中压柱层析法分离白藜芦醇的研究

对虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb．et Zucc．)中的白藜芦醇进行了提取分离和含量测定。考察了浸提温度、浸提液浓度、浸提时间和次数、料液比等5个因素对白藜芦醇提取的影响，确立了白藜芦醇最佳提取条件为：浸提液体积分数为95％，浸提温度60℃，料液比11:1，回流提取3次，每次60min。采用中压硅胶柱层析法分离白藜芦醇，产物经重结晶后用高效液相色谱测定含量达99．28％。结果表明所建立的制备及分离纯化工艺可用于白藜芦醇的生产。     

利用虎杖渣进行杏鲍菇工厂化栽培

利用虎杖渣进行杏鲍菇(Pleurotus eryngii)栽培,并以常用配方CK为辅助对照。结果表明,配方1、配方2、配方3的生物转化率均达到对照(CK)的水平,配方2的栽培效果最好,平均每袋增收0.1元。     

虎杖不同组织总RNA提取方法探索

介绍了一种适合虎杖根、茎、叶、花等不同组织总RNA提取的方法(CTAB法结合酸酚、高盐溶液以及Trizol),该方法较原来的CTAB法耗时短,DNA去除干净,所提取的总RNA可直接用于RT-PCR,GeneRacer,Northern等操作。     

虎杖O-甲基转移酶基因(PcOMT)的克隆与生物信息学分析

虎杖(Polygonum cuspidatum)是蓼科蓼属的多年生草本植物,具有重要的药用价值,作为传统中药,在临床上有广泛应用.O-甲基转移酶在植物次生代谢产物合成过程中发挥重要作用,通过对虎杖转录组数据库的分析,获得O-甲基转移酶基因的序列信息.提取生长8周的虎杖叶片的mRNA,经反转录获得cDNA.设计特异性引物...     

虎杖苷转化菌的筛选及所产酶的性质研究

利用专一性底物法,以虎杖水提液为初始培养基,经过初筛复筛获得转化菌。根据菌落形态特征对菌株进行初步鉴定,对转化菌产酶的酶学性质进行研究。结果表明,通过筛选得到1株特异性转化虎杖苷为白藜芦醇的菌株,经形态学鉴定为青霉菌。该菌产的酶最适p H值为5. 0,最适温度为60℃; Fe2+、Na+和Ca2+对酶活力有激活作用;虎杖苷是该酶理想的水解作用底物。利用该菌产的酶液转化虎杖原料,虎杖苷的转化率最高可达到100%。     

中药虎杖注射液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒研究

用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,测定中药虎杖注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共4组,第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药虎杖混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种病毒尿囊液与西药金刚烷胺混合液,HA滴度4log2。第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度7log2。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。结果表明,中药虎仗注射液对鸡胚无毒性作用。中药虎杖与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中增殖。     

高效液相色谱法测定虎杖中白藜芦醇的含量

采用高效液相色谱法测定了虎杖不同生长条件及不同部位的白藜芦醇含量。建立了以色谱柱为Zorbax CB-C18(4.6×250 mm,5μm),流动相为甲醇-水(35∶65,V/V),流速为0.8 mL/min,检测波长为306 nm,柱温为室温,进样量为80μL的高效液相色谱方法。结果表明,白藜芦醇浓度在2～100μg/mL范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 9);平均回收率为99.1%,RSD=1.2%(n=6)。野生虎杖和组织培养虎杖白藜芦醇含量存在较大差异,虎杖不同部位白藜芦醇含量也存在较大差异,其中以野生虎杖根中白藜芦醇含量最高。虽然在不同培养条件下,虎杖的不同部位都含有白藜芦醇,但与野生虎杖根相比含量差距较大,不能代替野生虎杖根的药用价值。     

中国秆野螟属(Ostrinia)雄性外生殖器系统比较与分析

对分布于中国的11种秆野螟属(Ostrinia)昆虫雄性外生殖器结构进行了比较分析,秆野螟属昆虫雄性外生殖器由生殖瓣、爪形突、抱器、抱器腹、阳茎组成.秆野螟属昆虫雄性外生殖器形态相似度较高,根据爪形突分裂情况,该11个种分为两个大群,其中亚洲玉米螟、欧洲玉米螟、苍耳螟、豆螟、酒花螟、麻螟、刺菜螟和款冬螟为一个大群,而酸模螟、虎杖螟和克什米尔螟为一大群:在第一大群中,根据爪形突中侧叶与两侧叶长度比分为两个亚群,在第一亚群中,根据抱器腹具刺区与无刺区的长度分为两个亚亚群.     

虎杖苷对牛卵母细胞体外成熟的影响

为研究虎杖苷(PD)对牛卵母细胞体外成熟的影响,本实验在体外成熟液中添加不同浓度(0、0.5、1.0、2.0μmol/L)PD,对牛卵母细胞体外培养22～24 h,统计第一极体排出率,然后对各组卵母细胞进行体外受精并统计胚胎的发育情况;最后分析PD对牛卵母细胞体外成熟作用机制。结果表明:与对照组(0μmol/L)相比,PD各处理组的第一极体排出率显著提高,体外受精后的胚胎分裂率无差异,而1.0μmol/L PD处理组囊胚率较对照组显著提高,1.0、2.0μmol/L PD处理组囊胚期细胞数较对照组显著提高;进一步分析发现,与对照组相比,1.0μmol/L PD可显著降低细胞内活性氧水平,提高抗氧化基因GPX4、SOD1表达水平,显著提高细胞内总谷胱甘肽含量。综上,成熟液中添加1.0μmol/L PD可提高细胞内抗氧化基因的表达以及提高谷胱甘肽含量,降低细胞内的活性氧含量,从而有利于牛卵母细胞的成熟以及早期胚胎发育。     

虎杖苷十一碳烯酸酯的酶法合成与动力学研究

为建立绿色、高效、高选择性合成虎杖苷十一碳烯酸酯双前药的生物催化体系,本研究以棉状嗜热丝孢菌(Thiermomyces lanuginosus)脂肪酶(TLL)为催化剂,以反应介质、底物摩尔比、温度及反应时间等因素为变量,探究了 TLL催化虎杖苷十一碳烯酰化反应的特性.结果表明,TLL可在丙酮中实现对虎杖苷的高效转化,...