组织部位及其不同愈伤组织中的白藜芦醇,并采用HPLC方法检测分析白藜芦醇含量.结果表明:在虎杖根状茎不同组织部位中,白藜芦醇含量(质量分数计)依次为:根状茎芽＞髓＞木质部＞韧皮部＞周皮,其中根状茎芽中白藜芦醇质量分数高达0.425 1%,髓中白藜芦醇质量分数为0.2664%.在同一批根状茎芽诱导的不同颜色愈伤组织体系中,棕褐色愈伤组织中白藜芦醇质量分数最高为0.055 0%,淡黄绿色愈伤组织中仅为0.000 5%.光照培养条件下的愈伤组织中白藜芦醇质量分数为0.0104%,黑暗培养条件下为0.007 5%.不同外植体诱导的愈伤组织中白藜芦醇质量分数依次为:根状茎芽＞茎＞叶,以根状茎芽诱导的愈伤组织中白藜芦醇的质量分数最高,为0.055 0%.不同组织部位诱导的愈伤组织中白藜芦醇质量分数为:鲜茎(根状茎中韧皮部)＞根状茎中木质部＞根状茎中髓,鲜茎中达到0.009 0%.     

不同生境条件对虎杖白藜芦醇含量的影响

对武陵山区不同地域采集的虎杖植株进行白藜芦醇含量比较测定,结果表明:白藜芦醇含量有较大的差异,以常德2号地区的虎杖白藜芦醇含量最高,为0．337％。通过对30个不同地区、不同地理位置的虎杖生长环境调查,发现虎杖最佳生长条件为:坡向南坡,坡位上坡,土壤种类黄棕壤,土壤质地粘土,土壤母质板页岩,郁蔽度有零星光照。     

虎杖人工栽培研究综述

为全面了解虎杖栽培研究情况,查询并梳理与虎杖栽培有关的文献资料,纵向勾勒出我国虎杖栽培研究的历史演化趋势,横向展现虎杖栽培的主要研究成果。研究发现,近20年来我国学者对虎杖栽培的研究热度逐年增高,但存在研究领域过热与空白并存等问题。今后,我国相关学者对虎杖人工栽培的研究重点应该放在种质资源调查和筛选、新品种培育等方面。