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[目的]用克降载体pUC19构建乳杆菌自杀质粒及乳杆菌基因缺失工程菌.[方法]以鼠李糖乳杆菌为研究对象,在质粒pUC19的多克隆位点插入氯霉素抗性基因构建pUC19-CCM载体;在pUC19-CM载体氯霉抗性基因的两侧均添加1个用于同源重组的同源臂,再构建成自杀质粒pUC19-CM-D.将自杀质粒pUC19-CM-D.将自杀质粒pUC19-CM-D转化乳杆菌进行抗生筛选即可得到目标基因被抗性基因替换的突变株.[结果]通过改造pUC19质粒,获得了可应用于构建鼠李糖乳杆菌D-乳酸脱氢酶基因缺陷型菌株的自杀质粒pUC19-CM-D.运用抗性基因替换方法来构建基因缺陷型菌株,在一定程度上避免了质粒整合带来的问题,同时提供了一个筛选标记,能够通过一次筛选即可得到缺陷型菌株.这种自杀质粒的改造和基因缺陷型菌株的构建方法具有通用性,可以应用于其他的载体和菌株.[结论]pUC19-CM-D质粒的构建及应用为乳杆菌基因缺失工程菌的构建提供了1个快速有效的手段,也为乳杆菌基因功能研究奠定了基础.
Abstract:
[Objective] The aims were to construct a new suicide plasmid of Lactobacillus and gene deletion engineering bacteria of Lactobacillus with pUC19 vector,[Methods]pUC19-CM was constructed by inserting a chloramphenicol resistant gene into the multi-cloning site of pUC19,and then two homologous fragments were cloned into each side of the pUC19-CM to construct suicide plasmid pUC19-CM-D.[Results]A replacement mutant strain,whose target gene was replaced by resistant gene,could be obtained by transforming the suicide plasmid pUC19-CMD into Lactobacillus for resistance screening. [Conclusion] The construction and application of pUC19-CM-D provided a fast and efficient means of construction of gene deletion engineering bacteria of Lactobacillus,and laid a foundation for study of gene function of Lactobacillus. 相似文献
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死者长已矣,生者常戚戚,轰动全国的富士康跳楼自杀事件是正在进行式还是过去式,我们不想去过多的探讨,其产生根源众说纷纭,官方、资方、当事人、专家、媒体等莫衷一是,作为农机行业工作者,这些也不是我们讨论的焦点,我们要深究的问题是我国农机生产企业应从中汲取怎样的教训,怎样避免类似事件在农机行业出现。 相似文献
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自杀意念与行为作为儿童青少年心理危机的典型事件一直备受关注,是影响儿童青少年心理健康和生命安全的重大问题.基于自杀的相关理论和实证研究,采用自杀意念自评量表、自尊问卷、中小学生心理素质量表和亲子亲合量表,在家长和孩子知情自愿的前提下,以学校为单位对中国西南地区17 352名中小学生进行问卷调查,探讨了中小学生自杀意念的影响因素及潜在心理过程.结果表明:(1)亲子关系能显著负向预测中小学生的自杀意念;(2)自尊在亲子关系对中小学生自杀意念的影响中发挥中介作用;(3)心理素质对该中介模型的后半段起到了显著的调节作用,即心理素质越高,自尊对自杀意念的负向预测作用越弱,这表明心理素质可以缓冲自尊对自杀意念的影响.本研究结果启示教育者和监护者,不仅应高度重视亲子关系对中小学生自杀意念的影响,着力建设良好的家庭生态系统和亲子关系,还应该通过多种途径提高青少年的自尊和心理素质来降低自杀意念,维护心理健康和生命安全. 相似文献
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<正>张家口市宣化区2006-01—2013-09月自杀死亡人员共106例,对此106例死亡人员进行性别、年龄、自杀方式与自杀原因分析,借以分析宣化区自杀人员死亡特点,为社会公共卫生问题的研究及自杀的预防、自杀死亡的法医学鉴定提供参考。1案例资料1.1死者性别与年龄106例死者中,男66例,女40例,男:女1.65:1。最小年龄12岁,最大年龄86岁,20岁以下10 相似文献
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黄强 《河北北方学院学报(自然科学版)》2015,(3)
<正>自杀为一种社会现象,是社会、家庭、环境及心理等多种因素综合作用的结果,逐渐被大家关注和重视[1]。我们对怀安县近15年间366例自杀案件自杀者性别、年龄、自杀方式、自杀原因及法医学鉴定、现场勘查等情况进行回顾性分析,以期了解本县自杀情况,为自杀案件的侦破提供参考。 相似文献
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美琪 《广西农业生物科学》2011,30(3):341-341
美国印第安纳大学医学院的研究人员在他们最近的研究中揭示了机体先天防御系统中,一组蛋白质通过诱导细菌自杀防止细菌入侵机体的机制。这一发现为抗生素耐受性细菌的治疗指明了新方向。 相似文献
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