荧光定量PCR法比较研究健康和子宫内膜炎奶牛阴道菌群结构

为揭示奶牛阴道菌群结构与子宫内膜炎发生关系,本实验选择健康奶牛和患有子宫内膜炎奶牛各5头,采集其阴道粘液样品,提取样品总DNA,利用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法对这两类奶牛阴道菌群结构的差异进行了检测.检测结果显示,健康奶牛阴道内乳杆菌属(p＜0.05)、芽孢杆菌属(p＜0.05)和魏斯氏菌属(p＜0.01)的细菌数量显著或极显著高于子宫内膜炎奶牛,而子宫内膜炎奶牛阴道内大肠杆菌数量显著高于健康奶牛(p＜0.05).研究结果表明,阴道菌群结构失衡可能是奶牛子宫内膜炎发生的原因.     

原位杂交技术展望

1969年美国耶鲁大学Gall和Pardue首先创立了原位杂交技术，确定了爪蟾核糖体基因定位于卵母细胞的核仁中。与此同时，Buongiomo—Nardelli和A maldi John及其同事等相继利用同位素标记核酸探针进行了细胞或组织的基因定位。Oah应用3H标记的兔乳头状瘤病毒cRNA探针进行了兔乳头状瘤组织的冰冻切片进行杂交，首次用原位杂交技术检出病毒DNA在细胞中的定位。     

纳米技术在动物免疫和疾病检测中的应用

纳米技术是21世纪三大技术之一,是在纳米尺度内调控物质结构的技术。在动物免疫方面,能利用纳米微量元素作为免疫增强剂和免疫佐剂。在疾病检测方面,能利用基于纳米技术的全自动PCR检测进行自动化大通量快速检测;而纳米荧光探针检测技术和纳米传感器检测技术则能进行快速、准确、灵敏的疾病检测。     

半自动化荧光标记PCRs研究鹿群11个微卫星标记的效率

用30对牛的和8对绵羊的微卫星引物检测4个热带鹿种：Eld‘‘‘‘‘‘‘‘s鹿、Swamp鹿(濒临灭绝)和Rusa鹿、Vietnamese Sika鹿(具有重要的经济价值)。4个鹿种中，38对引物中30对有扩增产物(占78．9％)。多态位点的条带数从E1d鹿的14条(47％)到Swamp鹿的20条(67％)都有。有11个微卫星座位在3个聚合酶链反应中是多重的，并用3个不同的荧光染料标记。为检测这种多重PCRs的效率，对4个鹿群进行一些基本的遗传学分析(平均等位基因数、杂合度、Fis值)。在Swamp鹿群中，考虑了排除亲缘关系和同卵个体的可能性。这种多重PCRs也被用来检测其它几个鹿种和亚种。本研究：在4个鹿种中，为研究群体遗传结构和多样性建立一种有用的方法，并且能用于其它鹿种。     

对3个桑品种生理生态特征的比较研究

研究了湖桑32号、农桑14号和丰田2号等3个桑树品种的光合特征及叶绿素的部分参数。3个品种的光补偿点为3.58～50.10μmol/(m2.s),表观量子效率为0.022～0.051,湖桑32号>农桑14号>丰田2号;光饱和点为1 436.78～1 571.43μmol/(m2.s),丰田2号>农桑14号>湖桑32号;CO2补偿点为62.87～103.40μmol/mol,CO2饱和点为921.88～1 055.56μmol/mol,其中,湖桑32号的CO2补偿点和饱和点、羧化效率及二磷酸核酮糖羧化酶的最大再生速率(Pmax)均较显著高于其它两个品种;叶绿素相对含量丰田2号>农桑14号>湖桑32号,表明丰田2号单位叶面叶绿体数量较多,具有相对较大的光合潜力;光化学效率和光合电子传递效率分别为0.746 2～0.801 8、1.58～3.43,其中丰田2号的叶绿素荧光参数值显著高于其它2个品种,具有一定光适应和抗逆性能力。     

用荧光染色法检测BVDV最佳条件的探索

本实验对荧光染色法检测BVDV的最佳条件进行了摸索,包括MDBK细胞培养的密度、BVDV一抗和二抗浓度等因素对荧光染色效果的影响,获得BVDV染色一抗稀释度在1:150~1:200,二抗稀释度在1:200为最佳稀释比例,MDBK的细胞密度在104个/ml时制备的荧光染色片最优,可获得最佳观察效果,有利于判定实验结果.     

real-time PCR将成为分子生物学研究的重要检测技术

近年来,real-tim e PCR技术作为一种敏感、快速、简便、重复性好的检测技术已广泛出现在生物学研究领域。real-tim e polym erase chain reaction(RT-PCR)是Kary M ullis在二十世纪八十年代在PCR的基础上发展革新的一项新技术,它能使小量DN A片段扩增一百万倍。这项技术推动了分子生物学技术的发展,简便的操作不仅可应用于普通实验,还可用于人类基因组工程。根据2003年调查的406位科学工作者,48%的研究人员近年来正在使用这项技术。随着使用这项技术的人数增多,各类相关的论文也相继增多。real-tim e PCR将会影响PCR技术的发展,并…