猪脐静脉血管内皮细胞的分离及体外培养研究

为建立一种操作简单并且能获得大量猪血管内皮细胞的分离培养方法,本研究采集新生健康长白猪脐带,取其脐静脉血管,灌注0.1%的Ⅰ型胶原酶,于37℃水浴消化10 min后收集内皮细胞,培养于含20%胎牛血清的M199培养基中,长满单层后用胰酶消化传代培养。并对培养的细胞形态学、相关抗原和其他特征以及对病毒的易感性进行鉴定。结果表明,Ⅰ型胶原酶消化后可获得大量内皮细胞,细胞培养后的形态学观察显示细胞贴壁生长良好,呈典型的铺路石状排列;第Ⅷ因子相关抗原和细胞摄取乙酰化低密度脂蛋白均呈阳性,内皮细胞比率可高达100%。传3代后的生长曲线显示细胞传代后延迟期小于1 d,对数生长期约3 d,第5 d进入平台期,第7 d开始脱落死亡。病毒感染试验表明所获得的内皮细胞对猪瘟病毒高度易感,病毒生长与常用的PK-15没有区别。上述研究结果表明本研究建立的血管内皮细胞分离培养方法简便有效,为大量制备原代血管内皮细胞提供了可靠的方法。     

Analysis on Differential Expression Genes in Porcine Aortic Vascular Endothelial Cells Induced by Apolipoprotein C Ⅲ

The aim of this study was to investigate the differential expression genes induced by ApoCⅢ,and study the function of ApoCⅢ.Porcine aortic vascular endothelial cells were successfully isolated using enzyme digestion,and then screened the differential expression genes induced by ApoCⅢ using the Solexa high-throughput sequencing technology.The results showed 647 differential expression genes,including 390 up-regulated genes and 257 down-regulated genes.The qRT-PCR results verified that the gene expression results from Solexa sequencing data were reliable.GO and Pathway analysis showed that the function of differential expression genes were related to immune response,cell apoptosis and death.These findings suggested that ApoCⅢ affected the physiological function of porcine aortic endothelial cells by the molecular pathways of inflammation,cell adhesion and apoptosis,which provided a theoretical basis for further understanding the molecular mechanisms of atherosclerosis caused by ApoCⅢ.     

淋巴血管浸润在伴有鳞状分化的pT1期膀胱尿路上皮癌中的意义

目的 探讨淋巴血管浸润(lymphovascular invasion,LVI)在伴有鳞状分化的pT1期膀胱尿路上皮癌中的预后意义.方法 回顾性分析105例伴有鳞状分化的pT1期尿路上皮癌患者的临床及病理资料,按照是否存在LVI分为2组,比较LVI阳性与LVI阴性患者病理特征,并通过单变量和多变量Cox回归分析影响膀胱...     

奶牛血乳病的防治

由奶牛乳腺部毛细血管损伤所致,挤出的乳汁呈粉红色或混有血丝、凝血块等,称为奶牛血乳病.血乳致使大批牛奶被废弃,造成经济损失.     

银耳多糖浸泡肉鸡种蛋对肉鸡鸡胚尿囊膜血管生成、雏鸡生长性能和抗氧化性能的影响

旨在探讨银耳多糖溶液浸泡种蛋对肉鸡鸡胚尿囊膜血管生成、雏鸡生长性能和抗氧化性能的影响,为银耳多糖在禽类养殖中的应用提供一定理论依据。选取大小相近的132枚肉鸡种蛋,进行常规孵化,随机分为3组,每组44枚。在7～9胚龄时,每天用0、20、40 mg/kg银耳多糖溶液浸泡3组种蛋6 min,浸泡后继续孵化。13胚龄时,固定其尿囊膜,采用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件测量鸡胚尿囊膜血管生成面积和小血管数量;14胚龄时采集鸡胚尿囊膜,测定鸡胚尿囊膜上血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor 2,FGF2)基因表达量;其余种蛋孵化至出雏并采集1日龄雏鸡血清及胸肌、肝脏、脑组织、小肠,并称质量。测定肝脏和血清抗氧化指标,及肝脏生长激素受体(growth hormone recepter, GHR)、胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor-1,IGF-1)的基因表达量。结果表明,与对照组相比,高、低浓度组银耳多糖溶液浸...     

