屎肠球菌荚膜多糖的提取纯化及其多糖含量的测定

为提取纯化屎肠球菌（E.faecium）荚膜多糖（CPS）并测定其多糖含量,试验采用高压法破碎菌体,加入核糖核酸酶（25 μg/mL）、脱氧核糖核酸酶（0.5 mg/mL）、溶菌酶（0.25 mg/mL）及蛋白酶K （1.25 mg/mL）等去除核酸和蛋白质,得到荚膜多糖粗提物,经过30 ku和100 ku超滤离心管超滤浓缩和DEAE Sepharose Fast Flow层析柱层析后,得到纯化的屎肠球菌荚膜多糖,再利用苯酚-硫酸法测定其含量。结果表明,成功从屎肠球菌中提取纯化出荚膜多糖,其含量为75.21%,初步确定了屎肠球菌荚膜多糖的提取纯化方法,为今后相关疫苗的研制奠定了基础。     

新疆部分地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌荚膜多糖分型的研究

为调查新疆奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌主要流行血清型,本研究采用玻板凝集和双重PCR方法对不同地区奶牛乳房炎乳样中分离的117株金黄色葡萄球菌进行血清分型.结果表明荚膜多糖5型占10.26％(12/117),8型占13.68％(16/117),336型占64.96％(76/117),未分型菌株占11.11 ％(13/117).该研究为新疆奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌疫苗菌株的筛选提供了依据.     

1株致病性兔无乳链球菌的分离、鉴定与系统发育分析

从患病家兔肝、肺、脑和心血中分离到1株链状革兰阳性球菌P110323,以1×106 CFU/mL菌液灌胃感染健康家兔后,表现出站立不稳、四肢划动、惊厥和呼吸障碍等症状,感染96 h后,死亡率为60％.解剖见肺淤血、出血;肝、脾和肾肿大,坏死;大脑肿胀,脑膜充血,脑回肿胀扁平,脑沟变浅.分离菌在BHI平板上形成湿润、边缘整齐的灰白色菌落;在5％的脱纤维羊血平板上形成透明的β溶血环;V-P试验、水解精氨酸与马脲酸等为阳性;水解七叶苷和利用甘露醇、山梨醇和乳糖产酸为阴性.16S rDNA系统发育分析显示分离菌与Streptococcus difficilis和Streptococcus agalactiae聚在一簇.gyrB基因系统发育分析表明分离菌属于无乳链球菌(S.agalactiae),结合细菌形态特点和生理生化特性鉴定该病原菌为无乳链球菌(S.agalactiae),多重PCR方法确定该菌荚膜多糖类型为Ia型.     

金黄色葡萄球菌荚膜多糖的制备及生物学特性

采用Cetavlon、冷酚、不同浓度乙醇沉淀、离心等步骤精制的荚膜多糖,用生物学、免疫学等方法分析检测其理化特性及免疫原性。结果表明：提取的荚膜多糖具有良好的多糖特性、结构特征和免疫原性。     

复合PCR进行胸膜肺炎放线杆菌血清型快速分型

根据胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae，APP）各血清型之间外毒素apxⅠ、apxⅡ、apxⅢ、apxⅣA基因差异，设计6对引物，对16株标准菌株进行1次5对引物的多重PCR和1次根据apxⅣA基因设计1对引物PCR的扩增，得到各血清型特异性片段，并将片段特征相同的血清型归为同一组。通过这2步PCR分组情况的不同能将16株标准菌株中的大多数血清型区别开，但是仍然不能将血清2型和8型、血清9型和11型、血清5型中的2个亚型以及血清12型和13型区分开。又根据血清2型英膜多糖（CP）基因差异设计1对引物将血清2型和8型区分开。将此分型系统应用于23株未知病原菌检测，检测到胸膜肺炎放线杆菌9株，并全部能够将其分型。本试验PCR分型体系可以作为胸膜肺炎放线杆菌血清型分型的一种快速而有效的鉴定方法。     

猪链球菌2型的发病特点及防治现状

猪链球菌呈世界分布,在养猪业发达国家分布更为广泛.在20世纪50年代,英国和荷兰就有人报道了猪群中由链球菌引起的脑膜炎、关节炎和败血症.猪链球菌是革兰氏阳性兼性厌氧球菌,根据其荚膜多糖抗原性的差异分为35个血清型,即1～34和1/2型,其中2型(SS2)是毒力最强、危害最严重、流行最广泛的血清型之一,可引起猪败血症、脑膜炎及急性死亡,并可导致人感染,甚至死亡.     

金黄色葡萄球菌荚膜多糖的研究进展

金黄色葡萄球菌作为引起人和动物发病的一种主要的致病菌,已严重影响到人们的身体健康和畜牧业的发展。致病性金黄色葡萄球菌多数含有荚膜成分,并且这种荚膜成分与金黄色葡萄球菌的毒力和抗噬菌作用有关。文章从金黄色葡萄球菌荚膜多糖的血清学分类、分子结构、影响因素、表达调控和致病机制等方面简要介绍了目前国内外关于金黄色葡萄球菌荚膜多糖的研究进展。     

胸膜肺炎放线杆菌荚膜多糖输出基因部分序列的克隆鉴定、序列拼接和分析应用

用设计的引物对胸膜肺炎放线杆菌1、3、6、9型标准株的荚膜多糖输出部分基因序列进行了扩增，克隆，测序，分别获得4个型的部分cpxDC基因序列和3型的部分cpxD基因序列。对克隆序列和GenBank中已知序列进行序列拼接，分别拼接出1、3、6型的荚膜输出cpxD基因全序列。通过基因序列分析发现，胸膜肺炎放线杆菌1、3、5、6、9型荚膜多糖输出基因已知序列间的同源性很高，达89％～99．88％。1、3、5、6型cpxD基因的推导氨基酸序列间的同源性为93％～99％。在cpxDC基因的保守区内设计出1对种特异性引物，对胸膜肺炎放线杆菌进行鉴定和检测，结果从8个标准型菌株和3株分离株中均扩出约720bp的阳性片段，其他6种能引起猪呼吸道疾病的细菌均呈阴性。所建立的PCR方法最低检出量为10Pg，最适模板量为5ng（50ptL）。试验结果表明，胸膜肺炎放线杆菌不同血清型间的荚膜多糖输出基因存在着高度的保守性。设计出的种特异性引物能用于胸膜肺炎放线杆菌的检测和鉴定。     

猪链球菌病的鉴定及防治

猪链球菌是猪的重要病原菌之一,可引起猪的多种疾病,侵害各年龄阶段的猪,通常以败血症、脑膜炎、关节炎、淋巴结炎为主要特征,还可引起人类脑膜炎、败血症等,导致严重疾患,甚至死亡。链球菌的抗原构造比较复杂,有核蛋白抗原（P抗原）,无群特异性;群特异性抗原（C抗原）,具有群特异性;型特异性抗原,又称表面抗原,具有型特异性。根据细菌的荚膜多糖抗原（CPS）可将之分为35个血清型,即1型～34型和1／2型（同时含有1型和2型抗原的菌株）。多数参考株来源于人,17、18、19型和21型来源于健康猪,20型和30型来源于病牛,33型来源于羔羊,