单抗标记检测新城疫病毒免疫胶体金试纸条的研制

利用柠檬酸钠还原氯金酸,形成胶体金颗粒,选择直径20 nm的胶体金颗粒标记单克隆抗体4E8,用兔抗鼠二抗喷洒在硝酸纤维素膜上作为对照线,用另一株单抗5E6作为检测线,制备成胶体金试纸条。用试纸条检测120份泄殖腔样品,结果与病毒增殖后HA法测得的结果符合率为95.8%,HA效价在1∶2以上,试纸条均能检测为阳性,与其他病毒的阳性血清没有交叉反应,且室温下可有效保存6个月。试纸条应用方便、快速,适合临床推广以及流行病学调查。     

胶体金免疫层析试纸条法和HPLC-QTOF-MS法检测保健品中那非类化学药物的比较

采用胶体金免疫层析试纸条法与高效液相色谱-飞行时间串联质谱法(High performance liquid chromatography-quadrupole time of flight-mass spectrometry,HPLC-QTOF-MS)检测保健品中的那非类药物,并对这两种方法进行了比较.结果表明:胶体金免疫层析试纸条法对豪莫西地那非的检测限为30μg/mL,对硫代艾地那非、红地那非、那红地那非及伪伐地那非的检测限均为60μg/mL;HPLC-QTOF-MS法对豪莫西地那非、硫代艾地那非、红地那非、那红地那非、伪伐地那非的检测限为0.2μg/mL.两种方法对实际样品的定性检测结果一致.与HPLC-QTOF-MS相比,胶体金免疫层析试纸条具有操作简便、快速、直接的特点,可作为样品的快速定性筛查,HPLC-QTOF-MS法可作为阳性样品的进一步确证和精确定量.     

冷鲜猪肉中单增李斯特菌快速检测试纸条的初步研制

【目的】建立一种可快速检测单增李斯特菌的胶体金试纸条的制备方法。【方法】用自制的单核增生性李斯特菌作为抗原对BALB/c小鼠进行免疫,之后通过杂交瘤技术进行细胞融合制备出特异性良好的单克隆抗体,并通过双抗夹心ELISA体系筛选出2株稳定且配对最佳的抗体,利用胶体金免疫层析技术组装试纸条并分析其特性。【结果】筛选出的2株单抗命名为3B7、5C9,测得其灵敏度均为10~4 CFU/mL,抗体的最适pH值是8.0,最佳抗体标记是24μg,试纸条的灵敏度为10~6 CFU/mL且特异性良好。【结论】初步制备出可快速、准确检测冷鲜猪肉中单增李斯特菌的试纸条。     

免疫层析快速诊断试纸条的制备及在养猪业上的应用

胶体金免疫层析技术是一种微量、特异、简便和结果容易判定的新的检测方法,非常适用于基层兽医和猪场。本文综述了免疫层析快速诊断试纸条的基本原理、制备方法、标记技术以及目前在养猪业上的应用情况。     

甲壳类水产品主要过敏原原肌球蛋白胶体金免疫层析快速检测方法的建立及应用

为实现甲壳类水产品主要过敏原的快速检测,实验使用凡纳滨对虾原肌球蛋白(TM)作为检测靶标,构建了胶体金免疫层析检测方法。使用天然TM分别免疫SD大鼠和新西兰大白兔制备多克隆抗体,以40 nm胶体金标记的鼠多抗作为检测抗体,以兔多抗为捕获抗体,基于双抗体夹心原理组装免疫层析试纸条,并应用于市售食物样品的检测。结果显示,组建的免疫层析试纸条可在5 min之内显示结果,视觉检出限为10 ng/mL,对虾、蟹、克氏原螯虾及美洲螯龙虾等甲壳类水产品的特异性高,但与蛤蜊、扇贝存在微弱的交叉反应;在不含甲壳类水产品的市售食品中的加标回收率为81%～126%,准确性良好;试纸条的批内、批间变异系数低于15%,市售实际食物样品的检测结果与食物过敏原标签一致。研究表明,该方法具有高灵敏度与检测特异性,可在多种基质与商业化食品中实现甲壳类过敏原的有效检测,具有较强的实际应用价值。     

胶体金免疫技术在猪瘟诊断上的应用进展

胶体金免疫技术是一种新型免疫学检测技术.它具有简便、快速、特异性强、敏感性高、结果判断直观等优点.在猪瘟的快速诊断中得到了广泛应用,显示出了良好的应用前景.论文就胶体金免疫技术及其在猪瘟快速诊断上的应用现状及发展前景作一简要综述.     

免疫胶体金层析技术在兽医临床诊断中的应用

随着动物医学不断发展创新,免疫胶体金层析诊断技术在不断发展,有效提高了临床应用上检出率与诊断的准确性。本文通过介绍免疫胶体金层析技术的原理、构造、分类应用及诊断来说明该技术在兽医临床诊断中的应用价值。     

一种苯醚氰菊酯胶体金免疫快速检测试纸条的研制

通过制备苯醚氰菊酯半抗原,研制出一种能够检测蔬菜、水果中苯醚氰菊酯的胶体金免疫层析试纸条,检测限为1μg/kg,检测时间仅为15 min,假阳性率和假阴性率均为0,符合《农残办技术材料要求及审查程序》要求,该试纸条能够应用到基层实验室的大批量样本检测,具有实际意义。     

奶牛孕酮免疫胶体金快速检测试纸条的研制

为了及时、准确地诊断母奶牛妊娠状态,研究建立了奶牛孕酮(P4)胶体金免疫层析法的快速检测技术.先制备完全抗原(P4-BSA),用其免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,抗体经亲和纯化后测定其浓度.采用柠檬酸三钠还原法制备颗粒直径为15 nm的胶体金,以P4-OVA和羊抗鼠二抗分别作为检测带和质控带包被在硝酸纤维素膜上,将...     

氯化钙对花生中黄曲霉毒素B1提取及其快速检测结果的影响

本文以氯化钙为蛋白沉淀剂、黄曲霉毒素B1为靶标,探究了70%甲醇水（V/V）提取液中不同含量氯化钙对花生中黄曲霉毒素提取及其免疫检测结果的影响;采用样品加标回收的方法,研究比较了五种不同含量氯化钙对胶体金免疫层析试纸条和ELISA检测结果的影响。研究结果表明,样品经含1% CaCl2 （m/V）的甲醇水处理后,用胶体金免疫层析试纸条检测时,试纸条T线颜色梯度变化,不同浓度加标回收率等参数均得到明显改善,前处理效果显著;选取20份花生实际样品,经过这种前处理之后,进行胶体金免疫层析试纸条和ELISA检测,同时将其检测结果与免疫亲和层析高效液相色谱法（IAC-HPLC）进行比对,胶体金免疫层析试纸条与IAC-HPLC检测结果符合率为90%,间接竞争ELISA与IAC-HPLC检测结果相关性系数达0.996,表明本研究所改进的样品前处理方法能提高免疫检测准确度,具有很好的应用性。