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为了建立适于基层单位应用的针对副溶血性弧菌检测的特异PCR方法,检测副溶血性弧菌的基因序列.针对该菌的属特异性基因t1基因进行引物设计,扩增片段大小为449 bp.运用该PCR法可特异性的从副溶血性弧菌ATCC17802标准株中扩增出目的基因片段,与GenBank上发表的序列同源性为100%.而经常污染海产品的溶藻弧菌,嗜水气单胞茵标准株J-1,铜绿假单胞茵标准株ATCC27853结果均为阴性.该PCR法最低检出菌体DNA量为10-2ng以及最低检出菌数为5.7 × 103 CFU/mL.对临床上送检的35份样品进行菌体DNA PCR方法检测并同时与国标GB/T4789.7-2003中使用的检测方法进行比对,两种检测方法的结果完全符合,与国标中使用的检测方法相比可大大缩短鉴定时间.因此该PCR法能快速鉴定当前副溶血性弧菌流行群,有利于流行病学溯源等研究. 相似文献
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用菌体凝集抑制试验诊断羊伪结核病 总被引:4,自引:0,他引:4
将羊伪结核棒状杆菌用吐温-80等化学试剂进行处理,使菌体分散的单个细胞均匀地悬浮于溶媒中,制备为抗原。然后用其与已知的阳性及阴性血清进行试验,探讨诊断羊伪结核病的快速、简便方法,即菌体凝集抑制试验。结果,供治疗试验用的30只羊在人工接种伪结核棒状杆菌后的第2 ̄13周,有28只羊的血清一直呈现非凝集或沙粒状凝集,即阳性反应;2只羊的血清一直呈现絮状凝集阴性反应。该期间的患羊检出率为93%。而由屠宰场 相似文献
6.
用RT-PCR技术对猪瘟兔化弱毒C株、石门强毒株(Shimen)、近期地方流行的属于第1群毒株的新疆毒株(XJ)和第2群代表毒株甘肃临洮(LT)株E2基因的主要抗原区进行扩增,均得到约561bp的基因片段;经克隆测序及序列分析,该基因编码187个氨基酸残基,预计蛋白分子质量为21.7ku。将这4个基因分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,经酶切、PCR扩增和测序分析确证其正确插入到表达载体中,阅读框是正确的,从而构建成重组表达载体。重组质粒转化至宿主菌BL21(DE3)中,用异丙基硫代-β-半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,对表达的蛋白用SDSPAGE电泳、免疫印迹和薄层凝胶扫描分析。结果表明,E2基因的主要抗原区可以在大肠埃希氏菌中表达,表达的蛋白多以包涵体形式存在,表达产物的分子质量约为50.0ku,与理论推测的分子质量一致;薄层凝胶扫描分析表明。表达蛋白约占菌体蛋白总量的20.1%;免疫印迹结果证明,表达的E2蛋白可被猪瘟阳性血清所识别。 相似文献
7.
利用啤酒糟中的残糖和碳水化合物,适量补充氮源和菜籽粕,采用微生物固态发酵方法生产菌体蛋白饲料。试验结果表明:产品比发酵前粗蛋白提高10%以上,粗纤维降解率达10%以上,16种氨基酸总和占粗蛋白总量的比例达到了82%以上。试验证明啤酒糟为主要原料生产菌体蛋白饲料对有效利用啤酒糟资源和开发饲料蛋白具有重要的意义。 相似文献
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牛羊属于反刍动物,其体内的蛋白质是靠饲料中氨化物中的氨,经瘤胃微生物的作用合成菌体蛋白后被牛羊利用。当饲料质量下降(如冬春枯草季节)或采食量不足时,进入畜体内的氨化物相应减少,使分解的氨不能满足微生物合成菌体蛋白的需求,造成牛羊体内蛋白质缺乏。尿素本身对 相似文献
10.
<正>1粗饲料原料发酵制成菌体蛋白饲料大量实践证明,通过功能微生物活菌制剂(不是一般的微生物),可以将粗饲料原料发酵制成菌体蛋白饲料,是最经济最有效的省钱途径。发酵助剂中的乳酸菌、酵母菌等功能性菌群 相似文献