盐酸克伦特罗对猪脊髓组织的影响

克伦特罗（CL）,化学名为I-（4-氨基-3,5-二氯苯基）2-叔丁氨基乙醇。其盐酸盐纯品为白色结晶性粉末,分子式为C12H18CL2N2O.HCl,分子量为313．66,无臭,味微苦,易溶于水、醇类,微溶于氯仿、丙酮,不溶于乙醚,熔点为172-176℃。克伦特罗是强效β2受体激动剂,其作用机理是使血管平滑肌和骨骼肌的β2受体兴奋,使支气管扩张,     

家畜几种血管和淋巴管肿瘤的剖检变化与实验室诊断

1海绵状血管瘤 海绵状血管瘤最常见于犬,肿瘤常呈单个生长,有的呈多个生长。由于肿瘤从血管内皮衍生而来,因此能发生在身体任何部位,通常发生在犬的腿、腹侧、颈、脸和眼睑的皮肤或皮下。海绵状血管瘤要与血管变形,大量的血管修复增生和炎症组织或与其他高度血管化的肿瘤区别开来。剖检可见肿瘤常位于皮下,大小是0.5~3.0厘米,呈卵圆形或圆盘形,中等硬度,轮廓明显呈微红黑色,切开时,血液从切面渗出。用甲醛溶液固定的标本,切面干燥多孔,呈黑色。皮肤血管瘤容易与黑色素瘤相混淆。     

重组人骨形态发生蛋白2复合物对犬胫骨骨折愈合中4种相关细胞因子的作用

研究重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、纤维蛋白凝胶(FG)与妥布霉素复合物加速骨折愈合。bFGF与rhBMP-2和妥布霉素以纤维蛋白胶为载体复合,将具有抗生素缓释系统的复合物注入犬胫骨骨折处,并做内固定,于术后第2周,采集犬胫骨骨折处样品,每隔2周采集1次,共采集4次,将每次采集的样品制成组织切片,采用免疫组织化学的方法检测4种因子,并对组织切片进行分析,用多功能真彩色细胞图象分析管理系统,分析所得数据用SPSS18.0版统计软件进行统计学分析。血管内皮细胞生长因子(VEGF)在试验组第2周表达强阳性,而对照组阳性表达较弱;前4周,试验组血小板源性生长因子(PDGF)阳性率呈上升趋势,强于对照组;前8周,试验组胰岛素样生长因子(IGF)和转化生长因子-β1(TGF-β1)阳性率均高于对照组。说明bFGF与rhBMP-2和妥布霉素以纤维蛋白胶为载体的复合物在骨折愈合具有中促进细胞增殖、黏附、趋化、分化,以及骨折末端血管生长和形成的作用。     

山楂原花青素的大孔吸附树脂纯化及动脉血管舒张作用

为了比较HPD826氢键型吸附树脂比通用型D101树脂对极性较强的原花青素有较好的纯化作用,且采用树脂法制备的提取物是否具有确切的内皮依赖性舒张动脉血管的活性,本研究通过静态试验比较了2种大孔吸附树脂对山楂果中原花青素的吸附-解吸性能,HPD826型吸附量、解析率及吸附速率常数均优于D101型。用HPD826树脂通过动态试验优化了吸附分离程序,上样浓度为25 mg/mL,流速为1.5 BV/h,解吸程序为:水洗1.5BV;45%(v/v)乙醇解吸1.5 BV;90%乙醇活化洗脱1 BV;最后水洗2 BV,洗脱流速为1.5 BV/h。用这种程序,45%乙醇解吸部分的原花青素得率为81.48%,经HPLC测定,制备的提取物中以表儿茶素和原花青素B2为主,10种原花青素成分总含量达干重的42%,其对内皮完整的血管具有舒张作用,浓度在1.4～140 mg/L范围内。     

斑马鱼不同发育时期血管内皮生长因子受体2基因表达的实时定量PCR分析

[目的]探讨血管内皮生长因子受体2（VEGFR2-）基因在斑马鱼不同发育时期的表达。[方法]分别从12、24、48、72和96 h的斑马鱼胚胎和仔鱼中提取总RNA,用实时定量RT-PCR方法检测VEGFR2-基因表达,采用2^-△△Ct法进行数据分析。[结果]VEGFR2-基因表达量在12-72 h呈上升趋势,在96 h有所下降。12 h表达量最低,72 h表达量最高,与其他发育期均有显著差异。[结论]斑马鱼血管发育至72 h达成熟阶段。血管发育成熟前,VEGFR2-基因表达水平逐步增长;血管发育成熟后,VEGFR2-基因表达水平下降。